Co-IP（免疫共沉淀）和ChIP（染色質(zhì)免疫沉淀）是兩種常用于研究蛋白質(zhì)與DNA或蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的實驗方法。實驗原理方面的區(qū)別：Co-IP利用抗體與抗原之間的特異性結(jié)合，將目標(biāo)蛋白及其與之相互作用的蛋白一起拉下來，進而研究它們之間的相互作用。而ChIP則是在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物，并通過超聲或酶處理將其隨機切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過抗原抗體的特異性識別反應(yīng)沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段。Co-IP外源檢測靈敏可控但難模擬體內(nèi)環(huán)境，內(nèi)源檢測真實但背景復(fù)雜，選擇需權(quán)衡實驗?zāi)康模∩虾５鞍椎鞍谆プ鳈z測CoIP-Western Blot

Co-IP（免疫共沉淀）技術(shù)的基本原理是利用抗原與抗體之間的專一性作用，將特定蛋白質(zhì)及其與之相互作用的蛋白質(zhì)一同沉淀下來。這種技術(shù)常用于研究蛋白質(zhì)之間的相互作用和復(fù)合物形成。在Co-IP實驗中，研究人員首先會制備針對目標(biāo)蛋白的特異性抗體，并將其與固相載體偶聯(lián)。然后，將含有目標(biāo)蛋白及其相互作用伙伴的細胞或組織裂解液與抗體-載體復(fù)合物混合。由于抗體與目標(biāo)蛋白之間的特異性結(jié)合，目標(biāo)蛋白及其相互作用伙伴會被固定在抗體-載體復(fù)合物上。接下來，通過洗滌步驟去除非特異性結(jié)合的雜質(zhì)，以確保沉淀下來的蛋白質(zhì)復(fù)合物是特異性的。然后，使用適當(dāng)?shù)南疵摼彌_液將目標(biāo)蛋白及其相互作用伙伴從抗體-載體復(fù)合物上洗脫下來，以便進行后續(xù)的分析和檢測。中國香港互作蛋白檢測CoIP-mass spectrometryCoIP實驗需設(shè)對照組，排除非特異結(jié)合，確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠！

CoIP-Mass是一種檢測細胞內(nèi)蛋白互作組的套餐技術(shù)。該技術(shù)通過聯(lián)合免疫共沉淀技術(shù)和質(zhì)譜檢測技術(shù)，對目的蛋白在特定細胞/組織內(nèi)的互作蛋白，進行系統(tǒng)的檢測和分析。該技術(shù)適用于目的蛋白在特定細胞/組織中的蛋白互作組數(shù)據(jù)檢測，或用于不同遺傳背景/實驗條件下的互作組差異研究。因此，該技術(shù)是研究細胞內(nèi)蛋白互作調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的常規(guī)前置技術(shù)。CoIP-WB是一種檢測細胞內(nèi)蛋白互作的驗證技術(shù)。該技術(shù)通過聯(lián)合免疫共沉淀技術(shù)和WesternBlot蛋白檢測技術(shù)，對目的蛋白在特定細胞/組織內(nèi)的互作關(guān)系進行探究，明確蛋白直接的相互作用關(guān)系。該技術(shù)適用于目的蛋白在特定細胞/組織中的蛋白互作檢測驗證，或用于不同遺傳背景/實驗條件下的互作差異研究。因此，該技術(shù)是研究細胞內(nèi)蛋白互作調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的常規(guī)檢測技術(shù)。

CoIP-Mass互作組驗證，即在互作組分析篩選的基礎(chǔ)上，進一步利用CoIP-WB技術(shù)對感興趣分子進行靶向檢測，更加精細，也是互作組驗證的必由之路。驗證成功上岸的基礎(chǔ)是理想的互作組數(shù)據(jù)庫和豐富的分析經(jīng)驗，方能事半功倍。廣州基云生物，在IP互作組檢測和關(guān)鍵機制分子篩選驗證領(lǐng)域，具有豐富的經(jīng)驗，您的互作機制研究。

IP-WB（免疫沉淀-Western Blot）實驗流程主要包括以下步驟：樣品制備：收集細胞或組織樣品，進行適當(dāng)?shù)牧呀馓幚恚葬尫偶毎麅?nèi)的蛋白質(zhì)。免疫沉淀：將特異性抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物。隨后，將復(fù)合物與固相載體（如磁珠）結(jié)合，通過洗滌去除非特異性結(jié)合的雜質(zhì)。電泳分離：將免疫沉淀得到的蛋白質(zhì)復(fù)合物進行SDS-PAGE凝膠電泳，根據(jù)分子量大小將蛋白質(zhì)分離成不同的條帶。轉(zhuǎn)膜：將凝膠上的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相膜上，以便進行后續(xù)的Western Blot檢測。Western Blot檢測：利用特異性抗體檢測目標(biāo)蛋白或其相互作用伙伴的存在。通過顯色反應(yīng)可視化目標(biāo)蛋白，觀察并記錄結(jié)果。以上步驟完成后，可以對Western Blot結(jié)果進行分析，從而驗證蛋白質(zhì)之間的相互作用情況。新手如何入門CoIP實驗技術(shù)。

IP-WB（免疫沉淀-Western Blot）是一種常用的實驗方法，用于驗證蛋白質(zhì)之間的相互作用。在IP-WB實驗中，首先使用特異性抗體將目標(biāo)蛋白從細胞或組織裂解液中免疫沉淀下來。這一步驟確保了只有與目標(biāo)蛋白特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)被富集。隨后，將免疫沉淀得到的蛋白質(zhì)復(fù)合物進行SDS-PAGE凝膠電泳，使蛋白質(zhì)按照分子量大小分離。接著，通過Western Blot技術(shù)，利用特異性抗體檢測目標(biāo)蛋白或其相互作用伙伴的存在。Western Blot利用抗體與蛋白質(zhì)的特異性結(jié)合，通過顯色反應(yīng)可視化目標(biāo)蛋白，從而實現(xiàn)對蛋白質(zhì)相互作用的驗證。IP-WB技術(shù)結(jié)合了免疫沉淀的高特異性與Western Blot的高靈敏度，能夠有效地驗證蛋白質(zhì)之間的相互作用，并為進一步的功能研究和藥物開發(fā)提供有力支持。免疫共沉淀法證實蛋白互作，基于抗體專一性，揭示生理性相互作用。上海蛋白蛋白互作檢測CoIP-Western Blot

如何快速開展Co-IP實驗。上海蛋白蛋白互作檢測CoIP-Western Blot

免過疫共沉淀技術(shù)是一種研究兩種蛋白在體內(nèi)是否存在相互作用的有效方法，通過抗體和已知蛋白結(jié)合，從而捕獲整個已知蛋白復(fù)合物，進而研究復(fù)合物中與已知蛋白存在相互作用的蛋白。

Co-IP免疫共沉淀技術(shù)有什么優(yōu)缺點？

優(yōu)點:

1.在Co-IP分析中，誘餌蛋白和獵物蛋白是天然構(gòu)象的。

2.誘餌蛋白與獵物蛋白的相互作用發(fā)生在體內(nèi)，受外界影響小。

3.不需要克降和異源表達，如果有抗體，該分析很快。

缺點:

1.低親和力或蛋白質(zhì)間短暫的相互作用可能不會被檢測到。

2.由于不能排除其他蛋白參與的可能，Co-IP的結(jié)果不能確定相互作用是直接的還是間接的。

3.該方法非通用，需要有特定的抗體。 上海蛋白蛋白互作檢測CoIP-Western Blot