熒光壽命成像可以提供熒光強度（光子數(shù)）和光子壽命的空間分布，具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。通過雙光子激發(fā)（結合飛秒脈沖和共焦顯微鏡）可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。這種無損檢測技術，無需解剖或專門制造分層樣品，不但可在樣品表面，還可在樣品表面以下實現(xiàn)深度解析測量。特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復合材料以及其相關的原理探究和設計優(yōu)化。熒光壽命成像圖像中每一個像素點在phasor圖上都有一個對應的點。因此我們可以獲取每個像素點的壽命信息，也可以獲知每一壽命所對應的圖像區(qū)域。熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。重慶熒光壽命成像供貨商

門控探測法適用于單組分熒光強度衰減的測量和熒光壽命成像。熒光壽命可通過在兩個不同延遲時刻開啟的相同寬度的門內記錄的熒光強度信息求得，通常情形下，在條件允許的情況下，采用多門控探測，即選取多個窗口獲取多幅圖像（通常為5~10幅）來反演壽命圖像。一般使用門控微通道板像增強器（MCP Intensifier）或者增強型CCD（Intensified CCD）相機，實現(xiàn)樣品的寬場（full-field）熒光壽命成像。通過在樣品受到超短光脈沖激發(fā)后的不同時刻（時間窗口）選通像增強器或CCD相機，獲得一組熒光強度圖像，然后利用公式，逐點計算出樣品上各點的熒光壽命并成像。北京植物熒光壽命成像采購隨著技術的發(fā)展，在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。

熒光壽命成像系統(tǒng)是一種用于化學領域的分析儀器，熒光壽命成像可以在體現(xiàn)熒光物質形貌信息之外，還能夠靈敏地反應熒光基團生化特性以及周圍微環(huán)境的變化情況。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術結合起來，實現(xiàn)人體三維熒光壽命成像，進一步實現(xiàn)人體三維功能成像奠定基礎，有潛力應用于瘤識別，病變診斷等領域。熒光壽命是熒光基團在通過發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前在其激發(fā)態(tài)下保持平均多長時間的量度。不同熒光基團激發(fā)態(tài)停時間不同，大多數(shù)生物熒光素的熒光壽命時間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測經典方法為點對點的時間相關單光子計數(shù)（TCSPC），但由于過去檢測硬件的局限和復雜的使用而沒有被普遍地應用于科學研究。隨著技術的發(fā)展，在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。

熒光壽命成像技術有兩種：時間域和頻率域。（1）時域FLIM：需要脈沖光源，所以一般在雙光子的系統(tǒng)上比較常見FLIM（熒光壽命成像Fluorescence Life-time imaging Microcopy簡稱FLIM），理由一是激光是脈沖的，二是買雙光子的老師一般也搭配一個FLIM。（2）頻域FLIM：需要一個相位調制的光源，有用LED調制的。熒光壽命成像FLIM的應用：1）細胞體自身熒光壽命分析；2）自身熒光相對熒光標記的有效區(qū)分；3）具有相同頻譜性質的不同熒光標記的區(qū)分；4）活細胞內水介質的PH值測量；5）局部氧氣濃度測量；6）活細胞內鈣濃度測量；7）時間分辨Forster共振能量轉移（FRET）：納米級尺度上的遠程測量，環(huán)境敏感的FRET探針定量測量。熒光壽命成像使用簡單，方便快捷，不需要進行參數(shù)調節(jié)。

熒光壽命成像裝置通常由激發(fā)光源、光電探測器、延遲儀器及圖像處理設備組成。門控儀器的光源通常為短脈沖的超快激光器，常見的成像設備是CCD，延遲儀器提供FLIM的控制信號。由于光電探測器和CCD等器件輸出的是光強度信息，熒光壽命圖像可以通過Rapid Lifetime Determination （RLD）和Weighted Nonlinear Least Square （WNLLS）兩種處理方法利用熒光強度圖像通過反演得出。熒光壽命成像（FLIM）有時域和頻域測量法，時域測量中主要有TCSPC技術、門控探測技術、條紋相機探測技術和頻閃技術；頻域測量法中主要是調制技術。每一種測量技術在測量樣品成像的過程中都有優(yōu)勢和劣勢，在實際測量樣品的熒光壽命時，需要根據實際的樣品裝填而綜合考慮選擇合適的熒光壽命測量技術。市場上熒光壽命的測量方式可分為時域法和頻域法。北京植物熒光壽命成像采購

熒光壽命成像主要通過TCSPC技術實現(xiàn)。重慶熒光壽命成像供貨商

熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。時間域測量方法涉及用短光脈沖照射樣品（比色皿、細胞或組織），然后隨時間測量發(fā)射強度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測方法可用于壽命測量，其中時間相關單光子計數(shù)（TCSPC）可實現(xiàn)簡單的數(shù)據收集和增強的定量光子計數(shù)。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調制。在該方法中，發(fā)射發(fā)生在與入射光相同的頻率處，并且隨著激發(fā)光兼有相位延遲和振幅的變化（解調）。壽命測量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測定。壽命法通過使用光譜位移探針擴展了分析物濃度范圍的靈敏度。壽命測量可用于沒有直接探針的分析物。包括葡萄糖、抗原或基于熒光能量轉移轉導機制的任何親和力或免疫測定。重慶熒光壽命成像供貨商

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