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高校高靈敏多色熒光成像細胞計數(shù)儀有哪些

來源: 發(fā)布時間:2025-12-09

關(guān)注儀器性能準確性:可查看廠家提供的性能指標,或參考用戶評價,還可通過與手工計數(shù)結(jié)果對比,或借助標準品驗證。也可要求廠家提供復(fù)雜樣本的計數(shù)演示,觀察其對細胞的識別是否準確。重復(fù)性:了解儀器的變異系數(shù)(CV)值,一般要求 CV<5%,CV 值越小,重復(fù)性越好。速度:關(guān)注單樣本計數(shù)時間和整體檢測通量,選擇計數(shù)速度快、能在短時間內(nèi)處理多個樣本的儀器,以提高實驗效率。計數(shù)范圍:若實驗中細胞濃度波動大,需選擇計數(shù)范圍寬的儀器,確保在不同濃度下都能準確計數(shù)。可用于檢測食品和飲料中的微生物數(shù)量,如細菌、酵母菌和霉菌等。高校高靈敏多色熒光成像細胞計數(shù)儀有哪些

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自動細胞計數(shù)儀的使用方法1. 實驗前準備儀器檢查:開機預(yù)熱(部分儀器需 10-15 分鐘),檢查鏡頭是否清潔,軟件是否正常啟動。試劑與耗材:準備臺盼藍染液(0.4%,過濾除菌)、無菌 PBS 或培養(yǎng)基(用于稀釋細胞)、計數(shù)板(一次性或可重復(fù)使用,重復(fù)使用需用 75% 酒精清潔并晾干)。細胞懸液制備:將培養(yǎng)的細胞消化、吹打均勻,避免細胞成團(若有團塊,需過篩或重新吹打)。2. 樣本處理與上樣稀釋細胞:若細胞濃度過高(超過儀器計數(shù)范圍,通常 1×10?-1×10?個 /mL),用培養(yǎng)基或 PBS 稀釋至合適濃度(例如,取 100μL 細胞懸液 + 100μL 稀釋液,稀釋倍數(shù)為 2)。染色:按 1:1 比例混合細胞懸液與臺盼藍染液(如 50μL 細胞懸液 + 50μL 臺盼藍),輕輕混勻,室溫靜置 30 秒 - 1 分鐘(避免染色過久影響細胞活性)。上樣:用移液器取 10-20μL 混合液,緩慢滴加到計數(shù)板的進樣口,使液體自然充滿計數(shù)池(勿溢出),放置 1-2 分鐘讓細胞沉降。科研熒光細胞計數(shù)儀廠家?guī)椭t(yī)生了解腫瘤細胞的數(shù)量、活力等情況,疾病的分期、治療方案制定提供依據(jù)。

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驗證儀器在不同濃度范圍內(nèi)的計數(shù)準確性,確認其是否符合說明書標注的線性范圍(如 1×10?-1×10?個 /mL)。操作步驟:制備一份高濃度細胞懸液(如 2×10?個 /mL),用稀釋液按1:2、1:4、1:8、1:16等比例梯度稀釋。用自動計數(shù)儀對每個稀釋度計數(shù),記錄實測濃度。以 “理論濃度”(稀釋前濃度 × 稀釋倍數(shù))為橫坐標,“實測濃度” 為縱坐標,繪制散點圖并計算相關(guān)系數(shù)(R2)。若 R2>0.98,說明儀器在該范圍內(nèi)線性良好;若低濃度(如 <1×10?個 /mL)或高濃度(如> 1×10?個 /mL)時偏離線性,需避免在該范圍使用,或通過濃縮 / 稀釋調(diào)整濃度。

高通量樣本加載儀器通過多通道微流控芯片(如6孔、8孔、96孔板適配)或自動化進樣系統(tǒng),同時加載多個樣本(如一次處理6-384個樣本),每個樣本分配到**的微通道或反應(yīng)池,避免交叉污染。光學(xué)系統(tǒng)掃描光源:采用LED或激光作為光源,提供明場(白光)或熒光激發(fā)光(特定波長,如488nm激發(fā)AO,535nm激發(fā)PI)。物鏡與相機:配備高分辨率顯微物鏡(通常20-40倍)和高速CCD/CMOS相機,對每個樣本的多個視野(如每個樣本掃描10-30個視野)進行快速成像,確保覆蓋足夠多的細胞,減少統(tǒng)計誤差。自動化移動平臺:載物臺通過精密電機控制,實現(xiàn)X/Y軸自動移動,快速切換不同樣本和視野,完成全樣本掃描(整個過程通常在1-5分鐘內(nèi)完成)。腫瘤細胞研究:分析化療后細胞形態(tài)變化(如凋亡細胞皺縮、壞死細胞腫脹)。

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細胞計數(shù)儀是生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)檢測及生物制藥等領(lǐng)域中用于快速、準確計數(shù)細胞數(shù)量和分析細胞活性的儀器。它能替代傳統(tǒng)的血細胞計數(shù)板(手動計數(shù)),顯著提高計數(shù)效率和準確性,減少人為誤差。自動細胞計數(shù)儀的工作原理(以常用光學(xué)成像型為例)樣本制備:將細胞懸液與臺盼藍染液按比例混合(臺盼藍可穿透死細胞細胞膜使其著色,活細胞不著色)。上樣:將混合液滴加到計數(shù)板的計數(shù)池中,確保無氣泡,細胞均勻分布。成像與識別:儀器通過光學(xué)鏡頭拍攝計數(shù)池內(nèi)的細胞圖像,內(nèi)置算法自動識別:活細胞(透明、形態(tài)完整)和死細胞(藍色、形態(tài)可能破損)。排除雜質(zhì)、細胞團(通過大小和形態(tài)篩選)。數(shù)據(jù)計算:自動統(tǒng)計細胞總數(shù)、活細胞數(shù)、死細胞數(shù),并計算活細胞率(活細胞數(shù) / 總細胞數(shù) ×100%)、細胞濃度(個 /μL 或個 /mL)等參數(shù)。全自動血細胞計數(shù)儀是常用設(shè)備,可對血液中的紅細胞、白細胞和血小板進行快速準確的計數(shù)和分類。熒光細胞計數(shù)儀代理商

全自動細胞計數(shù)儀在疾病診斷中,可對穿刺活檢等樣本中的細胞進行計數(shù)和分析。高校高靈敏多色熒光成像細胞計數(shù)儀有哪些

選擇適合的高通量細胞計數(shù)儀,需綜合考慮實驗需求、儀器性能、易用性、維護成本及售后服務(wù)等方面。明確實驗需求細胞類型:不同細胞對計數(shù)儀要求有別。血液細胞、細菌等小型細胞,可選用基于電阻抗原理的計數(shù)儀;大型細胞、細胞團或形態(tài)復(fù)雜的原代細胞,光學(xué)細胞計數(shù)儀尤其是熒光款可能更合適。實驗?zāi)康模喝糁皇浅R?guī)細胞傳代、凍存等簡單計數(shù),明場計數(shù)儀基本可滿足;若用于細胞***、基因編輯、生物制藥等,對細胞活性、周期等多參數(shù)分析有需求,則需選擇流式細胞計數(shù)儀或具備多參數(shù)分析功能的高通量細胞計數(shù)儀。實驗通量:根據(jù)樣本數(shù)量和實驗頻率選擇。若樣本量大、頻率高,應(yīng)選自動化程度高、通道數(shù)量多的儀器,如一次能處理 96 個樣本的機型;若樣本量較小,可選擇通道數(shù)較少、較為小巧的設(shè)備。高校高靈敏多色熒光成像細胞計數(shù)儀有哪些

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