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杭州高通量轉錄組學定性分析

來源: 發布時間:2022-01-08

RNA-Seq轉錄組學技術優勢:相比基因芯片和標記的堿基序列的測序方法,RNA-seq具有一定的優越性。與基因芯片相比,RNA-Seq不只可以在更高的分辨率下用來測量基因的表達水平情況,還可以揭示未知的轉錄組和拼接亞型,并為選擇性拼接亞型提供定量分析。相對于傳統的芯片雜交平臺,轉錄組測序無需預先針對已知序列設計探針,即可對任意物種的整體轉錄活動進行檢測,提供更精確的數字化信號、更高的檢測通量以及更普遍的檢測范圍,是目前深入研究復雜性轉錄組的強大工具。鑒于這些優勢,RNA-Seq很快就被應用到關于瘤病相關研究的多個方面。轉錄組學能夠同時鑒定和定量稀有轉錄本和正常轉錄本。杭州高通量轉錄組學定性分析

RNA-Seq,是基于新一代測序技術的轉錄組學研究方法:首先提取生物樣品的全部轉錄的RNA并進行mRNA富集,然后反轉錄為cDNA后進行的新一代高通量測序,在此基礎上進行片段的拼接組裝,從而可得到一個個的轉錄本,進而可以形成對該生物樣品當前發育狀態的基因表達狀況的全局了解。不同階段或部位的生物樣品的RNA-Seq轉錄組進行比較分析,則可以在轉錄層面得到基因表達水平的變化,針對關鍵基因則可以進行代謝通路(Pathway)的構建。轉錄組學即特定細胞在某一功能狀態下轉錄出來的所有RNA的總和,包括mRNA和非編碼RNA。南京IncRNA轉錄組學研究轉錄組學可以對任意物種進行全基因組分析。

轉錄組學:轉錄組學是研究特定的細胞、組織或個體在特定時間和狀態下所轉錄出所有RNA的學科,轉錄組測序是指利用高通量測序方法,研究特定的細胞、組織或個體在特定時間和狀態下所轉錄出的所有mRNA,用于揭示不同功能狀態下的基因表達、結構的差異,闡明分子機制。應用領域:醫學研究:疾病標志物篩查、疾病的診斷和分型、疾病復發診斷、病因與病理機制探究、臨床療效評價、藥物毒理學評價。生命科學研究:非生物環境關系研究、植物與微生物、在表型鑒定中的應用、代謝途徑及功能基因組研究、藥用植物研究中的應用。

circRNA轉錄組學成環機制:circRNA環化方式分為內含子環化和外顯子環化。目前主流的成環機制可歸類為:依賴于剪切體的索尾插接環化。在mRNA前體上,通過連續的組裝小核核糖體蛋白從而催化外顯子下游的5′供體的位點連接到上游的3′受體的位點,索尾插接形成環化,然后通過剪切形成circRNA。順式作用元件促進circRNA形成。部分circRNA外顯子兩側的內含子中含有反向互補序列,首先在剪切位點上并排形成RNA雙鏈體,再通過可變剪切形成帶內含子和不帶內含子兩種不同的circRNA。或者外顯子內部以及兩側的內含子可以競爭進行RNA配對,然后通過可變剪切形成不同類型的circRNA。普通轉錄組測序主要適用于不同的生長階段或者發育過程。

RNA-Seq轉錄組學技術優勢:RNA-seq技術可以檢測到低水平表達、未識別的轉錄子和新拼接亞型基因。另一方面,與基因芯片相比,RNA-Seq有一個更廣的檢測動態范圍,可以研究編碼和非編碼RNA,更易于基因網絡的構建、發現選擇性剪切轉錄物,檢測到等位基因的具體表達方式,也可以用來提取基因型信息。在RNA-Seq單細胞研究中,一個主要優勢是可以分析整個轉錄序列,而不是有限制數量的基因,并且,研究DNA和RNA的方法并不是相互排斥的,他們可以相互結合使用,產生更多的生物學上重要的信息。轉錄組學狹義上指所有mRNA的組合。山東mRNA-seq轉錄組學技術分析

轉錄組具有時間特異性的特點。杭州高通量轉錄組學定性分析

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