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為什么說(shuō)熒光壽命成像技術(shù)是先進(jìn)的?熒光壽命成像可以提供熒光強(qiáng)度(光子數(shù))和光子壽命的空間分布,具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級(jí)的時(shí)間分辨率。通過(guò)雙光子激發(fā)(結(jié)合飛秒脈沖和共焦顯微鏡)可以直接檢測(cè)熒光和時(shí)間分辨的熒光壽命。這種無(wú)損檢測(cè)技術(shù),無(wú)需解剖或?qū)iT(mén)制造分層樣品,不但可在樣品表面,還可在樣品表面以下實(shí)現(xiàn)深度解析測(cè)量。特別適用于新材料、光子學(xué)、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復(fù)合材料以及其相關(guān)的原理探究和設(shè)計(jì)優(yōu)化。熒光壽命成像特別適用于新材料、光子學(xué)、光伏、光催化、生物材料的原理探究和設(shè)計(jì)優(yōu)化。廣州多色熒光壽命成像操作步驟
熒光成像技術(shù)是一種非侵入性成像方法,熒光成像技術(shù)可以實(shí)時(shí)和多維度地清晰地監(jiān)測(cè)生物分子、細(xì)胞、組織和生物生物。具有高靈敏度輸出、高時(shí)間分辨率、非侵入性和低成本。熒光成像在疾病診斷,藥物分布和代謝評(píng)估以及血管生物成像中得到了普遍的應(yīng)用。其中一些前瞻性方法在診斷和影像學(xué)引導(dǎo)療治為未來(lái)醫(yī)學(xué)發(fā)展提供更廣闊的道路。除了手術(shù)中的成像引導(dǎo),熒光成像技術(shù)還可以用于手術(shù)中神經(jīng)保護(hù),外科手術(shù)過(guò)程中神經(jīng)意外橫斷或損傷,導(dǎo)致患者部分活動(dòng)功能衰退甚至長(zhǎng)久喪失。浙江三維熒光壽命成像采購(gòu)熒光壽命通常來(lái)講是一定的,不受激發(fā)光強(qiáng)度、熒光團(tuán)濃度等因素的影響。
熒光壽命成像技術(shù)是怎么運(yùn)作的?通過(guò)建立檢測(cè)到的熒光事件的直方圖來(lái)確定壽命。可顯示單指數(shù)或多指數(shù)熒光衰減。數(shù)值曲線擬合表示熒光壽命和振幅(即檢測(cè)到的光子數(shù))。由于FRET減少了供體壽命,因此如果無(wú)FRET的供體壽命已知,就可以量化FRET發(fā)生的程度。該供體壽命τ作為分析FRET樣品的一定參考。因此,F(xiàn)LIM-FRET為內(nèi)部參照—這一特點(diǎn)減少了基于強(qiáng)度測(cè)量FRET時(shí)的很多缺點(diǎn)。由于其熒光壽命是染料的固有特性,因此對(duì)其他不利影響(如光漂白、圖像明暗處理、不同濃度或表達(dá)水平)具有普遍的不變性。使用基于強(qiáng)度的FRET測(cè)量的主要限制是所有可觀察的供體分子都經(jīng)歷FRET的基本假設(shè)。通常情況并非如此。
熒光壽命成像在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用:自發(fā)熒光FLIM被普遍應(yīng)用于非標(biāo)記生物成像領(lǐng)域。所謂自發(fā)熒光,即生物細(xì)胞本身便包含熒光分子,稱為內(nèi)源性熒光分子團(tuán)。FLIM通過(guò)對(duì)自發(fā)熒光分子團(tuán)(如NAD(P)H)熒光壽命的考察,可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞代謝的監(jiān)測(cè)。這種方案無(wú)需人為對(duì)樣品加入熒光試劑便可以發(fā)射熒光,有效減少了熒光染料對(duì)樣品的毒性、熒光分子與樣品的非特異性結(jié)合及染料對(duì)生理性能的干擾影響。外源分子探針FLIM借助于外部熒光染料的注入以產(chǎn)生熒光。如今,為了利用FLIM對(duì)物理?xiàng)l件(包括粘度、溫度、酸度和氧化作用)的敏感性,已經(jīng)開(kāi)發(fā)出了許多適用于體內(nèi)和體外應(yīng)用的光學(xué)探針。熒光壽命成像被普遍地應(yīng)用于生物學(xué)研究及臨床診斷等領(lǐng)域。
熒光壽命顯微成像(Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM)是熒光壽命測(cè)量和熒光顯微技術(shù)的結(jié)合,熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度、可定量測(cè)量微環(huán)境變化和分子間相互作用、不受探針濃度、激發(fā)光強(qiáng)度和光漂白影響等優(yōu)點(diǎn)。熒光壽命成像(FLIM)對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)及調(diào)控,蛋白間的相互作用等生物研究發(fā)揮著很大作用。利用熒光壽命成像顯微鏡技術(shù)可實(shí)現(xiàn)可以實(shí)時(shí)監(jiān)控發(fā)光納米顆粒在活細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定性。在過(guò)去的十年中,光學(xué)技術(shù)硬件和軟件、材料科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的迅速發(fā)展,共同促進(jìn)了FLIM技術(shù)及其應(yīng)用的巨大進(jìn)步。熒光壽命成像可以定量的區(qū)分參與FRET和沒(méi)有參與FRET的分子數(shù)量。廣州多色熒光壽命成像操作步驟
熒光成像在疾病診斷,藥物分布和代謝評(píng)估以及血管生物成像中得到了普遍的應(yīng)用。廣州多色熒光壽命成像操作步驟
熒光壽命成像的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些?生命科學(xué)領(lǐng)域:細(xì)胞體自身熒光壽命分析;自身熒光相對(duì)熒光標(biāo)記的有效區(qū)分;活細(xì)胞內(nèi)水介質(zhì)的PH 值測(cè)量;局部氧氣濃度測(cè)量;具有相同頻譜性質(zhì)的不同熒光標(biāo)記的區(qū)分;活細(xì)胞內(nèi)鈣濃度測(cè)量;時(shí)間分辨共振能量轉(zhuǎn)移(FRET):納米級(jí)尺度上的遠(yuǎn)差測(cè)量,環(huán)境敏感的FRET 探針定量測(cè)量;代謝成像:NAD(P)H 和FAD 胞質(zhì)體的熒光壽命成像。材料科學(xué)領(lǐng)域:寬禁帶半導(dǎo)體等體系的少子壽命mapping 測(cè)量;量子點(diǎn)等用作熒光壽命成像顯微鏡探針;鈣鈦礦電池/LED 薄膜的組分分析、缺陷檢測(cè);銅銦鎵硒CIGS,銅鋅錫硫CZTS 薄膜太陽(yáng)能電池的組分、缺陷檢測(cè);鑭系上轉(zhuǎn)換納米顆粒;GaAs 或GaAsP 量子阱的載流子擴(kuò)散研究。廣州多色熒光壽命成像操作步驟
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