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PEI轉染試劑優化方案

來源: 發布時間:2025-10-17

上海曼博生物醫藥科技有限公司成立于2019年,依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體,生命科學領域一站式供應鏈體系,以及高風險生物危險材料進出口平臺的優勢,曼博生物嚴格篩選國際創新且經過同行驗證過的產品和技術 ,引入中國市場,開發、孵育和推廣,致力于將全球創新產品和前沿技術帶入中國,集中在為細胞/基因領域、/免疫,抗體藥物研發客戶提供小眾創新產品,包括從Research grade到cGMP等級的無動物源培養基質,轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務,支持ATMP(Advance Therapy Medicinal Products)藥物研發從R&D到Clinical trial以及后期商業化的無縫轉化。更多關于Polysciences PEI相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!無需昂貴設備,PEI試劑實現經濟高效率的基因轉染方案。PEI轉染試劑優化方案

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PEI在于可以應用于體內試驗。當初試驗經費很有限,被逼無奈只能放棄脂質體2000,選擇PEI,以至于相當長的時間內,轉染試驗都不順利。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點:1. PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書,所用質粒盡量去內2. 轉染時,一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中,順序不可錯,輕微混勻,靜止20 min3. 轉染后4小時,一定要換液!換含有FBS的完全培養液!因為PEI對細胞毒性太大4. 如果后續試驗涉及到穩定篩選,建議把血清濃度適當提高。PS:事實證明,PEI是可行的,已經做出穩定細胞系了。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物!血清兼容PEI轉染試劑說明書PEI轉染試劑是不是可以保存在4度?

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對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優化。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物!

瞬時轉染方法1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養基。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉染試劑和脂質體轉染試劑的區別?

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轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養基。孵育細胞和分析結果:在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達。轉染24h后,將細胞傳代至新鮮的生長培養基中(將細胞稀釋10倍以上),在CO2培養箱中37℃孵育過一晚。第二天加入與轉染抗性基因相匹配的篩選藥物。約1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經常更換含篩選藥物的生長培養基。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉染試劑和其他轉染試劑相比有什么優勢呢?CHO細胞PEI轉染試劑價格多少

PEI轉染試劑是粉末的還是液體的?PEI轉染試劑優化方案

線性PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉染試劑具有如下優點:優越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質量控制每批次線性PEI轉染試劑均經過轉染測試。將eGFP表達質粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態的HEK-293細胞,轉染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。更多關于PolysciencesPEI相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉染試劑優化方案

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