外泌體作為藥物載體由于特殊的結構和循環方式，外泌體作為藥物運輸的載體具有獨特的優勢。例如外泌體的尺寸分布能夠增強滲透滯留效應，從而有選擇性地深入組織;其外層磷脂雙分子層可以保護內容物不受各種生物酶的影響，維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中，其體積小，結構、組成與細胞膜類似，導致外泌體可以在避開免疫系統監督的同時深入組織內部，有較好的生物相容性;當采用內源外泌體時，能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應;除此之外，某些細胞來源或經特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性，可以與特定的或組織結合。因此，載藥成為外泌體研究的一個重要分支，具有良好的應用前景。在外泌體中引入藥物的方式包括體內裝載和體外裝載兩種。體內藥物裝載可以通過傳統方法(如病毒轉染、脂質體轉染或電穿孔等)轉染來源細胞，編碼感興趣的RNA或蛋白質，也可以使藥物與來源細胞共混，使細胞分泌產生含有目標生物分子的外泌體。體外藥物裝載則首先需要得到純化的外泌體，然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質體轉染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內可裝載的藥物包括小分子化學藥物、蛋白質和多肽、核酸藥物、天然產物等。動物疾病模型還為新藥研發和疫苗測試提供了有效的平臺。北京疾病模型科研技術服務外包

轉錄組測序結果及TCGA數據庫分析）圖5RNA-Seq和m6A-seq聯合鑒定SOCS2是介導的m6A修飾的下游靶基因PLoSOne2015,在許多不同種類的RNA中，都已觀察到N6-腺苷(m6A)的甲基化，但其在microRNAs中還沒有被研究。研究者在FTO1C1,FTO2D4和FTO3C3細胞系中，通過敲除m6A甲基轉移酶FTO篩選到表達差異的microRNA,說明miRNA受m6A甲基化的調控。進一步通過MeRIP-Seq發現相當一部分的microRNA具有m6A修飾。通過motif分析，他們發現了區分甲基化和非甲基化microRNA的一致序列。該文章所述的表觀遺傳修飾在基因表達的轉錄調控的復雜性上增加了一個新的層次。圖FTO敲除對甲基化的miRNAs的穩定狀態的影響。參考文獻Y,DominissiniD,RechaviG,HeC:Geneexpressionregulationmediatedthroughreversiblem(6)(5):(1):(12):(6):(1):(1):(uridine)(41):(6)(7540):(1):(7481):(4):(6)A-LAIC-seqrevealsthecensusandcomplexityofthem(6)(8):UTRm(6)(4):(7544):(6)(6):(5):(7667):(2):"">panstyle="color:#f5c81c;">xiainducesthebreastcancerstemcellphenotypebyHIF-dependentandALKBH5-mediatedm(6)(14):"">panstyle="color:#f5c81c;">(40):(6)(3):(1):(1):(4):(11):。湖南乳鼠科研技術服務構建希望能給大家提供到幫助，了解更多關于ELISA試劑盒的問題歡迎來電咨詢。

m6A修飾圖譜構建及作用機制：通過m6A甲基化測序（MeRIP-Seq,miCLIP）構建疾病細胞模型或者發病組織的m6A修飾譜，分析m6A的motif,peaks數量及分布，Peak關聯基因的特征，聯合RNA-seq研究m6A甲基化與表達的關系。m6A研究思路方案一方案二研究案例1、.(IF=)為研究ALKBH5的m6A作用機制，作者利用芯片和m6A-seq篩選到膠質瘤增殖相關的FOXM1，通過qPCR、WB、免疫熒光、核質分離WB/qPCR、RIP和MeRIP等實驗證明ALKBH5通過去甲基化調節FOXM1在GSCs中的表達。為研究ALKBH5對FOXM1的作用是否受其他因子的調節，作者研究了FOXM1的鄰近基因，發現lncRNAFOXM1-AS與FOXM1序列互補，且共表達、共定位，進一步通過RIP,RNApulldown等實驗證明lncRNAFOXM1-AS促進ALKBH5和FOXM1初級轉錄本的相互作用。通過細胞實驗進一步驗證ALKBH5在lncRNAFOXM1-AS的作用下維持FOXM1的表達和細胞增殖，從而維持GSCs的干性。圖3ALKBH5敲除細胞中m6A修飾的特征和基因表達的變化2、RNAN6-methyladenosinemethyltransferaseMETTL3promoteslivercancerprogressionHepatology,2017.(IF=)表觀遺傳改變極大地促進了人類癥的發生。傳統的表觀遺傳研究主要集中在DNA甲基化，組蛋白修飾和染色質重構。近。

首先，預實驗必須要當做正式實驗來對待（態度要放端正，這是必須的）。預實驗的每一步都需要詳細規劃，多方籌謀。不論是實驗動物的選擇，還是檢測試劑的購買，都盡量和正式實驗統一標準。建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后，再去購買實驗動物。因為動物會長胖，長胖后給藥劑量就要增加，不僅多花錢，并且還容易影響實驗效果。筆者曾經提前將實驗動物買回，但因為特殊原因沒能購買到造模藥物，**終只能忍痛割愛將動物贈送他人，白白虧了一筆血汗錢（那批老鼠在我這兒白吃白喝長得太胖，沒辦法用作造模）。動物及試劑購買首先需要考慮：實驗動物品種、體重、性別、周齡（通常根據既往文獻報道可以獲得答案）、數量（需要考慮到實驗有一定動物死亡率或者動物本身會打架互毆，因此需要提前購買足夠的動物）。動物購買的途徑、安置的地點，飲食管理（一般實驗室會有動物房，也可以從其他地方購買），動物免疫證明、倫理證明需要提前準備好。實驗相關的試劑和藥物：比如造模藥物和器械，動物干預所需藥物，陽***物選擇及購買（有些藥物購買很困難，必須通過特殊程序才能買到）。如果涉及到有創操作，要提前準備好**物（***建議提前購買），手術器械。動物疾病模型在科研中發揮了巨大的作用，但也存在一些挑戰。

保存于嚴密緊塞或加蓋的容器里，同時在容器外上標簽，并隨同材料在溶液中投入相應的標簽，以免相互混淆。標簽上注明固定液、材料來源、日期等。標簽上的文字，應用黑色鉛筆或繪圖黑墨水書寫。3.脫水注意事項（1）脫水原理：乙醇與石蠟不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蠟。當組織中全部被二甲苯占有時，光線可以透過，組織呈現出不同程度的透明狀態。（2）脫水必須在有蓋的玻璃品中進行，防止吸收空氣中的水分。（3）在更換高一級的脫水劑時，不要移動材料以免損壞，可用吸管吸出器皿中的脫水劑，再用吸水吸盡器皿內剩余液，然后于皿中加入高一級脫水劑。（4）在低濃度酒精中，每級停留不宜太長，否則易使組織變軟，助長材料的解體。（5）在高濃度或純酒精中，每級停留的時間也不宜太長，否則會使組織變脆，影響切片。（6）如需過夜，應停留在70%酒精中。（7）脫水必須徹底，否則不易透明，甚至使透明劑內出現白色混濁現象。4.透明注意事項（1）使用透明劑時，要隨時蓋緊蓋子，以免空氣中的水分進入。（2）更換每級透明劑，動作要迅速，一方面為了不使材料塊干涸，另一方面能避免吸收濕氣。（3）在透明過程中，如果材料周圍出現白色霧狀，說明材料中的水未被脫凈。慢病毒載體包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息。北京小鼠科研技術服務服務

常用于研究細胞的成瘤能力、細胞的轉移、細胞的耐藥和靶分子對腫瘤細胞的發展的影響等等。北京疾病模型科研技術服務外包

3）基因/蛋白質表達定性或定量檢測在進行分子檢測的過程中，保持核酸和蛋白質的完整性至關重要，因此在取樣過程中，應盡量避免核酸及蛋白質的降解。如不注意采樣過程，將會導致樣本中的核酸及蛋白質的無差別降解，嚴重影響后續分子檢測結果。在條件允許的情況下，樣本在離體后應立刻裝入凍存管內，并立即放入液氮中進行冷凍。在RNA提取樣本的保存過程中，可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進行RNA酶的。針對蛋白質提取樣本的保存，我們同樣可以使用商品化的蛋白酶劑進行短期處理。聚合酶鏈式反應（PolymeraseChnReaction，PCR）及免印跡（Westernblotting，WB），這兩種實驗手段是分子學檢測中不可或缺的一部分，也是發表至關重要的分子檢測數據。PCR主要用來對基因在基因組層面或轉錄層面的變化進行定性或定量檢測，而WB則主要用來對某一蛋白質的表達進行定量檢測。（4）轉錄組學、蛋白質組學及代謝組學檢測隨著檢測水平及相關產業的不斷發展，各類組學檢測的價格降低，實驗設計中也常常運用組學檢測來提升實驗設計的檔次。在我們進行轉錄組學及蛋白質組學的檢測過程中，同樣是要首先確保目標RNA或蛋白質的片段完整性。北京疾病模型科研技術服務外包