在基于時間相關單光子計數的熒光壽命成像實驗中,通過選用超快激光器可以優化脈沖持續時間,單光子探測器和時間數字轉換器的時間抖動則成為制約時間分辨率的關鍵參數。熒光壽命成像可進行高質量的多色成像實驗或實現STED、PALM/STORM等超分辨率熒光顯微成像。目前TCSPC是主要應用的熒光壽命測定技術。熒光壽命通常在ps~us量級,在如此短的時間量級上進行測量,它是較為成熟準確的測試手段。TCSPC的工作原理是使用一個同步信號源驅動激光器,出射光脈沖照射樣品池,在利用光子探測裝置(多為PMT)對熒光信號進行探測,每一個光子計數信號在FT1010中都會落入一個對應的時間窗口,經過一定時間的統計疊加后即...
熒光壽命成像可以應用到個性化化療:要針對患者所患的特殊病癥,找到較有效的抗病藥物至關重要。但是,病細胞對不同類型藥物的反應并不是完全可預測的。因此,進行活檢,將細胞培養并用不同的藥物處理。同時,它們被FLIM重復成像。熒光壽命表明治理后細胞代謝狀態的早期改變。因此,通過這些測量,只需幾天即可確定較有效的藥物。熒光壽命成像將時域多指數衰減分析與相量圖相結合。時域中熒光衰減的測量需要短的激發脈沖和快速的檢測電路。樣品中的每個點都被依次激勵。使用時域方法,壽命是從對衰減數據的指數擬合得出的。熒光壽命成像可以用于無法控制局部探針濃度的熒光顯微鏡中。遼寧單分子熒光壽命成像研發熒光壽命成像中的熒光壽命及其...
熒光壽命成像是什么?如果分子環境刺激激發態衰變而不發射光子,則熒光強度會降低(淬滅)。熒光淬滅是一條單獨的發射路徑,因此在動力學上與熒光過程形成競爭關系。激發態存儲現在可以通過一個以上的過程衰變,從而縮短熒光壽命。這種壽命的改變可用于收集分子環境的信息。一種特殊類型的淬滅是將激發能量以非輻射的方式傳遞到相鄰的不同熒光染料中:“熒光共振能量轉移”,FRET。此時,不只第1個熒光染料(供體)變暗,壽命變短,而且第二個熒光染料(受體)在“錯誤的”激發顏色下開始發光。由于這種效果的產生需要兩種熒光染料(小于10 nm)的密切接觸,因此將其用作研究分子相互作用的“分子標尺”。它也是許多現代FRET生物傳...
熒光壽命成像裝置通常由激發光源、光電探測器、延遲儀器及圖像處理設備組成。門控儀器的光源通常為短脈沖的超快激光器,常見的成像設備是CCD,延遲儀器提供FLIM的控制信號。由于光電探測器和CCD等器件輸出的是光強度信息,熒光壽命圖像可以通過Rapid Lifetime Determination (RLD)和Weighted Nonlinear Least Square (WNLLS)兩種處理方法利用熒光強度圖像通過反演得出。熒光壽命成像(FLIM)有時域和頻域測量法,時域測量中主要有TCSPC技術、門控探測技術、條紋相機探測技術和頻閃技術;頻域測量法中主要是調制技術。每一種測量技術在測量樣品成像...
熒光壽命成像開始用于組織體的在體成像,與傳統的使用熒光強度和光譜信息作為鑒別組織異常的成像方式相比,壽命成像提供了更多的生化診斷信息。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。另外,采用多光子激發可顯著提高組織體的成像深度,如對人體皮膚自體熒光進行多光子激發熒光壽命成像,成像深度達200 um,組織體的熒光壽命分布揭示了細胞代謝狀態的變化,可用于對皮膚病的診斷。對腔體中瘤的早期臨床診斷,已開發出具有實時及壽命分辨功能的內窺鏡,并對離體膀胱樣品進行測試,得到了黃素分子的自體熒光壽命圖像。利用熒光壽命成像顯微鏡技術可實現可以實時監控發光納米顆粒在活細胞內的穩定性。珠海單分子熒光壽命成像哪家好熒光壽命成像...
熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。時間域測量方法涉及用短光脈沖照射樣品(比色皿、細胞或組織),然后隨時間測量發射強度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測方法可用于壽命測量,其中時間相關單光子計數(TCSPC)可實現簡單的數據收集和增強的定量光子計數。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調制。在該方法中,發射發生在與入射光相同的頻率處,并且隨著激發光兼有相位延遲和振幅的變化(解調)。壽命測量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測定。壽命法通過使用光譜位移探針擴展了分析物濃度范圍的靈敏度。壽命測量可用于沒有直接探針的分析物。包括葡萄糖、抗原或基于熒光能量轉移轉導機制的任何親和力或免疫測定。熒...
熒光壽命成像技術及其在生物醫學中的應用:熒光分子的壽命就像熒光分子的激發光譜和發射光譜一樣是熒光分子的固有特性,隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入,科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外,對熒光壽命成像的需求也逐漸增加,而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息,可用于分子間相互作用(FRET)、分子所處微環境的離子濃度(如Ca2+、pH)及細胞代謝水平的改變等測量,并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發熒光,還可以結合熒光相關光譜對單分子實現熒光壽命相關光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統熒光成像的維度,是功能成像的理想工具,在生物醫...
熒光壽命成像FLIM相比于熒光強度成像更有優勢。通過熒光強度成像可以獲得熒光分子的空間分布,較為直接和簡便,但是當熒光分子具有相似的頻譜特性,或是同樣的熒光分子在不同環境下時,依賴強度進行成像的方案便無法準確反映信息。與基于光強的成像方式不同,熒光壽命成像FLIM適用于測量熒光分子環境的變化,或是測量分子的運動情況。其結果與熒光分子濃度無關,且不受影響光強的光散射或是光吸收影響,可以精確測量熒光淬滅過程,對生物分子微環境進行定量測量。熒光壽命成像可以提供有關電信號變化、離子和氧含量、溫度、細胞或其環境中的 pH 值的定量信息。上海單分子熒光壽命成像熒光壽命成像或FLIM是基于熒光樣品中不同區域...
熒光壽命成像中的熒光壽命及其含義:假定一個無限窄的脈沖光(δ函數)激發n0個熒光分子到其激發態,處于激發態的分子將通過輻射或非輻射躍遷返回基態。假定兩種衰減躍遷速率分別為Γ和knr,則激發態衰減速率可表示為:其中n(t)表示時間t時激發態分子的數目,由此可得到激發態物種的單指數衰減方程。熒光壽命定義為衰減總速率的倒數:熒光強度正比于衰減的激發態分子數,因此可將上式改寫為:其中I0是時間為零時的熒光強度,τ為熒光壽命。也就是說熒光強度衰減到初始強度的1/e時所需要的時間就是該熒光物種在測定條件下的熒光壽命。實際上用熒光強度的對數對時間作圖,直線斜率即為熒光壽命倒數的負值。熒光壽命也可以理解為熒光...
熒光壽命成像顯微技術已在生命科學,臨床熒光壽命領域中得到了普遍的應用。成像,擴散光學層析成像,熒光相關光譜等等。使用我們專有的多維時間相關單光子計數技術(TCSPC),我們的FLIM和TCSPC系統具有超高光子效率的特點。因此,科學家,醫生,研究人員和其他用戶能夠進行TCSPC FLIM顯微鏡檢查,多波長FLIM,同時FLIM和快速獲取FLIM。生命科學是我們熒光壽命成像顯微(FLIM)設備的主要應用領域。我們的技術經常用于以下領域:分子影像學、代謝成像、FRET成像、同時進行NAD(P)H和pO2成像。熒光壽命成像擴展了傳統熒光成像的維度,是功能成像的理想工具;福建植物熒光壽命成像原理熒光壽...
影響熒光壽命成像測量的幾種因素:1.溫度影響:一般說來,熒光隨溫度升高而強度減弱,溫度升高1℃,熒光強度下降1~10%不等。測定時,溫度必須保持恒定。 2.PH值影響:PH 值影響物質的熒光,應選擇較佳PH制備樣品。 3.光分解對熒光測定的影響: 熒光物質吸收紫外可見光后,發生光化學反應,導致熒光強度下降。因此,熒光分析要采用高靈敏度的檢測器,而不是用增強光源來提高靈敏度。測定時,用較窄的激發光部分的狹縫,以減弱激發光。同時,用較寬的發射狹縫引導熒光。熒光分析應盡量在暗環境中進行。熒光壽命成像可以提供熒光強度(光子數)和光子壽命的空間分布。紅外熒光壽命成像怎么樣市場上熒光壽命的測量方式可分...
熒光壽命成像有幾點優勢:1.不需要考慮跳色的影響,從而免去了計算和去除跳色雜質信號的麻煩;去除跳色雜質的準確性很大程度上依賴于信噪比、成像流程的設計和控制、以及跳色信號估算的算法,這些因素使得通過穩態光強度測量熒光壽命成像的精確度在很多時候受到質疑。2.穩態光強度的熒光壽命成像測量很容易受熒光標記光漂白或是激發光散射背景的影響,而這些因素對FLIM-FRET的測量影響相對較低。3.熒光壽命成像可以定量的區分參與FRET和沒有參與FRET的分子數量,這樣深入的定量分析是穩態光強度方法做不到的。熒光壽命成像系統是一種用于化學領域的分析儀器。廣東多色熒光壽命成像操作步驟與熒光光譜一樣,熒光壽命也是熒...
熒光壽命成像:作為熒光成像中除光譜和強度之外的新維度,當前,熒光壽命成像主要應用領域包括:用于樣品分離,如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光團在光譜上非常相似(max 580 vs 573)無法分離,但它們在熒光壽命上差異明顯。作為生物傳感器,如評價藥物/理化條件對細胞的影響、Ca+震蕩等。充分拓展了壽光命成像的使用范圍,實現可相互驗證的多維度樣品成像。實現真正的生物動力學分析和功能成像。熒光壽命成像不受光漂白的影響。廣州化學熒光壽命成像操作步驟新技術和新概念的發展促進了數據評估,意味著熒光壽命成像(FLIM)的速度提高了10倍,可以媲美標準共聚焦成像,且操作...
新技術和新概念的發展促進了數據評估,意味著熒光壽命成像(FLIM)的速度提高了10倍,可以媲美標準共聚焦成像,且操作簡單。熒光過程提供了兩個用于成像的測量參數:強度和熒光壽命。熒光壽命是指分子停留在激發態的時間。可以通過觀察足夠大量的激發-發射事件集中來測量熒光染料的典型壽命。我們可以測量圖像中所有像素的典型壽命,并將這些數字記入數組元素。那就是熒光壽命成像。典型的熒光壽命范圍在0.2到20納秒之間。熒光壽命與熒光染料的濃度無關。無論樣品結構只有零星熒光染料還是載滿熒光染料:壽命信號始終相同,并表明在同一環境中存在相同的熒光染料。因此,熒光壽命不受光漂白的影響。樣品深處的圖像將比表面圖像暗得多...
在種類繁多的顯微技術中,熒光壽命顯微成像技術(FLIM)具有對生物大分子結構、動力學信息和分子環境等進行高分辨高精度測量的能力,因此其重要性日漸提升,被普遍地應用于生物學研究及臨床診斷等領域。熒光的特性包含有:熒光激發和發射光譜、熒光強度、量子效率、熒光壽命等,其中,熒光壽命是指熒光分子在激發態上存在的平均時間(納秒量級)。分子的熒光壽命在幾納秒至幾百納秒之間,因此,測量熒光壽命需要極快響應時間的探測器。熒光壽命成像的發展很好地彌補了基于強度成像的問題,對生物醫學檢測有著重要的意義。熒光壽命成像不受染料濃度的影響;福建化學熒光壽命成像哪個牌子好熒光壽命成像有幾點優勢:1.不需要考慮跳色的影響,...
熒光分子受激發后發光,熒光壽命量化了發光的衰減率。該特征時間不但取決于特定的熒光團,還取決于其環境,分子相互作用影響弛豫過程并改變熒光團的壽命。熒光壽命是微環境的相對參數,不受環境吸收、樣本濃度等因素影響,因此能夠對生物組織環境中的 p H 值水平、離子濃度、氧分子濃度等微環境狀態進行高精度檢測。熒光壽命顯微成像(FLIM),可以定位不同的分子及濃度分布,在生物,材料,半導體領域具有重要的應用價值。熒光壽命成像原理及應用說明:熒光壽命是指分子受到光脈沖激發后返回基態之前在激發平均停留的時間,處于激發態的熒光分子在從激發到基態的過程中發射熒光釋放能量。熒光壽命取決于熒光分子所處的微環境,通過對樣...
熒光顯微技術具有無損、非接觸、高特異性、高靈敏、高體友好以及能夠提供功能信息等突出優點,一直是生命科學,尤其是細胞生物學研究的重要工具。近年來,隨著生命科學的發展,對熒光顯微技術也提出了越來越高的要求,激光技術、熒光探針標記技術、新型熒光探測技術和成像手段的不斷發展,極大地促進了熒光顯微技術的發展,成為推動生命科學發展的重要動力。此外,熒光顯微技術也在成像的對比機制方面獲得了很大的進展。超分辨(SR)成像技術的發展,也為熒光壽命成像(FLIM)的新發展提供了巨大的機遇。在種類繁多的顯微技術中,熒光壽命顯微成像技術被普遍地應用于生物學研究及臨床診斷等領域。上海熒光壽命成像售價熒光壽命顯微成像(F...
熒光壽命成像(FLIM)的方法特別適合于體內診斷,因為它們是無創且無損的。因此,它們被普遍用于受試者的臨床研究和醫學檢查。例如,該技術可以用于以下領域:皮膚的體內診斷:人類皮膚的多光子擴散層析成像結合了雙光子激發和非解掃檢測,因此,多光子FLIM可以提供組織層的光學切片圖像,深度可達100 μm。人皮膚細胞的體內雙光子成像是可能的,而不會損害組織的活力,可以從亞細胞分辨率重建三維結構。眼科檢查:眼科FLIM結合了快速光束掃描和皮秒二極管激光器激發的功能。該方法非常靈敏,可以記錄人眼眼底(背景)的壽命圖像。通過這種方式,有可能及早發現眼部疾病,因為這些疾病通常伴隨著眼底的代謝變化。反過來,這些引...
熒光分析和成像技術因具有非常高的靈敏度和分子特異性而普遍的應用于生物物理、生物化學、醫學、物理、化學等領域,利用熒光光譜技術和熒光顯微技術可以分析樣品中熒光團的組分和分布。不過,由于熒光分析技術大多是基于熒光強度的測量,容易受到激發光強度、樣品濃度淬滅、熒光染料的分布濃度等因素的影響。熒光壽命通常來講是一定的,不受激發光強度、熒光團濃度等因素的影響,只只與熒光團所處的微環境有關,因此,利用熒光壽命顯微鏡(Fluorescence lifetime imaging microscopy, FLIM)對樣品進行熒光壽命成像,可以對樣品所在的微環境中的許多物理參數如氧壓、溶液疏水性等及生物化學參數如...
熒光顯微技術具有無損、非接觸、高特異性、高靈敏、高體友好以及能夠提供功能信息等突出優點,一直是生命科學,尤其是細胞生物學研究的重要工具。近年來,隨著生命科學的發展,對熒光顯微技術也提出了越來越高的要求,激光技術、熒光探針標記技術、新型熒光探測技術和成像手段的不斷發展,極大地促進了熒光顯微技術的發展,成為推動生命科學發展的重要動力。此外,熒光顯微技術也在成像的對比機制方面獲得了很大的進展。超分辨(SR)成像技術的發展,也為熒光壽命成像(FLIM)的新發展提供了巨大的機遇。熒光壽命檢測經典方法為點對點的時間相關單光子計數(TCSPC)。重慶植物熒光壽命成像哪家實惠熒光壽命成像:作為熒光成像中除光譜...
熒光分析和成像技術因具有非常高的靈敏度和分子特異性而普遍的應用于生物物理、生物化學、醫學、物理、化學等領域,利用熒光光譜技術和熒光顯微技術可以分析樣品中熒光團的組分和分布。不過,由于熒光分析技術大多是基于熒光強度的測量,容易受到激發光強度、樣品濃度淬滅、熒光染料的分布濃度等因素的影響。熒光壽命通常來講是一定的,不受激發光強度、熒光團濃度等因素的影響,只只與熒光團所處的微環境有關,因此,利用熒光壽命顯微鏡(Fluorescence lifetime imaging microscopy, FLIM)對樣品進行熒光壽命成像,可以對樣品所在的微環境中的許多物理參數如氧壓、溶液疏水性等及生物化學參數如...
熒光壽命成像可以應用到個性化化療:要針對患者所患的特殊病癥,找到較有效的抗病藥物至關重要。但是,病細胞對不同類型藥物的反應并不是完全可預測的。因此,進行活檢,將細胞培養并用不同的藥物處理。同時,它們被FLIM重復成像。熒光壽命表明治理后細胞代謝狀態的早期改變。因此,通過這些測量,只需幾天即可確定較有效的藥物。熒光壽命成像將時域多指數衰減分析與相量圖相結合。時域中熒光衰減的測量需要短的激發脈沖和快速的檢測電路。樣品中的每個點都被依次激勵。使用時域方法,壽命是從對衰減數據的指數擬合得出的。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。深圳熒光壽命成像哪里買熒光壽命是熒光基團在通過...
熒光壽命成像技術(Fluorescence Lifetime ImagingMicroscopy,FLIM)是一種在顯微尺度下展現熒光壽命空間分布的技術,由于其不受樣品濃度影響,具有其他熒光成像技術無法代替的優異性能,目前在生物醫學工程、光電半導體材料等領域是一種重要的表征測量手段。熒光和熒光壽命:分子包含多個單能態S0、S1、S2…和三重態T1…,每個能態都包含多個精細的能級。正常情況下,大部分電子處在*低能態即基態S0 的*低能級上,當分子被光束照射,會吸收光子能量,電子被激發到更高的能態S1 或S2 上,在S2 能態上的電子只能存在很短暫的時間,便會通過內轉換過程躍遷到S1 上,而S1 ...
熒光壽命(FLT)是熒光團在發射光子并返回基態之前花費在激發態的時間。根據熒光基團的不同,FLT可以從皮秒到數百納秒不等。熒光團群的壽命是指經熒光或非輻射過程的能量損失后,激發態分子數量以指數方式衰減到原始數量的N / e(36.8%)的時間。熒光壽命是熒光團的固有屬性。FLT不依賴于熒光團濃度、樣品吸收、樣品厚度、測量方法、熒光強度、光漂白和/或激發強度。它受外部因素影響,如溫度、極性和熒光淬滅劑的存在。熒光壽命對依賴于熒光團結構的內部因素敏感。隨著技術的發展,在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。重慶多色熒光壽命成像哪個品牌好熒光分析和成像技術因具有非常高的...
熒光壽命顯微成像(Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM)是熒光壽命測量和熒光顯微技術的結合,熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度、可定量測量微環境變化和分子間相互作用、不受探針濃度、激發光強度和光漂白影響等優點。在過去的十年中,光學技術硬件和軟件、材料科學和生物醫學的迅速發展,共同促進了FLIM技術及其應用的巨大進步。熒光壽命成像(FLIM)對細胞信號傳導及調控,蛋白間的相互作用等生物研究發揮著很大作用。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。上海單分子熒光壽命成像研發熒光壽命成像技術(Fluorescence L...
熒光壽命成像技術及其在生物醫學中的應用:熒光分子的壽命就像熒光分子的激發光譜和發射光譜一樣是熒光分子的固有特性,隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入,科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外,對熒光壽命成像的需求也逐漸增加,而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息,可用于分子間相互作用(FRET)、分子所處微環境的離子濃度(如Ca2+、pH)及細胞代謝水平的改變等測量,并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發熒光,還可以結合熒光相關光譜對單分子實現熒光壽命相關光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統熒光成像的維度,是功能成像的理想工具,在生物醫...
熒光壽命成像顯微術(FLIM)是一種利用熒光染料固有特性的成像技術。除了具有特有的發射光譜外,每個熒光分子還有特有的壽命,它反映了熒光基團在發射光子之前處于激發態的時間。除了標準的熒光強度測量外,壽命分析還可以提供其他信息。過去,壽命成像一直是一種緩慢、復雜的專業化技術。只有經驗豐富的顯微鏡**或物理學家才會使用這種技術。熒光壽命成像提供了額外的信息,有助提高共聚焦成像的質量。它非常適合用于區分熒光發射光譜重疊的熒光探針,或消除不需要的背景熒光信號。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。北京動物熒光壽命成像哪里買熒光分析和成像技術因具有非常高的靈敏度和分子特異性而普遍的應用于生物物理、生物化學、...
熒光壽命成像(Fluorescence Lifetime Imaging ,FLIM))是一種重要的熒光顯微鏡技術,通常用于研究生物分子間相互作用、細胞中的信號事件或區分光譜重疊的熒光團。此外,FLIM 可以提供有關電信號變化、離子和氧含量、溫度、細胞或其環境中的 pH 值的定量信息。熒光壽命成像具有不同于熒光強度成像的眾多優點:不受染料濃度的影響,無論染色或免疫熒光的效率高或低,熒光壽命都能呈現一致的數據,這意味著更少的實驗數量和重復性更好的實驗結果。不受光漂白的影響,熒光發射時間不受激發光強度的影響,因此不存在光漂白問題。不受樣本厚度和光源噪聲的影響。熒光壽命成像系統是一種用于化學領域的分...
熒光壽命顯微成像(Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM)是熒光壽命測量和熒光顯微技術的結合,熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度、可定量測量微環境變化和分子間相互作用、不受探針濃度、激發光強度和光漂白影響等優點。在過去的十年中,光學技術硬件和軟件、材料科學和生物醫學的迅速發展,共同促進了FLIM技術及其應用的巨大進步。熒光壽命成像(FLIM)對細胞信號傳導及調控,蛋白間的相互作用等生物研究發揮著很大作用。隨著技術的發展,在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。深圳分子熒光壽命成像供應熒光壽命成像FLIM所面臨...
熒光壽命成像是什么?如果分子環境刺激激發態衰變而不發射光子,則熒光強度會降低(淬滅)。熒光淬滅是一條單獨的發射路徑,因此在動力學上與熒光過程形成競爭關系。激發態存儲現在可以通過一個以上的過程衰變,從而縮短熒光壽命。這種壽命的改變可用于收集分子環境的信息。一種特殊類型的淬滅是將激發能量以非輻射的方式傳遞到相鄰的不同熒光染料中:“熒光共振能量轉移”,FRET。此時,不只第1個熒光染料(供體)變暗,壽命變短,而且第二個熒光染料(受體)在“錯誤的”激發顏色下開始發光。由于這種效果的產生需要兩種熒光染料(小于10 nm)的密切接觸,因此將其用作研究分子相互作用的“分子標尺”。它也是許多現代FRET生物傳...