熒光壽命成像可以應用到個性化化療:要針對患者所患的特殊病癥,找到較有效的抗病藥物至關重要。但是,病細胞對不同類型藥物的反應并不是完全可預測的。因此,進行活檢,將細胞培養并用不同的藥物處理。同時,它們被FLIM重復成像。熒光壽命表明治理后細胞代謝狀態的早期改變。因此,通過這些測量,只需幾天即可確定較有效的藥物。熒光壽命成像將時域多指數衰減分析與相量圖相結合。時域中熒光衰減的測量需要短的激發脈沖和快速的檢測電路。樣品中的每個點都被依次激勵。使用時域方法,壽命是從對衰減數據的指數擬合得出的。熒光壽命成像不受光漂白的影響。重慶生物熒光壽命成像生產
熒光壽命成像(FLIM)的方法特別適合于體內診斷,因為它們是無創且無損的。因此,它們被普遍用于受試者的臨床研究和醫學檢查。例如,該技術可以用于以下領域:皮膚的體內診斷:人類皮膚的多光子擴散層析成像結合了雙光子激發和非解掃檢測,因此,多光子FLIM可以提供組織層的光學切片圖像,深度可達100 μm。人皮膚細胞的體內雙光子成像是可能的,而不會損害組織的活力,可以從亞細胞分辨率重建三維結構。眼科檢查:眼科FLIM結合了快速光束掃描和皮秒二極管激光器激發的功能。該方法非常靈敏,可以記錄人眼眼底(背景)的壽命圖像。通過這種方式,有可能及早發現眼部疾病,因為這些疾病通常伴隨著眼底的代謝變化。反過來,這些引起內源性熒光團的熒光衰減參數的變化。重慶化學熒光壽命成像怎么操作熒光壽命顯微成像是熒光壽命測量和熒光顯微技術的結合。
影響熒光壽命成像測量的因素有哪些?散射光的影響: 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影響較大。校正辦法:先用短的激發光激發,檢出溶液的拉曼峰,然后進行熒光光譜校正。因為熒光光譜不隨激發光波長的改變而改變,而拉曼光卻隨之改變。高濃度樣品的影響:1)當激發光照射高濃度樣品時,在激發光入口附近產生熒光,但這些熒光并不能進入熒光檢測器。2)高濃度的分子之間相互作用而發生活性阻礙現象。3)熒光的再吸收:即熒光光譜的短波長端和激發光譜的長波長端如果相互重疊,則發生熒光再吸收。
熒光壽命成像FLIM在生物學上的應用根據熒光分子種類可以分為三種:分別為自發熒光FLIM、外源分子探針FLIM和FRET-FLIM。自發熒光FLIM被普遍應用于非標記生物成像領域。所謂自發熒光,即生物細胞本身便包含熒光分子,稱為內源性熒光分子團。FLIM通過對自發熒光分子團(如NAD(P)H和FAD)熒光壽命的考察,可以實現細胞代謝的監測。這種方案無需人為對樣品加入熒光試劑便可以發射熒光,有效減少了熒光染料對樣品的毒性、熒光分子與樣品的非特異性結合及染料對生理性能的干擾影響。利用熒光壽命成像顯微鏡技術可實現可以實時監控發光納米顆粒在活細胞內的穩定性。
熒光壽命成像系統是一種用于化學領域的分析儀器,熒光壽命成像可以在體現熒光物質形貌信息之外,還能夠靈敏地反應熒光基團生化特性以及周圍微環境的變化情況。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術結合起來,實現人體三維熒光壽命成像,進一步實現人體三維功能成像奠定基礎,有潛力應用于瘤識別,病變診斷等領域。熒光壽命是熒光基團在通過發射熒光光子返回基態之前在其激發態下保持平均多長時間的量度。不同熒光基團激發態停時間不同,大多數生物熒光素的熒光壽命時間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測經典方法為點對點的時間相關單光子計數(TCSPC),但由于過去檢測硬件的局限和復雜的使用而沒有被普遍地應用于科學研究。隨著技術的發展,在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。熒光壽命成像能夠靈敏地反應熒光基團生化特性以及周圍微環境的變化情況。重慶生物熒光壽命成像生產
熒光壽命是微環境的相對參數,不受環境吸收、樣本濃度等因素影響。重慶生物熒光壽命成像生產
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