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上海MeDIP-SeqDNA甲基化方案

來源: 發布時間:2021-09-03

芯片平臺作為目前比較成熟的篩選工具,已經在很多領域有了相應的應用。多家芯片公司在DNA甲基化這塊兒有了相應的產品提供,其中應用**為***的就Agilent平臺和Illumina平臺,相應的產品包括Agilent Human CpG Island Microarray Kit,Infinium HumanMethylation27 BeadChip和Infinium HumanMethylation450K BeadChip。另外Roche NimbleGen和Affymetrix也有相應的芯片推出,但是NimbleGen的芯片今年下半年已經停產不同的芯片平臺,各自的實驗過程也是不一樣的。安捷倫前期采用的甲基化DNA免疫共沉淀(MeDIP)技術。將基因組DNA分成兩份,一份用來做 MeDIP,另一份作為對照。兩個樣品都標記熒光(富集的樣品用Cy5標記,對照用Cy3標記),然后與芯片雜交。芯片上每個探針的Cy5/Cy3強度比例顯示出該區域的甲基化程度。ChIP-Seq 能實現真正的全基因組分析。上海MeDIP-SeqDNA甲基化方案

低甲基化,原*基因***正常細胞中,由于甲基化作用原*基因多處于沉默狀態,但在多種**細胞中,均發現原*基因處于低甲基化狀態,并且低甲基化狀態與其蛋白表達升高密切相關,表明低甲基化狀態可使原*基因***。轉座子活化轉座子是可移動的基因序列,包括LINE-1、HERV-K等,在人類基因組中含量豐富,正常情況下處于被甲基化狀態而轉錄沉默。而在**細胞中,由于基因組總體甲基化水平的降低,這些序列也因去甲基化而活化,轉移位置導致基因片段的插入和缺失。天津hMeDIP-SeqDNA甲基化歡迎咨詢人類基因組有約56M的CpG位點,CpG島約3萬個。

NA甲基化(DNA methylation)是指在DNA甲基化轉移酶(DNMT)催化下,以S-腺苷甲硫氨酸為甲基供體,將活性甲基轉移至DNA鏈中特定堿基上的化學修飾過程。哺乳動物基因組中,DNA甲基化多發生在CpG二核苷酸中的胞嘧啶的5位碳原子。DNA甲基化是一種表觀(epigenetic)修飾,它在不改變DNA序列的情況下,對個體的生長、發育、基因表達模式以及基因組的穩定性起到重要的調控作用,并且這種修飾在發育和細胞增殖的過程中是可以穩定傳遞的。近年來的大量研究表明,DNA異常甲基化與**的發生、發展、細胞*變有著密切的聯系。

高通量BSP——目標位點/基因甲基化驗證方案。科學方案:設計從項目背景了解、協助方案設計、實驗材料選取、建庫測序,到數據分析每個項目有特定的科學問題;需要專業、有價值的建議;科學、縝密的設計及時高效的溝通;以保障高質量研究成果。樣本要求:基因組DNA:>=1ug(20個區域/位點);樣品濃度>30ng/ul;無RNA和蛋白污染建庫測序:測序策略:IlluminaHiSeq,PE150;測序深度:>100X。信息分析:基于靶向序列的甲基化分析,數據質控,5mCCalling,5mC在組間樣本的可視化,多樣本甲基化聚類與臨床樣本特征關聯分析等。中小樣本篩選, 大樣本中進一步驗證。

industryTemplate850K芯片為半金標準,價格低,分析簡單,較為適合EWAS類型的課題。四川TAB-SeqDNA甲基化歡迎咨詢

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上皮型鈣黏附素(E-cadherin)是介導細胞間粘附的一種跨膜糖蛋白,其編碼基因CDH-1屬于**侵襲轉移抑制基因。在**組織中,E-cadherin表達的下調或沉默可導致細胞間相互黏附力減弱,造成**細胞的分散,脫離原發灶處而轉移。而E-cadherin下調的因素之一就是其啟動子區域CpG島的超甲基化。**細胞突破血管內皮及基底膜進入血循環是**細胞侵襲和轉移的重要步驟。基底膜組成蛋白Nidogen的缺失將嚴重影響基底膜的完整性,有利于**細胞順利通過進入血循環進而發生侵襲轉移。有研究表明,Nidogen基因啟動子在**細胞中表現出很高的甲基化水平,而在正常細胞中卻極少或沒有發生甲基化。另外,某些miRNA(如MiR-148a、miR-34b/c、miR-9)能夠起到抑制**細胞生長和轉移的作用,而在**細胞中,這些miRNA通常由于發生超甲基化而沉默。上海MeDIP-SeqDNA甲基化方案

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