熒光壽命取決于熒光分子所處的微環境,通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。熒光分子受激發后發光,熒光壽命量化了發光的衰減率。該特征時間不但取決于特定的熒光團,還取決于其環境,分子相互作用影響弛豫過程并改變熒光團的壽命。熒光壽命是微環境的相對參數,不受環境吸收、樣本濃度等因素影響,因此能夠對生物組織環境中的 p H 值水平、離子濃度、氧分子濃度等微環境狀態進行高精度檢測。熒光壽命顯微成像(FLIM),可以定位不同的分子及濃度分布,在生物,材料,半導體領域具有重要的應用價值。熒光壽命成像技術是怎么運作的?廣州分子熒光壽命成像采購
熒光壽命成像技術是怎么運作的?通過建立檢測到的熒光事件的直方圖來確定壽命。可顯示單指數或多指數熒光衰減。數值曲線擬合表示熒光壽命和振幅(即檢測到的光子數)。由于FRET減少了供體壽命,因此如果無FRET的供體壽命已知,就可以量化FRET發生的程度。該供體壽命τ作為分析FRET樣品的一定參考。因此,FLIM-FRET為內部參照—這一特點減少了基于強度測量FRET時的很多缺點。由于其熒光壽命是染料的固有特性,因此對其他不利影響(如光漂白、圖像明暗處理、不同濃度或表達水平)具有普遍的不變性。使用基于強度的FRET測量的主要限制是所有可觀察的供體分子都經歷FRET的基本假設。通常情況并非如此。珠海化學熒光壽命成像價格熒光壽命成像可用于對皮膚病的診斷,對腔體病癥早期的臨床診斷。
熒光壽命成像的應用領域有哪些?生命科學領域:細胞體自身熒光壽命分析;自身熒光相對熒光標記的有效區分;活細胞內水介質的PH 值測量;局部氧氣濃度測量;具有相同頻譜性質的不同熒光標記的區分;活細胞內鈣濃度測量;時間分辨共振能量轉移(FRET):納米級尺度上的遠差測量,環境敏感的FRET 探針定量測量;代謝成像:NAD(P)H 和FAD 胞質體的熒光壽命成像。材料科學領域:寬禁帶半導體等體系的少子壽命mapping 測量;量子點等用作熒光壽命成像顯微鏡探針;鈣鈦礦電池/LED 薄膜的組分分析、缺陷檢測;銅銦鎵硒CIGS,銅鋅錫硫CZTS 薄膜太陽能電池的組分、缺陷檢測;鑭系上轉換納米顆粒;GaAs 或GaAsP 量子阱的載流子擴散研究。
熒光壽命成像技術能夠實時監控納米顆粒在細胞內的穩定性。FLIM不但具有其它熒光顯微鏡所具有的高靈敏度、可檢測生物生物樣品等優點,它在監控熒光納米材料的穩定性上還具有以下幾個優勢:(1)熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響,可排除納米材料的胞吐及細胞分化導致的納米顆粒的稀釋等對測量的影響;(2)很多常見的發光材料的熒光壽命都遠遠大于細胞的自熒光的壽命,很易去除生物自熒光對熒光成像的干擾;(3)發光材料的熒光壽命和其材料的穩定性密切相關,熒光壽命的改變可以靈敏地反映相應材料的化學穩定性。基于上述原理,他們利用FLIM技術系統考察了半導體量子點和金納米簇在活的細胞(HeLa)里72小時內的穩定性,以及不同的表面配體對這一過程的影響。生物發光與熒光壽命成像不同點:產生光子的原理不同。
用于流場診斷的快速熒光壽命成像系統及方法:熒光壽命成像具有不受染料濃度、不受光漂白、不受樣本厚度和光源噪聲的影響等諸多優點,通過這一技術手段可以深入地進行功能性測量,獲取分子構象、分子微環境變化等信息,研究分子間的相互作用。熒光共振能量轉移是一種非輻射的,距離依賴的由供體熒光基團傳遞能量至受體熒光基團的過程,普遍用于蛋白質的空間構象變化,蛋白質分子間的相互作用,分子間距離的測量等研究。熒光壽命是熒光分子停留在激發態的時間,是熒光分子的固有性質,同熒光強度成像相比。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響。上海開放式熒光壽命成像價錢
熒光壽命通常來講是一定的,不受激發光強度、熒光團濃度等因素的影響。廣州分子熒光壽命成像采購
熒光壽命成像技術用于表征DNA壓縮和基因活性。研究團隊發展了熒光壽命成像技術(FLIM),表征DNA壓縮的動態過程,克服了以往方法的局限性。研究團隊提出了兩種精確測量DNA壓縮程度的FLIM分析方法。第一種方法基于加入DNA的熒光探針的熒光壽命與其局部微環境折射率之間的逆二次方關系,熒光探針的壽命隨DNA壓縮密度而變化,從而可表征DNA壓縮程度。第二種方法是將熒光標記的核苷酸整合到DNA鏈中,通過一種叫做熒光共振能量轉移(FRET)的技術獲得其熒光壽命值的變化,從而反映出DNA的壓縮程度的動態變化過程。細胞培養結果證明,兩種FLIM分析方法都可以成功表征DNA壓縮的動態過程。廣州分子熒光壽命成像采購
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