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廣州單分子熒光壽命成像使用步驟

來源: 發布時間:2022-08-21

熒光壽命是熒光團在發射熒光光子返回基態之前保持其激發態的平均時間長度。這取決于熒光團的分子組成和納米環境。熒光壽命成像將壽命測量與成像相結合:對每個圖像像素以測得的熒光壽命進行顏色編碼,產生額外的圖像反差。因此,熒光壽命成像可以提供關于熒光分子空間分布的信息和有關其生化狀態或納米環境的信息。有很多技術可以在顯微鏡環境中檢測熒光壽命。常見的的是基于供體(受體光漂白,FRET AB)或受體(敏化發射,FRET SE)熒光強度的技術。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。廣州單分子熒光壽命成像使用步驟

熒光壽命成像是一種新型的熒光成像技術,它能夠對不同種類或處于不同狀態的生物組織提供更好的對比度,并反映熒光團及其所處微環境參數的定量分布。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、熒光染料分布不均勻、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響,是熒光光譜分析法的有效補充。超快激光技術,高速、高靈敏度探測技術,以及圖像處理技術的發展,都促進了FLIM 技術的發展.尤其是將熒光壽命成像和共焦顯微技術以及多光子激發熒光顯微技術結合,進一步拓寬了FLIM在生物學領域的應用范圍。重慶紅外熒光壽命成像采購熒光壽命是用于幾種生物測定的穩健參數。

熒光壽命成像系統是一種用于化學領域的分析儀器,熒光壽命成像可以在體現熒光物質形貌信息之外,還能夠靈敏地反應熒光基團生化特性以及周圍微環境的變化情況。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術結合起來,實現人體三維熒光壽命成像,進一步實現人體三維功能成像奠定基礎,有潛力應用于瘤識別,病變診斷等領域。熒光壽命是熒光基團在通過發射熒光光子返回基態之前在其激發態下保持平均多長時間的量度。不同熒光基團激發態停時間不同,大多數生物熒光素的熒光壽命時間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測經典方法為點對點的時間相關單光子計數(TCSPC),但由于過去檢測硬件的局限和復雜的使用而沒有被普遍地應用于科學研究。隨著技術的發展,在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。

熒光壽命成像或FLIM是基于熒光樣品中不同區域的熒光的指數衰減速率的差異。由τ決定熒光壽命成像的每個像素的強度,這使研究人員可以查看具有不同熒光衰減率的材料之間的對比度,還可以產生顯示其他衰減路徑變化的圖像。可以通過使用脈沖源在時域中確定熒光壽命。當熒光物質被超短脈沖激發時,時間分辨的熒光將呈指數衰減。時間相關單光子計數(tcspc)通常被用作熒光壽命的測量方法,因為它補償了在源強度和單光子的脈沖幅度的變化。更具體地說,TCSPC由單個光子雪崩光電二極管(SPAD)記錄相對于激發激光脈沖的單個光子的壽命。重復記錄多個激光脈沖,并在記錄了足夠多的事件后,研究人員能夠建立所有這些記錄的時間點上事件數量的直方圖。然后,可以將該直方圖擬合到的指數壽命衰減函數的指數函數,并且可以相應地提取壽命參數。時域和頻域技術在各種熒光顯微壽命成像平臺中都有應用。

在種類繁多的顯微技術中,熒光壽命顯微成像技術(FLIM)具有對生物大分子結構、動力學信息和分子環境等進行高分辨高精度測量的能力,因此其重要性日漸提升,被普遍地應用于生物學研究及臨床診斷等領域。熒光的特性包含有:熒光激發和發射光譜、熒光強度、量子效率、熒光壽命等,其中,熒光壽命是指熒光分子在激發態上存在的平均時間(納秒量級)。分子的熒光壽命在幾納秒至幾百納秒之間,因此,測量熒光壽命需要極快響應時間的探測器。熒光壽命成像的發展很好地彌補了基于強度成像的問題,對生物醫學檢測有著重要的意義。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。重慶紅外熒光壽命成像采購

熒光壽命成像技術是一種在顯微尺度下展現熒光壽命空間分布的技術。廣州單分子熒光壽命成像使用步驟

熒光壽命成像顯微技術已在生命科學,臨床熒光壽命領域中得到了普遍的應用。成像,擴散光學層析成像,熒光相關光譜等等。使用我們專有的多維時間相關單光子計數技術(TCSPC),我們的FLIM和TCSPC系統具有超高光子效率的特點。因此,科學家,醫生,研究人員和其他用戶能夠進行TCSPC FLIM顯微鏡檢查,多波長FLIM,同時FLIM和快速獲取FLIM。生命科學是我們熒光壽命成像顯微(FLIM)設備的主要應用領域。我們的技術經常用于以下領域:分子影像學、代謝成像、FRET成像、同時進行NAD(P)H和pO2成像。廣州單分子熒光壽命成像使用步驟

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