目前有 210 +種不同種類的支原體分布于人類、動物、昆蟲和植物中，其中 20 +種在細胞培養(yǎng)中被發(fā)現(xiàn)為污染物。支原體在實驗室中的傳播來源多種多樣，主要來源包括實驗室人員、胎牛血清（FBS）或新生牛血清（NBS）、以及由豬來源的胰蛋白酶溶液。此外，來自其他實驗室或商業(yè)供應商的細胞培養(yǎng)物、培養(yǎng)基、污染的試劑；非無菌供應品、培養(yǎng)基和溶液；實驗室人員；培養(yǎng)箱；液氮；空氣顆粒和氣溶膠；抗*素的過度使用；細胞培養(yǎng)器皿的不正確密封；以及其他的支原體細胞培養(yǎng)物等都可能成為支原體的傳播途徑。
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方法 |
靈敏度 |
優(yōu)勢 |
劣勢 |
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培養(yǎng)法 |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 便宜 ü 金標準 |
ü 費勞力 ü 耗時長 ü 需要特定的培養(yǎng)基 ü 特定支原體種類需要特定的培養(yǎng)基 |
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DNA染色 (DAPI or Hoescht) |
☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 可能難以判讀結(jié)果 ü 無法鑒別支原體種屬 ü 可能假陽性可能性 |
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間接染色 |
☆☆☆ |
ü 迅速 ü 便宜 ü 易檢測 |
ü 費時 ü 需要細胞系指示 |
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ELISA |
☆☆ |
ü 迅速 ü 客觀，易判讀結(jié)果 ü 可以鑒別支原體種屬 |
ü 受抗體限制 ü 價格高 |
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免疫染色 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 可檢測支原體種屬 ü 價格略高 |
ü 可檢測的支原體種屬有限 |
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放射自顯影 |
☆☆ |
ü 迅速 |
ü 難以判讀結(jié)果 ü 無法鑒別支原體種屬 ü 費勞力 |
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生物發(fā)光 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 難以判讀結(jié)果 ü 無法鑒別支原體種屬 |
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PCR |
☆☆☆ |
ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特異性 |
ü 可能假陽性可能性 ü 檢測特異性依賴引物特異性 ü 需要提取DNA |
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Real-Time PCR |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特異性 ü 結(jié)果可靠 ü 高通量 |
ü 可能假陽性可能性 ü 檢測特異性依賴引物特異性 ü 需要提取DNA |
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LAMP |
☆☆ |
ü 便捷 ü 無需DNA提取 ü *需10min左右的實驗操作時間 ü 具有特異性 ü 高通量 |
ü 可能假陽性可能性 ü 檢測特異性依賴引物特異性 支原體檢測PCR法和LAMP方法的優(yōu)劣勢比較。上海細胞支原體檢測時間 |
支原體檢測方法LAMP法？上海支原體預防貨期