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基因表達斑馬魚實驗

來源: 發(fā)布時間:2025-04-08

中國斑馬魚技術產(chǎn)業(yè)應用史,就是環(huán)特生物的發(fā)展史。憑借在斑馬魚PDTX技術及科研服務方面逾20年的深厚積累,環(huán)特生物以斑馬魚轉基因、基因敲除、敲入,尤其是國際帶動的基因置換技術為關鍵,專注于提供各種遺傳工程斑馬魚的定制、斑馬魚基因編輯技術及斑馬魚疾病模型開發(fā)等專業(yè)技術服務,不僅可以實現(xiàn)構建復雜基因敲入,包括點突變、條件性敲除等難度較高斑馬魚基因編輯技術服務,而且可以通過斑馬魚基因編輯可視化技術,實現(xiàn)可視化基因型篩選,減少其它動物模型中大量的基因型篩選和鑒定工作,比較大化發(fā)揮斑馬魚模型未來的應用優(yōu)勢。斑馬魚在繁殖時,雄魚會追逐雌魚,完成受精過程。基因表達斑馬魚實驗

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環(huán)特生物提供基于斑馬魚模型的基因編輯服務,利用CRISPR/Cas9技術快速在斑馬魚模型中驗證人類遺傳病、篩選致病基因、研究基因功能及作用通路等,主要研究領域為嬰幼兒發(fā)育畸形、罕見病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心腦的血管疾病、血液病、生殖缺陷等。相較于哺乳動物基因編輯的試驗周期長(一般1年以上)、表型不直觀(一般需染色)、研究成功率低等缺點,斑馬魚基因編輯模型主要優(yōu)勢有:1.實驗周期快,快可在2周內進行疾病相關的表型觀察(F0代高效瞬時敲降),3個月內完成穩(wěn)定品系構建(雜合子F1代3個月,純合子F2代6個月,子代數(shù)量多);2. 直觀、多維度地活的動態(tài)觀察(可對特定organ組織細胞進行熒光標記,利用透明斑馬魚活的觀察和成像,哺乳動物上很難實現(xiàn));3. 研究成功率高(與哺乳動物相比較,斑馬魚基因編輯效率高,樣本數(shù)量多,可同時測試多個相關基因,比較大化保證研究的成功率)。基因表達斑馬魚實驗斑馬魚的行為學研究可揭示其對環(huán)境變化的適應策略。

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看似專注于軀體架構規(guī)劃的斑馬魚cdx基因,實則與神經(jīng)發(fā)育也有著千絲萬縷聯(lián)系。在胚胎腦部及脊髓雛形初現(xiàn)階段,cdx基因悄然施展影響力。它間接調控神經(jīng)干細胞的增殖與分化節(jié)拍,確保生成足量神經(jīng)元,滿足斑馬魚早期感知外界、驅動身體所需。舉例而言,科研人員利用基因編輯技術適度降低cdx表達量后,斑馬魚幼魚出現(xiàn)游泳姿態(tài)異常,頻繁打轉、失衡側翻。深入探究得知,脊髓中運動神經(jīng)元發(fā)育受損,軸突延伸受阻,無法精細連接肌肉纖維,致使肌肉接收指令紊亂。cdx基因還參與構建神經(jīng)回路,協(xié)同其他神經(jīng)發(fā)育關鍵基因,塑造從感覺輸入到運動輸出的信息傳遞路徑,助力斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)精細“布線”,在水中靈動游弋、機敏避險。

PDX 斑馬魚模型成為了連接基礎研究與臨床應用的重要橋梁,即轉化醫(yī)學的關鍵環(huán)節(jié)。在基礎研究方面,它為科學家們提供了一個在活的生物體內研究tumor發(fā)生的發(fā)展機制的理想平臺。研究人員可以深入分析tumor細胞的基因突變、信號通路異常等分子層面的變化,以及這些變化如何影響tumor的表型。在臨床應用上,基于 PDX 斑馬魚模型的研究成果能夠直接指導臨床醫(yī)療決策。例如,通過模型篩選出對特定患者tumor有效的聯(lián)合治療方案,醫(yī)生可以據(jù)此為患者制定個性化的醫(yī)療計劃。這種從實驗室到病床的轉化,極大地推動了醫(yī)學的進步,使患者能夠受益于前沿的科研成果,提高了ancer等疾病的醫(yī)療質量和預后效果。斑馬魚的口腔中有牙齒,可輔助攝取食物并進行初步咀嚼。

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新藥研發(fā)恰似在浩渺大海撈針,不僅耗時費力,還需巨額資金投入。斑馬魚Cdx模型恰似一臺高效引擎,為藥物篩選注入強勁動力。斑馬魚繁殖能力驚人,一對成年斑馬魚一次產(chǎn)卵可達上百枚;加之胚胎透明,在顯微鏡下內部organ、細胞動態(tài)一目了然,為藥物作用效果可視化觀察提供便利。基于Cdx模型開展藥物篩選時,科研人員將候選藥物加入斑馬魚養(yǎng)殖水體,藥物迅速滲透進入胚胎或幼魚體內。若目標藥物旨在矯正因Cdx基因異常引發(fā)的脊柱畸形,通過模型便能直觀看到幼魚脊柱在藥物作用下逐步恢復正常形態(tài);若是醫(yī)療腸道疾病藥物,可清晰觀察腸道蠕動節(jié)律重歸平穩(wěn)、絨毛結構趨向完整。斑馬魚的游泳行為可反映其身體狀況和環(huán)境適應性。基因表達斑馬魚實驗

斑馬魚的體表有黏液,可減少在水中游動的阻力。基因表達斑馬魚實驗

斑馬魚功效評價體系●基于表型對斑馬魚的一些臟器或細胞在顯微鏡下進行觀察,進而評估功效,如血管、腸道、卵黃囊、神經(jīng)、中性粒細胞與紅細胞等●基于生化指標通過染色、試劑盒等方法對功效進行測試,如ROS染色、脂肪染色或酶含量檢測等●基于分子生物學通過PCR的方法對特定基因的表達水平進行定量,也可進行轉錄組學的實驗●基于行為學通過對斑馬魚的運動情況對一些功效進行評價,如睡眠、緩解體力疲勞、改善記憶等斑馬魚安全評價體系●胚胎毒性檢測將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h質量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常劣質產(chǎn)品會誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡基因表達斑馬魚實驗

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