熒光壽命成像和生物發光的不同之處:產生光子的原理不同,類似于我們都是通過肉眼去觀察螢火蟲和發光水母一樣,生物發光與熒光成像在本質上,都是機體中特定的細胞或材料發出光子,被高靈敏度的CCD檢測到形成圖像,但是生物發光與熒光壽命成像產生光子的過程和機制是完全不同的。生物發光與熒光成像相同點:都需要對細胞進行標記。生物發光產生的光子和熒光壽命成像產生的光子都可以被高靈敏的CCD檢測并形成圖像,就像一個人的眼睛就可以既看到螢火蟲又可以看到發光水母一樣。熒光壽命(FLT)是熒光團在發射光子并返回基態之前花費在激發態的時間。根據熒光基團的不同,FLT可以從皮秒到數百納秒不等。熒光壽命成像可以定量的區分參與FRET和沒有參與FRET的分子數量。杭州單分子熒光壽命成像價格表
熒光成像技術是一種非侵入性成像方法,熒光成像技術可以實時和多維度地清晰地監測生物分子、細胞、組織和生物生物。具有高靈敏度輸出、高時間分辨率、非侵入性和低成本。熒光成像在疾病診斷,藥物分布和代謝評估以及血管生物成像中得到了普遍的應用。其中一些前瞻性方法在診斷和影像學引導療治為未來醫學發展提供更廣闊的道路。除了手術中的成像引導,熒光成像技術還可以用于手術中神經保護,外科手術過程中神經意外橫斷或損傷,導致患者部分活動功能衰退甚至長久喪失。廣東單分子熒光壽命成像訂購熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響,可排除納米材料的胞吐分化導致的納米顆粒的稀釋等對測量的影響。
熒光壽命成像如何理解?熒光壽命成像主要通過TCSPC技術(Time-Correlated Single Photon Counting)實現。系統采用超短脈寬激光器作為激發光源,通過光路耦合器,將激光引入顯微光路。激光通過物鏡聚焦照射樣品池,利用光子探測裝置(PMT)對熒光信號進行探測,再用TCSPC計數器對每一個光子進行計數,并將其放入一個對應的時間窗口,經過一定時間的統計疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復以后,不同的時間通道累積下來的光子數目不同。以光子數對時間作圖可得到熒光衰減曲線。實現從百ps-ns-us的瞬態測試。綜上所述由于TCSPC系統,一個激光脈沖只采集一個光子信號,所以激光器的重復頻率決定了系統的數據采集速度。重頻越高,采集速度越快,數據信噪比越好。
熒光壽命成像技術是怎么運作的?通過建立檢測到的熒光事件的直方圖來確定壽命。可顯示單指數或多指數熒光衰減。數值曲線擬合表示熒光壽命和振幅(即檢測到的光子數)。由于FRET減少了供體壽命,因此如果無FRET的供體壽命已知,就可以量化FRET發生的程度。該供體壽命τ作為分析FRET樣品的一定參考。因此,FLIM-FRET為內部參照—這一特點減少了基于強度測量FRET時的很多缺點。由于其熒光壽命是染料的固有特性,因此對其他不利影響(如光漂白、圖像明暗處理、不同濃度或表達水平)具有普遍的不變性。使用基于強度的FRET測量的主要限制是所有可觀察的供體分子都經歷FRET的基本假設。通常情況并非如此。熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關單光子計數法、門控探測法、條紋相機測量法、頻閃技術方式。
熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關單光子計數法(time correlated single photon counting, TCSPC)、門控探測法(time-gated detection)、條紋相機測量法(streak-FLIM)、頻閃技術等四種常見的方法。TCSPC是目前測量熒光壽命的主要技術,同軸脈沖光源發出的脈沖光引起起始光電倍增管產生電信號,該信號通過恒分信號甄別器1啟動時幅轉換器(time-amplitude converter,TAC),時幅轉換器產生一個隨時間線性增長的電壓信號。此外,同軸脈沖光源發出的脈沖光通過激發單色器后到達樣品池,樣品產生的熒光信號再經過發射單色器到達終止光電倍增管,由此產生的電信號經由恒分信號甄別器2到達時幅轉換器并使其停止工作。熒光壽命成像被普遍地應用于生物學研究及臨床診斷等領域。佛山動物熒光壽命成像生產
熒光壽命成像和生物發光的不同之處是什么?杭州單分子熒光壽命成像價格表
熒光壽命顯微成像技術(FLIM)具有對生物大分子結構、動力學信息和分子環境等進行高分辨高精度測量的能力,因此其重要性日漸提升,被普遍地應用于生物學研究及臨床診斷等領域。熒光壽命成像的發展很好地彌補了基于強度成像的問題,對生物醫學檢測有著重要的意義。熒光的特性包含有:熒光激發和發射光譜、熒光強度、量子效率、熒光壽命等,其中,熒光壽命是指熒光分子在激發態上存在的平均時間(納秒量級)。分子的熒光壽命在幾納秒至幾百納秒之間,因此,測量熒光壽命需要極快響應時間的探測器。杭州單分子熒光壽命成像價格表
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