門控探測法適用于單組分熒光強度衰減的測量和熒光壽命成像。熒光壽命可通過在兩個不同延遲時刻開啟的相同寬度的門內記錄的熒光強度信息求得，通常情形下，在條件允許的情況下，采用多門控探測，即選取多個窗口獲取多幅圖像（通常為5~10幅）來反演壽命圖像。一般使用門控微通道板像增強器（MCP Intensifier）或者增強型CCD（Intensified CCD）相機，實現樣品的寬場（full-field）熒光壽命成像。通過在樣品受到超短光脈沖激發后的不同時刻（時間窗口）選通像增強器或CCD相機，獲得一組熒光強度圖像，然后利用公式，逐點計算出樣品上各點的熒光壽命并成像。熒光壽命對依賴于熒光團結構的內部因素敏感。北京單分子熒光壽命成像哪家好
熒光壽命成像FLIM相比于熒光強度成像更有優勢。通過熒光強度成像可以獲得熒光分子的空間分布，較為直接和簡便，但是當熒光分子具有相似的頻譜特性，或是同樣的熒光分子在不同環境下時，依賴強度進行成像的方案便無法準確反映信息。與基于光強的成像方式不同，熒光壽命成像FLIM適用于測量熒光分子環境的變化，或是測量分子的運動情況。其結果與熒光分子濃度無關，且不受影響光強的光散射或是光吸收影響，可以精確測量熒光淬滅過程，對生物分子微環境進行定量測量。湖南顯微熒光壽命成像哪里有賣熒光壽命成像不需要考慮跳色的影響，從而免去了計算和去除跳色雜質信號的麻煩；
在基于時間相關單光子計數的熒光壽命成像實驗中，通過選用超快激光器可以優化脈沖持續時間，單光子探測器和時間數字轉換器的時間抖動則成為制約時間分辨率的關鍵參數。熒光壽命成像可進行高質量的多色成像實驗或實現STED、PALM/STORM等超分辨率熒光顯微成像。目前TCSPC是主要應用的熒光壽命測定技術。熒光壽命通常在ps～us量級，在如此短的時間量級上進行測量，它是較為成熟準確的測試手段。TCSPC的工作原理是使用一個同步信號源驅動激光器，出射光脈沖照射樣品池，在利用光子探測裝置（多為PMT）對熒光信號進行探測，每一個光子計數信號在FT1010中都會落入一個對應的時間窗口，經過一定時間的統計疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復以后，不同的時間通道累積下來的光子數目不同。
時域法熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關單光子計數法（time correlated single photon counting, TCSPC）、門控探測法（time-gated detection）、條紋相機測量法（streak-FLIM）、頻閃技術等四種常見的方法。TCSPC是目前測量熒光壽命的主要技術，同軸脈沖光源發出的脈沖光引起起始光電倍增管產生電信號，該信號通過恒分信號甄別器1啟動時幅轉換器（time-amplitude converter，TAC），時幅轉換器產生一個隨時間線性增長的電壓信號。此外，同軸脈沖光源發出的脈沖光通過激發單色器后到達樣品池，樣品產生的熒光信號再經過發射單色器到達終止光電倍增管，由此產生的電信號經由恒分信號甄別器2到達時幅轉換器并使其停止工作。此時，時幅轉換器根據累積電壓輸出一個數字信號并在多通道分析儀（multi-channel analyzer）的相應時間通道計入一個信號，表明檢測到壽命為該時間的一個光子。經過幾十萬次的重復后，不同的時間通道累積下來的光子數目不相同。熒光壽命顯微成像，可以定位不同的分子及濃度分布，在生物，材料，半導體領域具有重要的應用價值。
熒光壽命成像或FLIM是基于熒光樣品中不同區域的熒光的指數衰減速率的差異。由τ決定熒光壽命成像的每個像素的強度，這使研究人員可以查看具有不同熒光衰減率的材料之間的對比度，還可以產生顯示其他衰減路徑變化的圖像。可以通過使用脈沖源在時域中確定熒光壽命。當熒光物質被超短脈沖激發時，時間分辨的熒光將呈指數衰減。時間相關單光子計數（tcspc）通常被用作熒光壽命的測量方法，因為它補償了在源強度和單光子的脈沖幅度的變化。更具體地說，TCSPC由單個光子雪崩光電二極管（SPAD）記錄相對于激發激光脈沖的單個光子的壽命。重復記錄多個激光脈沖，并在記錄了足夠多的事件后，研究人員能夠建立所有這些記錄的時間點上事件數量的直方圖。然后，可以將該直方圖擬合到的指數壽命衰減函數的指數函數，并且可以相應地提取壽命參數。熒光壽命取決于熒光分子所處的微環境，通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。重慶熒光壽命成像報價
熒光壽命成像這種技術相對較新，涉及到同時在圖像的每個像素處確定熒光衰減時間的空間分布。北京單分子熒光壽命成像哪家好
與熒光光譜一樣，熒光壽命也是熒光物質的一種內在特有性質，不受熒光物質濃度、激發光強度等因素的影響。熒光壽命成像能在不受熒光強度影響因素影響的條件下，在納米分辨率水平對蛋白互作進行研究，或者通過 FRET 探針研究分子環境變化，更重要的是其測量數據準確性高、易重復。通過熒光壽命成像還可以對樣本所處的微環境進行檢測、對樣品組份進行分離等等。在傳統的熒光強度和熒光光譜兩個維度的基礎上，又增加了熒光壽命這一新的成像維度，大幅度拓展了該系統的應用范圍。北京單分子熒光壽命成像哪家好
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