PDX斑馬魚(yú)模型的關(guān)鍵技術(shù)包括tumor組織處理、移植位點(diǎn)選擇及免疫抑制策略。首先，通過(guò)手術(shù)或活檢獲取患者tumor組織，經(jīng)膠原酶消化制成單細(xì)胞懸液（細(xì)胞活力>90%），隨后通過(guò)顯微注射技術(shù)將100-500個(gè)腫瘤細(xì)胞精細(xì)植入斑馬魚(yú)胚胎的卵黃囊、腦部或腹膜腔。斑馬魚(yú)胚胎的免疫缺陷特性（如rag1基因敲除品系）可有效避免移植排斥，而其透明特性允許實(shí)時(shí)觀察tumor生長(zhǎng)（如通過(guò)熒光標(biāo)記追蹤細(xì)胞增殖）。與小鼠模型相比，斑馬魚(yú)PDX模型無(wú)需構(gòu)建免疫缺陷小鼠品系，且單次實(shí)驗(yàn)可處理50-100個(gè)樣本，成本只為小鼠模型的1/10。此外，斑馬魚(yú)胚胎的血管系統(tǒng)在48小時(shí)內(nèi)形成，可模擬tumor-血管相互作用，為抗血管生成藥物篩選提供獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。例如，在結(jié)直腸ancerPDX模型中，通過(guò)共移植腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞，可定量評(píng)估貝伐珠單抗對(duì)tumor血管生成的抑制作用，結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)高度吻合。其胚胎透明，在顯微鏡下可清晰觀察發(fā)育過(guò)程，助于研究organ形成。斑馬魚(yú)基因技術(shù)

近年來(lái)，PDX斑馬魚(yú)模型的應(yīng)用范圍已從常見(jiàn)tumor擴(kuò)展至難治性ancer。在胰腺ancer領(lǐng)域，研究者利用KRAS突變斑馬魚(yú)模型，發(fā)現(xiàn)MEK抑制劑U0126可明顯抑制腫瘤細(xì)胞增殖，為靶向醫(yī)療提供新靶點(diǎn)。肝ancer研究中，β-catenin轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)模型成功再現(xiàn)人類肝ancer的分子特征，且米非司酮誘導(dǎo)系統(tǒng)可動(dòng)態(tài)調(diào)控致ancer基因表達(dá)，支持藥物作用機(jī)制研究。技術(shù)層面，凍存組織移植技術(shù)的突破使模型構(gòu)建成功率提升至80%，而單細(xì)胞測(cè)序與斑馬魚(yú)基因編輯技術(shù)的結(jié)合，可進(jìn)一步解析tumor耐藥機(jī)制。例如，非小細(xì)胞肺ancerzPDX模型通過(guò)測(cè)序驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)厄洛替尼耐藥性與EGFRT790M突變高度相關(guān)，為聯(lián)合用藥策略提供依據(jù)。斑馬魚(yú)熒光染色試劑盒出售研究斑馬魚(yú)的細(xì)胞凋亡機(jī)制可為疾病醫(yī)療提供思路。

斑馬魚(yú)PDX平臺(tái)的關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)在于其獨(dú)特的技術(shù)特性。首先，斑馬魚(yú)胚胎每對(duì)親本每周可產(chǎn)卵300-500枚，單次實(shí)驗(yàn)可處理上百尾魚(yú)，支持高通量藥物篩選。其次，實(shí)驗(yàn)成本只為小鼠模型的1/10，且無(wú)需建設(shè)SPF級(jí)動(dòng)物房，明顯降低了研發(fā)門(mén)檻。更關(guān)鍵的是，胚胎透明特性允許實(shí)時(shí)觀察tumor生長(zhǎng)、血管生成及轉(zhuǎn)移過(guò)程，例如在非小細(xì)胞肺ancerPDX模型中，研究者通過(guò)熒光標(biāo)記技術(shù)清晰追蹤了腫瘤細(xì)胞從卵黃囊向尾部的遷移路徑。此外，斑馬魚(yú)基因組與人類同源性達(dá)87%，其信號(hào)通路與免疫微環(huán)境高度近似，確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的臨床相關(guān)性。環(huán)特生物開(kāi)發(fā)的“tumor類organ+人免疫重建斑馬魚(yú)”雙劍合璧體系，進(jìn)一步整合了類organ的3D結(jié)構(gòu)優(yōu)勢(shì)與斑馬魚(yú)的活的體環(huán)境，使免疫醫(yī)療療效預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率提升至81%。

環(huán)特一站式斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與運(yùn)營(yíng)解決方案，是環(huán)特實(shí)驗(yàn)室面向醫(yī)院、疾控中心、海關(guān)、科研院所和藥物、保健食品和化妝品企業(yè)等行業(yè)，推出的一項(xiàng)基于斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)構(gòu)建與技術(shù)應(yīng)用為目標(biāo)的整體性技術(shù)平臺(tái)建設(shè)服務(wù)。我們以自身近20年斑馬魚(yú)技術(shù)應(yīng)用的深厚積累為依托，通過(guò)深刻總結(jié)斑馬魚(yú)從養(yǎng)殖、模型開(kāi)發(fā)、設(shè)備配置、資質(zhì)認(rèn)可/認(rèn)證、標(biāo)準(zhǔn)化運(yùn)營(yíng)管理，再到成果輸出等能力模塊的發(fā)展需求，從而形成一套專業(yè)高效、可信賴的技術(shù)解決方案：涵蓋實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃設(shè)計(jì)、軟硬件能力配置、斑馬魚(yú)合規(guī)魚(yú)種供應(yīng)、試劑耗材、人員培訓(xùn)與運(yùn)維技術(shù)咨詢等全周期綜合服務(wù)。斑馬魚(yú)對(duì)水質(zhì)要求不高，適應(yīng)力佳，能在多種淡水環(huán)境中生存。

環(huán)特生物構(gòu)建了覆蓋化妝品全生命周期的服務(wù)體系：在原料開(kāi)發(fā)階段，通過(guò)斑馬魚(yú)急性毒性實(shí)驗(yàn)（48小時(shí)出結(jié)果）和細(xì)胞水平抑炎測(cè)試，快速篩選安全有效成分；在配方優(yōu)化環(huán)節(jié)，利用高通量斑馬魚(yú)篩選平臺(tái)（單次實(shí)驗(yàn)可測(cè)50個(gè)樣品），同步評(píng)估保濕、抗氧化、防曬等復(fù)合功效；終產(chǎn)品備案階段，提供人體斑貼試驗(yàn)、斑馬魚(yú)功效驗(yàn)證及毒理安全評(píng)價(jià)的“三合一”報(bào)告，滿足新規(guī)對(duì)“功效+安全”的雙重備案要求。例如，某國(guó)際品牌通過(guò)環(huán)特技術(shù)，將一款精華液的研發(fā)周期從18個(gè)月縮短至6個(gè)月，且成功通過(guò)國(guó)家藥監(jiān)局特殊化妝品注冊(cè)，上市后3個(gè)月銷(xiāo)售額突破5000萬(wàn)元。斑馬魚(yú)的眼睛位置獨(dú)特，視野范圍較廣，利于捕食和防御。斑馬魚(yú)報(bào)告

斑馬魚(yú)的側(cè)線系統(tǒng)能感知水流和水壓的細(xì)微變化。斑馬魚(yú)基因技術(shù)

斑馬魚(yú)PDX平臺(tái)的技術(shù)突破體現(xiàn)在兩個(gè)維度：一是細(xì)胞系移植的標(biāo)準(zhǔn)化，二是患者原代tumor組織的直接應(yīng)用。以胃ancer研究為例，研究者將AGS和SGC-7901細(xì)胞系標(biāo)記熒光后注射至斑馬魚(yú)胚胎卵黃囊，通過(guò)共聚焦顯微鏡實(shí)時(shí)觀察血管生成和細(xì)胞遷移。結(jié)果顯示，SGC-7901對(duì)5-FU的敏感性明顯高于AGS，與體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。更關(guān)鍵的是，平臺(tái)成功將14例胃ancer患者的原代細(xì)胞移植至斑馬魚(yú)胚胎，其中9例形成腺樣體結(jié)構(gòu)并誘導(dǎo)血管生成，4例表現(xiàn)出對(duì)5-FU、多西他奇和阿帕替尼的不同敏感性。這種“患者-斑馬魚(yú)-藥物”的閉環(huán)驗(yàn)證模式，為個(gè)體化醫(yī)療提供了直接證據(jù)。例如，在非小細(xì)胞肺ancer研究中，斑馬魚(yú)PDX模型預(yù)測(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的敏感性達(dá)91%，與患者臨床結(jié)局高度吻合。斑馬魚(yú)基因技術(shù)