功能：當外泌體在1980年初次被發現后，其被認為是細胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對其生物來源、其物質構成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發現外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導致大量新生血管的生成，促進了一些病癥的生長與侵襲。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。廈門外泌體提取試劑進貨價

外泌體的提取方法學規范、統一定量及鑒定等。關于外泌體的提取有超速離心、試劑盒、超濾法、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊。超速離心法是目前外泌體相關文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣，費事費力，而且步驟多導致實驗中容易污染，且損耗量大，使得較終回收的外泌體不穩定。而且對于抽提細胞上清來說，更是極為不請便，試想用提取300ml的上清需要6個50ml離心管，無論是過濾還是后續的每一步的離心去沉淀，都具有操作極其不便的缺點，總之非常麻煩。而超濾法存在外泌體會堵塞膜孔，造成濃縮效率低，濃縮管重復利用差，甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會粘連成團，造成損失及較后的數據有誤差，對于后續實驗也有影響外泌體提取試劑廠家外泌體的提取方法：磁珠免疫法。

具體步驟是:以下所有步驟都在4℃下進行，1、300×g10min，棄沉淀，去除細胞2、2000×g20min，棄沉淀，去除死細胞3、10,000×g30min，棄沉淀，去除細胞碎片等亞細胞成分4、10,000×g70min，棄上清，沉淀即為外泌體5、PBS（每10ml細胞培養液用30mlPBS重懸）清洗沉淀物，混勻，10,000×g70min6、lmlPBS溶解沉淀（外泌體），立即使用或置于-80℃備用。7、一般超速離心法會結合密度梯度離心，這樣得到的外泌體更純，具體做法第4步后蔗糖梯度離心，10,000×g70min，以去除密度大于1.21g/ml的顆粒。優點是：成本低，操作簡單，獲得的囊泡數較多。缺點是：耗時耗力（需用時8-30h，并且每次只能處理6個樣本），獲得的外泌體純度不是很高，高速及重復離心也會對外泌體產生很大的傷害，并且不適用于如血漿和血清等粘性液體生物樣本。

外泌體的提取、分離方法：微流控技術。微流控是利用微納米級尺寸的管道來處理和操控流體所涉及的一門技術，其在外泌體分離方面的應用受到越來越多學者的關注。Jie等[16]課題組開發了一種三維納米結構微流控芯片，微柱陣列通過化學沉積將交叉多壁碳納米管功能化，然后其就可以識別特定的分子(CD63)并利用獨特拓撲納米材料高效的捕獲外泌體。Wunsch等[17]利用硅工藝生產納米級確定性側向位移(Nano-DLD)芯片，得到了均勻的間隙尺寸，該芯片可以靈敏地將20~110nm的顆粒分離。該研究證明了外泌體基于大小的位移，從而揭示了利用芯片分選和量化納米級生物膠體的潛力。通過離心篩選初步去除體液中的細胞成分和細胞碎片，制成體液樣本備用。

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Millipore)濃縮至5mL,將濃縮液重新以10倍PBS稀釋后4℃超速離心100000×g(角轉子TYPE50.2)4h,收集離心管底部約1mL液體及極微量沉淀(來自2×107個細胞)以20mLPBS重懸即為胞外體,用0.22μm過濾膜除菌后凍存于-80℃備用。（該步驟參考文獻“腫瘤細胞來源胞外體的分離鑒定與功能檢測”）優點是：分離得到的外泌體純度很高。缺點是：步驟繁瑣、耗時耗力、對離心時不好把握。外泌體提取：高速離心以消除更大的囊泡。深圳外泌體提取試劑廠家供應

外泌體的提取方法，先用含無外泌體血清的培養基對人脂肪來源間充質干細胞進行饑餓培養。廈門外泌體提取試劑進貨價

外泌體相關miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個核苷酸的非編碼小RNA，能夠通過下調或壓制靶mRNAs來調節轉錄水平上的基因表達，目前非編碼RNA被普遍發現存在于NSCLC患者外泌體中，參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復合物與多個mRNA結合，從而阻滯整個生物通路。因此，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環游離miRNA的表達，與75例健康者相比，發現了兩種高表達的miRNA（miR-25和miR-223）。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達進行了評估，結果顯示，12個一些病癥相關的miRNA*在肺病患者中過度表達。Cazzoli等收集了30個血漿樣本，發現4種外泌體miRNA（miR-378a、-379a、-139-5p、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908。離心除去細胞器，留取上清。廈門外泌體提取試劑進貨價