免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法，是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是：當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內結合的蛋白質Y也能沉淀下來。目前多用精制的prorein A預先結合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體反應后，beads上的prorein A就能吸附抗原達到富集的目的。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合；也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。IP-WB技術結合免疫沉淀與Western Blot，高特異、高靈敏驗證蛋白互作，支持功能研究與藥物開發(fā)！天津蛋白蛋白互作檢測CoIP WB檢測
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在agarose beads上的蛋白質A的抗體免疫沉淀A蛋白，那么與A蛋白在體內結合的蛋白質B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離，對B蛋白進行檢測，進而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內與興趣蛋白天然結合的，符合體內實際情況，得到的結果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合；也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。互作蛋白檢測CoIP-MassCo-IP外源檢測引入外源蛋白驗證互作，敏感度高但需嚴控條件，結合內源檢測更準確！
CoIP-Mass和CoIP-WB檢測要點：
試驗設計：盡量進行試驗組別設計和進行生物學重復檢測，提高后續(xù)驗證的陽性率。常規(guī)過表達單組（AbIPvsIgGIP）；動態(tài)互作組學（實驗組vs對照組vsIg組）。根據目的設計適當的生物學重復。如果后續(xù)以CoIP-Mass數據進行互作組標準分析，則需要3-4組生物學重復；如果后續(xù)以尋找關鍵互作蛋白，進行機制深入研究，則建議1-2次生物學重復。經驗顯示單次重復假陽性率90%。
蛋白表達和細胞量：細胞用量要求大(2-10e7細胞量），建議不少于5e7（金標準：320g離心細胞量50μl，保障項目用量）。低表達蛋白，建議使用過表達組進行檢測。蛋白表達可根據WB結果或初步根據數據庫判定（ProteomicsDB；HumanProteinAtlas）。
CoIP-Mass是一種檢測細胞內蛋白互作組的套餐技術。該技術通過聯合免疫共沉淀技術和質譜檢測技術，對目的蛋白在特定細胞/組織內的互作蛋白，進行系統的檢測和分析。該技術適用于目的蛋白在特定細胞/組織中的蛋白互作組數據檢測，或用于不同遺傳背景/實驗條件下的互作組差異研究。因此，該技術是研究細胞內蛋白互作調控網絡的常規(guī)前置技術。CoIP-WB是一種檢測細胞內蛋白互作的驗證技術。該技術通過聯合免疫共沉淀技術和WesternBlot蛋白檢測技術，對目的蛋白在特定細胞/組織內的互作關系進行探究，明確蛋白直接的相互作用關系。該技術適用于目的蛋白在特定細胞/組織中的蛋白互作檢測驗證，或用于不同遺傳背景/實驗條件下的互作差異研究。因此，該技術是研究細胞內蛋白互作調控網絡的常規(guī)檢測技術。IP-Mass技術結合免疫沉淀與質譜分析，研究蛋白互作與差異，助力生物醫(yī)學研究！
Co-IP（免疫共沉淀）實驗操作的要點。1.細胞裂解：確保采用溫和的裂解條件，以保持細胞內存在的蛋白間相互作用。使用非變性裂解液進行裂解和洗滌。2.抗體固定：選擇經過驗證的抗體，以減少假陽性結果。注意抗體與緩沖液的比例，避免抗體稀釋過度或過多。3.抗體結合：將抗體與樣品混合，確保抗體與目標蛋白充分結合。4.磁珠或瓊脂糖添加：將抗體固定的磁珠或瓊脂糖加入混合物中，使其與抗體-蛋白復合物結合。5.沉淀：通過磁珠或瓊脂糖的沉降，分離出蛋白復合物。6.洗脫：使用洗脫緩沖液將蛋白質復合物從磁珠或瓊脂糖上洗脫下來。7.增加洗脫之前的洗滌次數或在免疫共沉淀緩沖液中加入Triton X-100，以降低非特異性結合。遵循這些操作要點，可以確保Co-IP實驗的準確性和可靠性，從而得到準確的蛋白質相互作用結果。免疫共沉淀實驗：樣品處理、抗體處理、共沉淀、洗滌及鑒定，一氣呵成！河南互作蛋白檢測CoIP WB檢測
Co-IP技術利用抗原抗體結合，研究蛋白質互作，揭示其功能機制的有力工具！天津蛋白蛋白互作檢測CoIP WB檢測
Co-IP（免疫共沉淀）技術被廣泛應用于生物學和醫(yī)學研究領域，特別是在蛋白質相互作用、信號轉導、疾病機制等方面。因此，許多從事這些領域的研究人員都在使用Co-IP技術。以下人員可能會使用Co-IP技術。生物醫(yī)學研究人員：在研究疾病的發(fā)生機制、信號轉導通路、蛋白質相互作用網絡等方面，經常利用Co-IP技術來驗證和發(fā)現新的分子機制。藥物研發(fā)人員：在藥物研發(fā)過程中，通過Co-IP技術來鑒定和驗證藥物與特定蛋白質相互作用的分子機制，以評估候選藥物的有效性和選擇性。蛋白質組學研究人員：利用Co-IP技術結合質譜分析，對蛋白質相互作用網絡進行高通量鑒定和分析，揭示蛋白質在生命過程中的功能和調控機制。基礎醫(yī)學研究人員：在研究細胞生物學、分子生物學等基礎醫(yī)學領域時，也會使用Co-IP技術來探索蛋白質之間的相互作用和調控關系。天津蛋白蛋白互作檢測CoIP WB檢測