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整體化色譜柱填料技術 　　整體化色譜柱(monolithic column)也是近年液相色譜柱填料研究的另一個重要方向。整體柱，又稱為棒狀柱，是一種用有機或無機聚合方法在色譜柱內進行原位聚合的連續床固定相。與常規裝填的液相色譜柱相比，整體柱具有更好的多孔性和滲透性，可以使用高流速實現快速的傳質分離。聚合物整體柱一般采用離子交換或親和色譜方式，用于生物大分子如蛋白、抗體、DNA 的超快速分析，這樣的色譜柱包括Bio-Monolith 離子交換柱和Protein A、Protein G 親和色譜柱，以及ThermoroSwift IEX 離子交換柱和ProSwift RP 柱。使用此類整體化色譜...

液相色譜填料技術進展 　　2　液相色譜填料技術進展 　　近年來，液相色譜填料技術的發展主要在于快速液相色譜分析、多種色譜固定相及各種分離模式的應用。 　　2.1　基于亞2微米填料的高效液相色譜柱技術 　　范氏(Van Demeter)方程是一個描述線速度與塔板高度(柱效)關系的經驗式。在范氏方程中，填料粒徑大小是影響塔板高度的變量之一(圖2)，因此，提高分離效能的有效方法之一是減小填粒粒徑。較小粒徑的填料有利于降低渦流擴散及改變傳質路徑，不僅使柱效更高，而且即使在較高的線速度下，理論塔板高度也不會增大，使色譜柱的分離性能得以保持，并有效地縮短分析時間和減少溶劑消耗，更加綠色環保。200...

液相色譜填料技術進展 正在得到更的應用，例如，使用1.8 μm 的C18 色譜柱分析《中國藥典》2015 年版一部中的復方丹參滴丸指紋圖譜，其時間可以控制在10 min 以內中國藥典對亞2 微米色譜柱技術革新和應用給予高度的關注，適時地修訂了液相色譜法的相關內容。中國藥典2015 年版四部通則0512 色譜法規定，若需使用小粒徑(約2μm)填充劑，輸液泵的性能、進樣體積、檢測池體積和系統的死體積等必須與之匹配;如有必要，色譜條件也應作適當的調整。當對其測定結果產生爭議時，應以品種項下規定的色譜條件的測定結果為準。天津口碑好液相色譜填料整體化色譜柱填料技術 　　整體化色譜柱(monolithi...

表面多孔型填料技術 　　表面多孔型顆粒填料(superficially porous particles，SPPs)又稱核- 殼型填料(core shell particles)，商品化的產品有5μm的Poroshell 300 SB C18，該填料采用4.5 μm的硅膠實心內核，外面包裹一層0.25μm的多孔層，平均孔徑為300 ，主要用于蛋白質和單抗的快速分析。由于表面多孔型填料具有極窄的粒徑分布和擴散路徑，同時可以減小渦流擴散，縮短傳質路徑和減弱傳質阻力，即便使用較粗的填料顆粒也可獲得較高的柱效。目前，一般使用亞3μm 的表面多孔型填料(2.6~2.7 μm)，即可獲得亞2微米填料的柱效...

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多種分離模式的應用 　　目前液相色譜中主要應用的依然是反相色譜，不過隨著色譜技術的發展和分析要求的提高，其他一些分離模式正逐步得到更加的應用，如親水作用色譜(HILIC)、超臨界流體色譜(supercritical　fluid chromatography，SFC)、臨界點色譜(liquid chromatography at critical condition，LCCC)和多維色譜技術等。 　　HILIC 是近年來逐漸被認可的一種強極性化合物分離方法，它是基于極性化合物在色譜固定相表面水層和流動相之間進行的親水分配作用達到保留的一種分離模式。在HILIC分離中，流動相中水的比例越小，則...

多種分離模式的應用 　LCCC 法是根據聚合物的功能基團、嵌段結構的差異進行聚合物分離的一種色譜技術。LCCC 法的原理是基于臨界點之上、臨界點之下以及臨界點附近的標度理論。當使用多孔填充材料作為固定相時，分子排阻色譜(size exclusion chromatography，SEC)和相互作用色譜(interaction chromatography，IC)的分離機制在分離聚合物時同時發生作用。在某個特殊色譜條件(固定相、流動相組成、溫度)下，存在2 種分離機制的臨界點，被稱為焓熵互補點或色譜臨界條件(critical conditions)或臨界吸附點(critical adsorpti...

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不同選擇性的色譜固定相 　　由于反相色譜分離基于多種作用力的結果，不同鍵合相或同一種鍵合相但不同的硅膠基質、封端技術和鍵合技術，其疏水作用、空間位阻、氫鍵作用、靜電作用、π-π作用、偶極-偶極作用等能力不同，對化合物的分離能力不同，故而表現出不一樣的選擇性。比如，在碳鏈中嵌入極性的酰胺基團，不僅能夠使鍵合相的水相兼容性增加，而且可以提高化合物與固定相之間的氫鍵作用能力，使之獲得與普通C18 填料不一樣的選擇性。這樣的色譜柱有ZORBAX Bonus RP 和Waters Symmetry shield 等。Huawei Gu等利用Bonus RP 色譜柱與其他常規碳鏈反相色譜柱選擇性的不同，...

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不同選擇性的色譜固定相 　　由于反相色譜分離基于多種作用力的結果，不同鍵合相或同一種鍵合相但不同的硅膠基質、封端技術和鍵合技術，其疏水作用、空間位阻、氫鍵作用、靜電作用、π-π作用、偶極-偶極作用等能力不同，對化合物的分離能力不同，故而表現出不一樣的選擇性。比如，在碳鏈中嵌入極性的酰胺基團，不僅能夠使鍵合相的水相兼容性增加，而且可以提高化合物與固定相之間的氫鍵作用能力，使之獲得與普通C18 填料不一樣的選擇性。這樣的色譜柱有ZORBAX Bonus RP 和Waters Symmetry shield 等。Huawei Gu等利用Bonus RP 色譜柱與其他常規碳鏈反相色譜柱選擇性的不同，...