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Recombinant Mouse HPX Protein

來源: 發布時間:2024-07-15

Lambda核酸外切酶的生產和應用涉及到多種生物技術和分子生物學技術,主要包括:1.**基因克隆(GeneCloning)**:首先將Lambda核酸外切酶的基因從噬菌體λ的基因組中克隆出來,并插入到質粒或其他載體中。2.**轉化(Transformation)**:將含有Lambda核酸外切酶基因的質粒轉化到宿主細胞,通常是大腸桿菌(E.coli),以便于在這些細胞中表達Lambda核酸外切酶。3.**表達系統(ExpressionSystems)**:利用原核或真核表達系統在宿主細胞中表達Lambda核酸外切酶的蛋白。4.**蛋白質純化(ProteinPurification)**:使用各種色譜技術,如親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析等,從宿主細胞的裂解物中分離和純化Lambda核酸外切酶。5.**PerfectProtein?技術平臺**:這是一種專有技術,用于生產高質量的重組蛋白,包括Lambda核酸外切酶。6.**熱失活(HeatInactivation)**:在某些應用中,可能需要通過熱處理來失活Lambda核酸外切酶,以終止其催化活性。7.**熒光共振能量轉移(FluorescenceResonanceEnergyTransfer,FRET)**:這是一種用于實時監測酶活性和動力學的技術,可用于研究Lambda核酸外切酶降解核酸的機制。

Cas9 NLS可用于體外實驗中篩選能夠高效引導Cas9蛋白進行DNA剪切的gRNA序列 。Recombinant Mouse HPX Protein,His Tag

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Lambda核酸外切酶的活性表現在其高度特異性和過程性地消化5'端磷酸化的雙鏈DNA。以下是一些關鍵點,描述了Lambda核酸外切酶的活性特征:1.**高度過程性(HighlyProcessive)**:Lambda核酸外切酶是一種高度過程性的5'→3'外切酶,這意味著它能夠連續消化多個核苷酸,而不需要在每一步之后重新結合底物。2.**底物特異性(SubstrateSpecificity)**:該酶選擇性地消化5'端磷酸化的雙鏈DNA鏈,對單鏈DNA和非磷酸化DNA表現出低活性。3.**活性定義(ActivityDefinition)**:一個活性單位定義為在37°C下,30分鐘內在50μl反應體積中,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer和1μg聲波破碎的雙鏈[3H]-DNA底物,產生10nmol酸溶性脫氧核苷酸所需的酶量。4.**反應條件(ReactionConditions)**:通常在37°C下進行孵育,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer,該緩沖液包含67mMGlycine-KOH,2.5mMMgCl2,50μg/mlBSA,pH值為9.4。5.**熱失活(HeatInactivation)**:通過在75°C下加熱10分鐘可以使Lambda核酸外切酶失活。6.**特定活性(SpecificActivity)**:Lambda核酸外切酶的特定活性為50,000單位/毫克蛋白。

Abl Cytosolic Substrate泛素蛋白(Ubiquitin,簡稱Ub)是一種在真核細胞中普遍存在的小分子蛋白,具有高度保守性。

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T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環節,確保了酶的穩定性和活性。以下是根據搜索結果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產品說明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復凍融,因為這可能會影響酶的活性。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的。這意味著科學家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質粒載體中。-然后將這個質粒轉化到大腸桿菌宿主細胞中,使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細胞裂解、離心、層析等技術。注意事項:-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨分裝保存,以避免反復凍融。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應時不會切割DNA鏈,而是促進DNA鏈的重組。-本產品用于科研用途,不應用于臨床診斷。應用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術。通過遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。

DNA瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的分子生物學技術,用于分離、鑒定和定量DNA片段。以下是關于DNA瓊脂糖凝膠電泳的一些關鍵點:1.**原理**:-利用瓊脂糖凝膠作為介質,DNA片段在電場作用下根據其大小和電荷差異進行分離。較小的DNA片段遷移速度快,而較大的片段遷移速度慢。2.**瓊脂糖**:-一種由瓊脂糖粉末和緩沖液(如TAE或TBE)混合制成的凝膠。瓊脂糖濃度通常在0.7%到2%之間,濃度越高,分辨率越高,但凝膠孔隙越小,遷移速度越慢。3.**樣品準備**:-DNA樣品通常需要在加載前進行適當的處理,如純化、稀釋,有時還需添加樣品緩沖液以保證樣品在電泳過程中的穩定性。4.**加載樣品**:-使用微量移液管將樣品和加載緩沖液(通常含有追蹤染料,如溴酚藍)混合后,小心地加載到凝膠孔中。5.**電泳**:-將凝膠置于電泳槽中,連接電源,施加恒定電壓進行電泳。電壓和時間根據凝膠濃度和所需分辨率進行調整。6.**染色**:-電泳完成后,為了可視化DNA條帶,通常使用熒光染料如EB(溴化乙錠)或SYBRGreen進行染色。染色后的凝膠在紫外光下觀察,DNA條帶會發出熒光。7.**分析**:-通過比較DNA條帶的位置和已知大小的DNA標準品(DNAladder),可以估計DNA片段的大小。

CB1受體分布于大腦和外周神經系統中,與多種生理功能有關,包括疼痛感知、食欲調節、情緒調節。

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BloodDirectPCRMasterMix(2×)是一種專為從全血樣本直接進行PCR擴增而設計的即用型2倍濃度的預混合溶液。這種產品允許研究人員在不需要預先進行DNA提取或樣品處理的情況下,直接使用抗凝血樣品或干血斑樣品進行基因組DNA中目的基因的擴增。它通常包含以下特點:1.**耐血液樣本中的抑制劑**:含有的DNA聚合酶能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉等。2.**高效率**:特別改造的DNA聚合酶具有高效率,能夠快速擴增目標DNA。3.**簡便性**:簡化了PCR實驗的步驟,因為不需要進行DNA的提取和純化。4.**直接電泳**:PCR產物可直接上樣進行電泳分析,無需添加額外的上樣緩沖液。5.**兼容性**:兼容多種抗凝劑,并且可以與多種常見PCR儀器配合使用。6.**優化的配方**:包含優化的緩沖體系、dNTPs、Mg2+等,適合血液樣本的PCR擴增。例如,Easy-Load?BloodDirectPCRMasterMix(2X)就是這類產品中的一個,它含有耐血的HemoTaq?DNA聚合酶,適用于EDTA、肝素或檸檬酸鈉抗凝血樣品或干血斑樣品直接PCR檢測。此外,

研究泛素-蛋白酶體途徑:重組人泛素可用于研究泛素化修飾和蛋白降解過程。C3a (70-77)

C5a通過與髓源性抑制細胞 (MDSCs) 膜上的受體C5aR1結合,招募MDSCs至炎癥局部,抑制CD8+ T細胞增殖與功能。Recombinant Mouse HPX Protein,His Tag

Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒通過以下方式實現高靈敏性:1.**熒光探針技術**:試劑盒采用熒光標記的DNA探針,這種探針在沒有Benzonase核酸酶的樣品中穩定存在且不產生熒光信號。當樣品中含有核酸酶殘留時,核酸酶會切割熒光標記的DNA探針,導致熒光信號的增強。這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量,實現高靈敏度檢測。2.**熒光共振能量轉移(FRET)**:該技術利用了供體(Donor)和受體(Acceptor)熒光基團間的相互作用。在未切割狀態下,供體的熒光被受體淬滅,而一旦DNA探針被Benzonase切割,供體熒光基團與受體分離,熒光信號增強,從而實現高靈敏度的檢測。3.**優化的底物探針**:試劑盒中的Benzonase底物是一種合成的DNA寡核苷酸探針,其一端具有VIC熒光基團,另一端具有BHQ1淬滅基團。這種設計使得在底物被切割后,VIC熒光不再被BHQ1淬滅,從而可以非常靈敏地檢測到Benzonase核酸酶活性。4.**高靈敏度的檢測范圍**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這遠低于常規同類產品的檢測限。Recombinant Mouse HPX Protein,His Tag

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