紅外熒光壽命成像技術在生物多重檢測中的應用。相比于熒光強度,熒光壽命的數值具有很好的穩定性,不依賴于生物組織穿透深度。因此可以實現生物多重成像和量化診斷。該團隊利用能量延遲方法并結合對發光離子濃度的調控,實現NIR-II區單一波長下熒光壽命三個量級以上的精確調節。將這種成像方法應用于乳腺的精確診斷,其對標志物的定量檢測結果與傳統的免疫印跡法和免疫組織化學法相比有很好的一致性。而相比于后兩者一次只能對一種標志物進行檢測,這種新的時間維度成像方法可以原位實現同時定量多個標記物,并且減少了傳統檢測方法在組織切片的制作、處理以及評分過程中所導致結果的差異性。熒光壽命成像可以定量的區分參與FRET和沒有參與FRET的分子數量。珠海單分子熒光壽命成像哪個牌子好
熒光壽命成像技術用于表征DNA壓縮和基因活性。研究團隊發展了熒光壽命成像技術(FLIM),表征DNA壓縮的動態過程,克服了以往方法的局限性。研究團隊提出了兩種精確測量DNA壓縮程度的FLIM分析方法。第一種方法基于加入DNA的熒光探針的熒光壽命與其局部微環境折射率之間的逆二次方關系,熒光探針的壽命隨DNA壓縮密度而變化,從而可表征DNA壓縮程度。第二種方法是將熒光標記的核苷酸整合到DNA鏈中,通過一種叫做熒光共振能量轉移(FRET)的技術獲得其熒光壽命值的變化,從而反映出DNA的壓縮程度的動態變化過程。細胞培養結果證明,兩種FLIM分析方法都可以成功表征DNA壓縮的動態過程。珠海單分子熒光壽命成像哪個牌子好熒光壽命成像圖像中每一個像素點在phasor圖上都有一個對應的點。
熒光壽命成像主要應用領域包括:用于樣品分離,如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光團在光譜上非常相似(max 580 vs 573)無法分離,但它們在熒光壽命上差異明顯。作為生物傳感器,如評價藥物/理化條件對細胞的影響、Ca+震蕩等。充分拓展了壽光命成像的使用范圍,實現可相互驗證的多維度樣品成像。實現真正的生物動力學分析和功能成像。熒光壽命成像的發展很好地彌補了基于強度成像的問題,對生物醫學檢測有著重要的意義。
熒光壽命成像FLIM所面臨的挑戰:在數據處理上,由于曲線擬合迭代過程的需求,計算成本較其他成像方案更高。在成像原理上,熒光壽命受多種外界因素影響,這些因素包括分子相互作用、pH值、溫度和粘滯阻力等,很難對這些參數控制變量,使得測量熒光壽命存在交叉干擾問題。此外,與普通光學顯微技術類似,介質光散射影響成像信噪比及空間分辨率,成像深度受到限制。FLIM已經在系統裝置、熒光探針和數據處理算法等方面得到了較快的發展,這也使得熒光壽命成像FLIM在對細胞微環境成像和生物代謝監測發揮出不可替代的作用。熒光壽命成像中的熒光壽命是什么意思?
熒光壽命成像分析是什么?熒光壽命是用于幾種生物測定的穩健參數。它有可能替代傳統的測量技術,如吸收法、冷光法或熒光強度法。熒光團物理化學環境的任何變化都會導致熒光壽命的改變。可通過各種機制來研發基于壽命的分析,例如簡單的結合測定,涉及到兩個組分的結合(一個被熒光標記)而引起FLT的變化。另一種機制是猝滅釋放型測定,涉及大量過量存在的猝滅物質,其具有低而有限的熒光。一旦熒光化合物被釋放(通過酶促反應或與互補DNA結合),系統的壽命就會改變。FLT可與FRET(熒光共振能量轉移)分析結合用于能量轉移效率測量。影響熒光壽命成像測量的因素:高濃度樣品,高濃度的分子之間相互作用而發生活性阻礙現象。上海動物熒光壽命成像使用方法
熒光壽命成像技術是怎么運作的?珠海單分子熒光壽命成像哪個牌子好
熒光壽命成像有什么作用?熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。時間域測量方法涉及用短光脈沖照射樣品(比色皿、細胞或組織),然后隨時間測量發射強度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測方法可用于壽命測量,其中時間相關單光子計數(TCSPC)可實現簡單的數據收集和增強的定量光子計數。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調制。在該方法中,發射發生在與入射光相同的頻率處,并且隨著激發光兼有相位延遲和振幅的變化(解調)。壽命測量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測定。壽命法通過使用光譜位移探針擴展了分析物濃度范圍的靈敏度。珠海單分子熒光壽命成像哪個牌子好
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