熒光壽命成像在生命科學研究中的應用：自發熒光FLIM被普遍應用于非標記生物成像領域。所謂自發熒光，即生物細胞本身便包含熒光分子，稱為內源性熒光分子團。FLIM通過對自發熒光分子團（如NAD(P)H）熒光壽命的考察，可以實現細胞代謝的監測。這種方案無需人為對樣品加入熒光試劑便可以發射熒光，有效減少了熒光染料對樣品的毒性、熒光分子與樣品的非特異性結合及染料對生理性能的干擾影響。外源分子探針FLIM借助于外部熒光染料的注入以產生熒光。如今，為了利用FLIM對物理條件（包括粘度、溫度、酸度和氧化作用）的敏感性，已經開發出了許多適用于體內和體外應用的光學探針。不同熒光基團激發態停時間不同，大多數生物熒光素的熒光壽命時間在 0.2 - 20 ns。浙江分子熒光壽命成像怎么樣

熒光壽命顯微成像（Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM）是熒光壽命測量和熒光顯微技術的結合，熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度、可定量測量微環境變化和分子間相互作用、不受探針濃度、激發光強度和光漂白影響等優點。熒光壽命成像（FLIM）對細胞信號傳導及調控，蛋白間的相互作用等生物研究發揮著很大作用。利用熒光壽命成像顯微鏡技術可實現可以實時監控發光納米顆粒在活細胞內的穩定性。在過去的十年中，光學技術硬件和軟件、材料科學和生物醫學的迅速發展，共同促進了FLIM技術及其應用的巨大進步。湖南顯微熒光壽命成像原理熒光壽命成像系統是一種用于化學領域的分析儀器。

熒光壽命成像可以在體現熒光物質形貌信息之外，還能夠靈敏地反應熒光基團生化特性以及周圍微環境的變化情況。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術結合起來，實現人體三維熒光壽命成像，進一步實現人體三維功能成像奠定基礎，有潛力應用于瘤識別，病變診斷等領域。熒光壽命是熒光基團在通過發射熒光光子返回基態之前在其激發態下保持平均多長時間的量度。不同熒光基團激發態停時間不同，大多數生物熒光素的熒光壽命時間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測經典方法為點對點的時間相關單光子計數（TCSPC），但由于過去檢測硬件的局限和復雜的使用而沒有被普遍地應用于科學研究。隨著技術的發展，在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。

影響熒光壽命成像測量的因素：高濃度樣品的影響：1）當激發光照射高濃度樣品時，在激發光入口附近產生熒光，但這些熒光并不能進入熒光檢測器。2）高濃度的分子之間相互作用而發生活性阻礙現象。3）熒光的再吸收：即熒光光譜的短波長端和激發光譜的長波長端如果相互重疊，則發生熒光再吸收。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。散射光的影響： 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影響較大。校正辦法：先用短的激發光激發，檢出溶液的拉曼峰，然后進行熒光光譜校正。因為熒光光譜不隨激發光波長的改變而改變，而拉曼光卻隨之改變。熒光壽命成像和生物發光的不同之處是什么？

熒光壽命成像顯微術是一種利用熒光染料固有特性的成像技術。除了具有特有的發射光譜外，每個熒光分子還有特有的壽命，它反映了熒光基團在發射光子之前處于激發態的時間。除了標準的熒光強度測量外，壽命分析還可以提供其他信息。提高質量，熒光壽命成像提供了額外的信息，有助提高共聚焦成像的質量。 它非常適合用于區分熒光發射光譜重疊的熒光探針，或消除不需要的背景熒光信號。功能成像，FLIM 是一種用于測量和量化成像數據的重要應用。 由于壽命信息與熒光基團濃度無關，因此它非常適合用于功能成像。功能成像超越了傳統的分子樣本位置和濃度記錄，通過該技術可以進一步研究分子功能、相互作用及其環境。熒光壽命成像可以定量的區分參與FRET和沒有參與FRET的分子數量。湖南顯微熒光壽命成像原理

熒光壽命成像不受光漂白的影響。浙江分子熒光壽命成像怎么樣

熒光壽命成像可以干什么？熒光壽命成像圖像中每一個像素點在phasor圖上都有一個對應的點。因此我們可以獲取每個像素點的壽命信息，也可以獲知每一壽命所對應的圖像區域。熒光壽命成像可以提供熒光強度（光子數）和光子壽命的空間分布，具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。通過雙光子激發（結合飛秒脈沖和共焦顯微鏡）可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。這種無損檢測技術，無需解剖或專門制造分層樣品，不但可在樣品表面，還可在樣品表面以下實現深度解析測量。特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復合材料以及其相關的原理探究和設計優化。浙江分子熒光壽命成像怎么樣

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