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上海發(fā)展酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-30

小歐從2018年即開始關(guān)注酵母雜交與高通量測(cè)序相結(jié)合的技術(shù)發(fā)展,如2017年CaoGang老師等發(fā)表的RLL-Y2H技術(shù),實(shí)現(xiàn)了文庫(kù)篩文庫(kù)可能,該技術(shù)通過對(duì)酵母雙雜常用載體的改造,并結(jié)合高通量測(cè)序,可直接獲得AD-BD互作蛋白對(duì)。所用方法相當(dāng)巧妙,感興趣的同學(xué)請(qǐng)點(diǎn)擊《當(dāng)酵母雙雜交遇到高通量測(cè)序》。鈕老師團(tuán)隊(duì)之前的研究已經(jīng)鑒定了DAL1作為一種保守的針葉樹年齡生物標(biāo)記基因,在油松從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)到生殖生長(zhǎng)的時(shí)相轉(zhuǎn)變過程中起重要作用。為了進(jìn)一步理解年齡效應(yīng)如何驅(qū)動(dòng)針葉樹的發(fā)育,闡明與DAL1相關(guān)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)很關(guān)鍵。鈕老師團(tuán)隊(duì)利用傳統(tǒng)的Y2H篩選技術(shù)結(jié)合NGS測(cè)序技術(shù),優(yōu)化得到了Y2H-seq技術(shù),與傳統(tǒng)的篩選測(cè)序相比,大幅度節(jié)省了時(shí)間和實(shí)驗(yàn)成本。2酵母展示質(zhì)量技術(shù)酵母展示技術(shù),共收錄30多個(gè)行業(yè),涵蓋多行業(yè)資料一鍵下載。上海發(fā)展酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)

酵母單雜交篩選:(4)在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中,***GL1促進(jìn)HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達(dá),并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子,即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中,***GL1過表達(dá)后,與LTR連接的螢火素酶表達(dá)上升近2倍,說明***GL1是一個(gè)轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是,文章的背景介紹內(nèi)容中,對(duì)應(yīng)用其他技術(shù)(如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等)對(duì)HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析,發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見解,但并沒有直接評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對(duì)酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)(如Chip-seq、motif預(yù)測(cè))進(jìn)行了比較分析,發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對(duì)已識(shí)別因子的驗(yàn)證率為30-60%,同等或優(yōu)于其他技術(shù)。山西實(shí)力酵母文庫(kù)專業(yè)化的篩庫(kù)流程,多重質(zhì)檢保證質(zhì)量。初篩+復(fù)篩提高目標(biāo)陽(yáng)性克隆質(zhì)粒精確度。

通過酵母雙雜交進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用(圖 A-C)。同樣,酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用(圖 D)。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 E-L)證實(shí) CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報(bào)道的 SWR1 復(fù)合物亞基,負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報(bào)道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 A-H)顯示,CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。

利用酵母文庫(kù)進(jìn)行雙雜交篩選,結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號(hào)阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于細(xì)胞核中。MdRGL3a 對(duì)于 GA 處理非常敏感,可以引起其發(fā)生降解,PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進(jìn)一步的酵母一對(duì)一雜交驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明,兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(圖 A-B)。并通過 GST pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合(圖 C-D)。細(xì)胞外降解實(shí)驗(yàn)顯示,與對(duì)照相比,MdRGL3a 與過表達(dá) MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會(huì)導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解加快;而與抑制 MdBT2 表達(dá)的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會(huì)導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解減緩(圖 A)。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(圖 B)。改變 MdRGL3a 表達(dá)量并不影響 MdBT2 的降解。以上結(jié)果表明,MdRGL3a 可能通過 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。進(jìn)口試劑高服務(wù)質(zhì)量市場(chǎng)份額大酵母文庫(kù)。

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)本研究鑒定了一個(gè)可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進(jìn)而負(fù)向調(diào)控MdTRB1介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究JA對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。Gateway方法酵母雙雜交文庫(kù)構(gòu)建核系統(tǒng)與膜系。江西建庫(kù)酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)

歐易生物一直助力于各酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)室更好的使用該項(xiàng)技術(shù),探索生命科學(xué)奧秘。上海發(fā)展酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)

歐易酵母文庫(kù)助力小麥根長(zhǎng)抑制分子機(jī)制研究,近日,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者,在 Journal of Experimental Botany 雜志(IF: 6.992)在線發(fā)表了題為“小麥短根長(zhǎng)度 1文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物完成。本研究從小麥中克隆了一個(gè)新的 ERF 轉(zhuǎn)錄因子基因 TaSRL1 (SHORT ROOT LENGTH 1),該基因主要在根中表達(dá)。綜上,本研究證明了 TaSRL1 在生長(zhǎng)素依賴途徑中作為 taPIN2 的直接調(diào)控因子,并通過與 TaTIFY9 相互作用,整合生長(zhǎng)素和 JA 信號(hào),抑制根的生長(zhǎng)。TaSRL1-4A 標(biāo)記對(duì)小麥根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要意義。上海發(fā)展酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)

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