用于流場診斷的快速熒光壽命成像系統及方法:熒光壽命成像具有不受染料濃度、不受光漂白、不受樣本厚度和光源噪聲的影響等諸多優點,通過這一技術手段可以深入地進行功能性測量,獲取分子構象、分子微環境變化等信息,研究分子間的相互作用。熒光共振能量轉移是一種非輻射的,距離依賴的由供體熒光基團傳遞能量至受體熒光基團的過程,普遍用于蛋白質的空間構象變化,蛋白質分子間的相互作用,分子間距離的測量等研究。熒光壽命是熒光分子停留在激發態的時間,是熒光分子的固有性質,同熒光強度成像相比。熒光壽命成像可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。湖南單分子熒光壽命成像批發
熒光成像技術涉及精確測量已添加到組織中的自然熒光分子或熒光標簽的熒光衰減率或壽命。由于壽命取決于分子環境的特性,如溫度和pH,以及其與周圍分子的相互作用,因此可利用熒光成像技術獲得有關分子性質及其微環境的信息。通常,使用激光掃描共聚焦顯微鏡進行熒光成像技術,通過掃描激光束穿過熒光樣品以形成圖像,從而實現高分辨率。為了在宏觀尺度上獲得熒光成像的信息,研究人員開發了一種共焦的宏觀系統,該系統結合了激光和非常短的脈沖,利用只有皮秒的長度和非常靈敏的檢測器來檢測熒光。該系統還包括計算光子的電子器件,并繪制它們相對于激光脈沖和樣品上激光束位置的時間分布。北京三維熒光壽命成像要多少錢生物發光與熒光壽命成像不同點:產生光子的原理不同。
熒光壽命成像是一種什么樣的技術?是一種新型的熒光成像技術,它能夠對不同種類或處于不同狀態的生物組織提供更好的對比度,并反映熒光團及其所處微環境參數的定量分布。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、熒光染料分布不均勻、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響,是熒光光譜分析法的有效補充。超快激光技術,高速、高靈敏度探測技術,以及圖像處理技術的發展,都促進了FLIM 技術的發展.尤其是將熒光壽命成像和共焦顯微技術以及多光子激發熒光顯微技術結合,進一步拓寬了FLIM在生物學領域的應用范圍。
熒光壽命成像:熒光壽命是熒光團在發射熒光光子返回基態之前保持其激發態的平均時間長度。這取決于熒光團的分子組成和納米環境。熒光壽命成像將壽命測量與成像相結合:對每個圖像像素以測得的熒光壽命進行顏色編碼,產生額外的圖像反差。因此,熒光壽命成像可以提供關于熒光分子空間分布的信息和有關其生化狀態或納米環境的信息。有很多技術可以在顯微鏡環境中檢測熒光壽命。常見的的是基于供體(受體光漂白,FRET AB)或受體(敏化發射,FRET SE)熒光強度的技術。熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關單光子計數法、門控探測法、條紋相機測量法、頻閃技術方式。
熒光壽命成像技術是怎么運作的?通過建立檢測到的熒光事件的直方圖來確定壽命。可顯示單指數或多指數熒光衰減。數值曲線擬合表示熒光壽命和振幅(即檢測到的光子數)。由于FRET減少了供體壽命,因此如果無FRET的供體壽命已知,就可以量化FRET發生的程度。該供體壽命τ作為分析FRET樣品的一定參考。因此,FLIM-FRET為內部參照—這一特點減少了基于強度測量FRET時的很多缺點。由于其熒光壽命是染料的固有特性,因此對其他不利影響(如光漂白、圖像明暗處理、不同濃度或表達水平)具有普遍的不變性。使用基于強度的FRET測量的主要限制是所有可觀察的供體分子都經歷FRET的基本假設。通常情況并非如此。熒光壽命成像中的熒光壽命是什么意思?福建化學熒光壽命成像供應
熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度的優點。湖南單分子熒光壽命成像批發
熒光壽命顯微成像優點:熒光壽命顯微成像(Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM)是熒光壽命測量和熒光顯微技術的結合,熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度、可定量測量微環境變化和分子間相互作用、不受探針濃度、激發光強度和光漂白影響等優點。在過去的十年中,光學技術硬件和軟件、材料科學和生物醫學的迅速發展,共同促進了FLIM技術及其應用的巨大進步。熒光壽命成像(FLIM)對細胞信號傳導及調控,蛋白間的相互作用等生物研究發揮著很大作用。湖南單分子熒光壽命成像批發
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