熒光壽命顯微成像（Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM）是熒光壽命測量和熒光顯微技術的結合，已普遍應用于生物醫學研究和其他領域。FLIM具有高特異性、高靈敏度、可定量測量微環境變化和分子間相互作用、不受探針濃度、激發光強度和光漂白影響等優點。在過去的十年中，光學技術硬件和軟件、材料科學和生物醫學的迅速發展，共同促進了FLIM技術及其應用的巨大進步。盡管經過幾十年的技術發展，FLIM技術在實際應用中仍然面臨著一些挑戰，例如：FLIM的成像分辨率也會受到光衍射的限制，因此，在實際應用中，我們經常需要在成像速度、圖像質量和微環境壽命精度之間進行權衡。在種類繁多的顯微技術中，熒光壽命顯微成像技術被普遍地應用于生物學研究及臨床診斷等領域。天津顯微熒光壽命成像哪家實惠

熒光壽命是指分子受到光脈沖激發后返回基態之前在激發平均停留的時間，處于激發態的熒光分子在從激發到基態的過程中發射熒光釋放能量。熒光壽命取決于熒光分子所處的微環境，通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。熒光壽命成像技術有兩種：時間域和頻率域。（1）時域FLIM：需要脈沖光源，所以一般在雙光子的系統上比較常見FLIM（熒光壽命成像Fluorescence Life-time imaging Microcopy簡稱FLIM）。（2）頻域FLIM：需要一個相位調制的光源，有用LED調制的， FLIM對很多研究都有幫助，以下為熒光壽命成像FLIM的應用：1）細胞體自身熒光壽命分析；2）自身熒光相對熒光標記的有效區分；3）具有相同頻譜性質的不同熒光標記的區分；4）活細胞內水介質的PH值測量；5）局部氧氣濃度測量；6）活細胞內鈣濃度測量；7）時間分辨Forster共振能量轉移（FRET）：納米級尺度上的遠程測量，環境敏感的FRET探針定量測量。湖南單分子熒光壽命成像原理熒光壽命成像技術是通過建立檢測到的熒光事件的直方圖來確定壽命。

熒光壽命成像的原理：如果分子環境刺激激發態衰變而不發射光子，則熒光強度會降低（淬滅）。熒光淬滅是一條單獨的發射路徑，因此在動力學上與熒光過程形成競爭關系。激發態存儲現在可以通過一個以上的過程衰變，從而縮短熒光壽命。這種壽命的改變可用于收集分子環境的信息。一種特殊類型的淬滅是將激發能量以非輻射的方式傳遞到相鄰的不同熒光染料中：“熒光共振能量轉移”，FRET。此時，不只第1個熒光染料（供體）變暗，壽命變短，而且第二個熒光染料（受體）在“錯誤的”激發顏色下開始發光。由于這種效果的產生需要兩種熒光染料（小于10 nm）的密切接觸，因此將其用作研究分子相互作用的“分子標尺”。

熒光壽命成像是一種什么樣的技術？是一種新型的熒光成像技術，它能夠對不同種類或處于不同狀態的生物組織提供更好的對比度，并反映熒光團及其所處微環境參數的定量分布。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、熒光染料分布不均勻、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響,是熒光光譜分析法的有效補充。超快激光技術，高速、高靈敏度探測技術，以及圖像處理技術的發展，都促進了FLIM 技術的發展．尤其是將熒光壽命成像和共焦顯微技術以及多光子激發熒光顯微技術結合，進一步拓寬了FLIM在生物學領域的應用范圍。熒光的特性包含有：熒光激發和發射光譜、熒光強度、量子效率、熒光壽命等。

熒光壽命成像和熒光光盤有什么區別？與熒光光譜一樣，熒光壽命也是熒光物質的一種內在特有性質，不受熒光物質濃度、激發光強度等因素的影響。熒光壽命成像能在不受熒光強度影響因素影響的條件下，在納米分辨率水平對蛋白互作進行研究，或者通過 FRET 探針研究分子環境變化，更重要的是其測量數據準確性高、易重復。通過熒光壽命成像還可以對樣本所處的微環境進行檢測、對樣品組份進行分離等等。在傳統的熒光強度和熒光光譜兩個維度的基礎上，又增加了熒光壽命這一新的成像維度，大幅度拓展了該系統的應用范圍。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術結合起來，實現人體三維熒光壽命成像，實現人體三維功能成像奠定基礎。佛山動物熒光壽命成像哪家實惠

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