免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）的優點主要包括：高度特異性：免疫共沉淀利用高親和力的抗體與目標蛋白結合，能夠高度特異性地識別目標蛋白質，從而減少假陽性和假陰性的誤差，提高實驗結果的準確性。可控性強：免疫共沉淀實驗的反應條件相對穩定，實驗長度、溫度、蛋白濃度、抗體濃度等可被有效控制，這樣可以有效地減少誤差和變異性。可用于研究蛋白相互作用：免疫共沉淀不僅可以檢測單個蛋白質，還可以研究蛋白質之間的相互作用，從而揭示蛋白質的組裝和功能。這對于理解細胞內的信號轉導、代謝途徑等復雜生物過程具有重要意義。天然狀態：通過免疫共沉淀得到的蛋白質相互作用是在自然狀態下進行的，避免了人為影響，可以分離得到天然狀態下相互作用的蛋白復合物。這對于理解蛋白質在細胞內的真實功能和相互作用模式具有重要意義。可逆性：免疫共沉淀實驗是可逆的，在沉淀后的蛋白質可以被再次溶解和分離進行下一步操作或其他科學研究。操作簡便：免疫共沉淀的實驗流程相對簡便，不需要事先制備大規模蛋白表達文庫，使得這種方法在實驗室中易于實施。Co-IP和ChIP實驗對象有什么區別。上海免疫沉淀CoIP-Mass檢測

CoIP-Mass和CoIP-WB檢測要點：

互作蛋白篩選和驗證：數據分析以非標定量信號強度（LFQintensity和FC>10）作為強陽篩選，以文獻查閱，功能匹配，批量CoIP-WB驗證，提高驗證成功率。理想CoIP-MS結果的蛋白定量都到超過1000種蛋白。其中絕大部分蛋白為非特異結合或背景蛋白。以目的蛋白的富集信號強度和差異倍數作為參考（相對強信號和差異），分析實驗組中明顯定量較高且差異較大的蛋白，作為重要候選蛋白。同時對重要候選蛋白進行STRING互作分析，文獻分析，目的蛋白功能匹配分析，選擇Top的4-5個蛋白進行CoIP-WB驗證，提高CoIP-WB成功率。 山西CoIP-MassCo-IP實驗要點：樣品新鮮、抗體特異、偶聯充分、洗滌徹底，確保結果準確可靠！

在CoIP（免疫共沉淀）實驗中，對照組的設計對實驗結果尤為重要，陽性對照組設計建議如下：1. 已知相互作用蛋白對照組：如果可能的話，使用已知與誘餌蛋白相互作用的蛋白作為陽性對照。這可以驗證實驗條件的可行性，以及抗體和實驗方法的可靠性。2. 設置過量誘餌蛋白對照組：通過加入過量的誘餌蛋白，可以驗證靶蛋白與誘餌蛋白之間的相互作用是否具有飽和性。如果加入過量誘餌蛋白后，靶蛋白的結合減少或消失，則表明相互作用具有飽和性。

在CoIP（免疫共沉淀）實驗中，技術重復和生物重復設計建議如下：進行多次技術重復（在同一實驗條件下使用不同的樣品或樣品批次）和生物重復（使用來自不同生物或不同實驗條件的樣品），以評估結果的穩定性和可靠性。在設置對照組時，還需要注意以下幾點：對照組的設置應遵循科學原理，并充分考慮實驗的具體需求和目標。確保對照組和實驗組在實驗條件和操作步驟上保持一致，以便進行準確的比較。在分析實驗結果時，應綜合考慮對照組和實驗組的數據，以得出更準確的結論。總之，在CoIP實驗中，通過精心設計和執行對照組實驗，可以提高實驗的準確性和可靠性，從而更準確地評估目標蛋白與誘餌蛋白之間的相互作用。CoIP實驗需多次重復，科學設對照組，確保結果準確可靠！

CoIP-Mass和CoIP-WB檢測要點：

試驗設計：盡量進行試驗組別設計和進行生物學重復檢測，提高后續驗證的陽性率。常規過表達單組（AbIPvsIgGIP）；動態互作組學（實驗組vs對照組vsIg組）。根據目的設計適當的生物學重復。如果后續以CoIP-Mass數據進行互作組標準分析，則需要3-4組生物學重復；如果后續以尋找關鍵互作蛋白，進行機制深入研究，則建議1-2次生物學重復。經驗顯示單次重復假陽性率90%。

蛋白表達和細胞量：細胞用量要求大(2-10e7細胞量），建議不少于5e7（金標準：320g離心細胞量50μl，保障項目用量）。低表達蛋白，建議使用過表達組進行檢測。蛋白表達可根據WB結果或初步根據數據庫判定（ProteomicsDB；HumanProteinAtlas）。 Co-IP和ChIP基本原理方面的區別有什么。四川互作機制CoIP

Co-IP技術揭示蛋白互作，助力藥物研發與疾病機制探索！上海免疫沉淀CoIP-Mass檢測

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一種經典的生物學技術，主要用于研究蛋白質之間的相互作用。它以其獨特的優勢在蛋白質組學、生物化學和細胞生物學等領域中得到了大范圍應用。Co-IP的主要優點包括。直接性：Co-IP能夠直接檢測蛋白質之間的相互作用，從而提供關于蛋白質功能和調控機制的直接證據。特異性：通過使用特異性抗體，Co-IP能夠精確地捕獲目標蛋白及其相互作用伙伴，減少非特異性干擾。靈敏度：Co-IP能夠檢測到低豐度的蛋白質相互作用，這對于研究微弱或瞬時的蛋白互作具有重要意義。適用性廣：該技術適用于多種樣本類型，包括細胞裂解液、組織提取物和純化后的蛋白質復合物。兼容性強：Co-IP技術可以與其他技術相結合，如質譜分析，從而提供更詳盡的互作網絡信息。綜上所述，Co-IP技術的優點在于其直接性、特異性、靈敏度、大范圍的適用性和與其他技術的兼容性，這些優點使其成為研究蛋白質相互作用的有力工具。上海免疫沉淀CoIP-Mass檢測