RNA各種可逆的化學修飾被認為是一種新的表觀遺傳調控方式。m6A是真核生物mRNA常見的化學修飾，在調控mRNA穩定性，剪切和翻譯方面具有重要的作用。作者使用轉錄組測序發現了METTL3（甲基轉移酶3），一種主要的RNAN6-腺苷-甲基轉移酶，在人肝細胞（HCC）和多種實體中高表達。在臨床上，METTL3的過度表達與肝細胞患者不良預有關。體外實驗證明敲除METTL3會抑制HCC細胞增殖，遷移及克隆形成。體內實驗證明敲除METTL3會明顯抑制HCC體內成瘤和肺轉移。另外，使用CRISPR/dCas9-VP64系統，內源性高表達METTL3會促進HCC細胞在體外和體內生長。通過轉錄組測序、m6A-Seq、MeRIP-PCR，作者確定了SOCS2（細胞因子信號2的抑制因子）作為METTL3介導的m6A修飾的下游靶基因。敲除METTL3表達會消除SOCS2mRNAm6A修飾并增強SOCS2mRNA表達。m6A介導的SOCS2mRNA降解是依賴于m6A“讀取器”蛋白YTHDF2。總之，METTL3在HCC大部分高表達中,并通過m6A-YTHDF2依賴機制抑制SOCS2表達從而促進HCC進展。因此，作者發現了在肝發生過程中表觀遺傳改變的一種新機制。圖4RNA甲基化轉移酶METLLT3在肝組織中高表達。動物疾病模型：為人類健康保駕護航。江蘇小鼠科研技術服務實驗

啟醫療，個體化用藥貝克曼庫爾特細胞專題--助力病毒載體純化、細胞特性分析產品庫儀器設備耗材試劑抗體技術服務生物芯片芯片掃描儀|芯片點樣儀|生物芯片系統|生物芯片|其它測讀系統洗板機|多功能篩選系統|大型分析系統|化學發光檢測儀|分光光度計|其它|光譜系統原子吸收光譜儀|可見光光譜儀|熒光光譜儀|紅外光譜儀|近紅外光譜儀|LIBS光譜儀|拉曼光譜儀|紫外/可見/近紅外光譜儀|其它分子生物實驗儀器電泳設備|紫外設備|普通PCR儀|定量PCR儀|數字PCR儀|DNA/有機/多肽合成|轉基因儀|其它顯微系統倒置顯微鏡|實體顯微鏡|生物顯微鏡|電子顯微鏡其它顯微鏡|顯微操縱|附件和濾光片|其它色譜系統液相色譜系統|制備液相色譜系統|毛細管LC系統氣相色譜系統|離子色譜系統|色譜系統檢測器樣品管理工具|色譜系統附件質譜系統飛行質譜|四極桿質譜|離子阱質譜|等離子質譜|毛細管電泳/質譜聯用系統|雜交質譜|質譜標準品|其它實驗室自動化氨基酸分析系統|蛋白純化系統|蛋白質翻譯系統|全自動分液系統|核酸提取純化全自動血液采樣系統|基因組/蛋白組設備DNA測序儀|全基因組測序儀|基因分型系統|雙向電泳系統|蛋白質純化|蛋白質斑點切取系統|其它神經生物學儀器動物功能檢測設備|動物處理設備|。山西病理科研技術服務實驗室常用實驗動物模型按產生原因分為以下5類：自發性動物模型、誘發型模型、遺傳工程模型、醫學模型陰性模型。

外泌體作為藥物載體由于特殊的結構和循環方式，外泌體作為藥物運輸的載體具有獨特的優勢。例如外泌體的尺寸分布能夠增強滲透滯留效應，從而有選擇性地深入組織;其外層磷脂雙分子層可以保護內容物不受各種生物酶的影響，維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中，其體積小，結構、組成與細胞膜類似，導致外泌體可以在避開免疫系統監督的同時深入組織內部，有較好的生物相容性;當采用內源外泌體時，能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應;除此之外，某些細胞來源或經特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性，可以與特定的或組織結合。因此，載藥成為外泌體研究的一個重要分支，具有良好的應用前景。在外泌體中引入藥物的方式包括體內裝載和體外裝載兩種。體內藥物裝載可以通過傳統方法(如病毒轉染、脂質體轉染或電穿孔等)轉染來源細胞，編碼感興趣的RNA或蛋白質，也可以使藥物與來源細胞共混，使細胞分泌產生含有目標生物分子的外泌體。體外藥物裝載則首先需要得到純化的外泌體，然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質體轉染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內可裝載的藥物包括小分子化學藥物、蛋白質和多肽、核酸藥物、天然產物等。

如果實驗平臺的儀器需要提前預約，建議提前規劃好使用的時間。反復總結尋找答案在整個預實驗的過程中可能會出現很多問題。比如造模效果欠佳、灌胃操作不當、腹腔注射操作失誤、使用不當等引起動物死亡。每遇到問題都需要自己想辦法解決，可以從導師、師兄師姐、文獻、貼吧、視頻教程等找到答案。比如筆者曾遇到同樣的給，發現有的大鼠得很深，有的大鼠還活蹦亂跳，在反復嘗試調整濃度，給劑量，更換方式，后來才發現是動物體重秤的準度有問題，導致體重秤得不準。因此，需要自己反復琢磨到底是實驗過程中哪一個環節出現問題，逐一排除。也要求在每一個實驗步驟需要標準化，統一化，盡可能的排除干擾因素，這樣方便在遇到問題快的找到答案。同時，建議每日總結，大到動物死亡原因分析，小到灌胃操作耗時多長時間。建議反復總結出每天實驗的優缺點。做任何一個操作之前，建議提前腦海中反復模擬，準備好相關工具和試劑，避免臨用之際缺少的，影響實驗操作節奏和個人心情。筆者曾經灌胃操作的時候發現竟然忘帶了，只好重新回實驗室準備，那真叫一個郁悶。仔細記錄每日實驗過程無論是碩士還是博士，導師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄，只要是和實驗相關的。動物疾病模型在科研中發揮了巨大的作用，但也存在一些挑戰。

用伊紅乙醇液對比染色1~3min。（4）將切片放入95%乙醇中洗去多余的紅色，然后放入無水乙醇中3~5min，吸干后將切片放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各3~5min。3、觀察在鏡下可見卵巢呈扁橢圓形，表面為單層扁平上皮細胞或單層立方上皮，卵巢實質分為皮質和髓質。可見上皮，原始卵泡和生長卵泡。卵巢組織中各發育階段卵泡及卵巢基質的形態結構清晰可見,細胞核呈藍紫色,細胞質及間質成分呈淺紅色,卵泡中卵母細胞、卵泡細胞、透明帶均清晰可見。注意事項1.取材注意事項（1）取材動作要迅速，不宜作太久的拖延以免組織細胞的成分、結構等發生變化。（2）切片材料應根據需要觀察的部位進行選擇，盡可能不要損傷所需要的部分。（3）切取的組織塊不宜太大，以利于固定劑穿透，通常以5mmx5mmx2mm或10mmx10mmx2mm為宜。2.固定注意事項（1）一般固定液，都以新配為好，配好后應貯存在陰涼處，不宜放在日光下，以免引起化學變化，失去固定作用。（2）有些混合固定液的成份之間會發生氧化還原作用，一定要在使用前才混合，如果混合太早，固定時就沒有作用了。（3）固定材料時，固定液必須充足，一般為材料塊的20~30倍，有些水分多的材料，中間應更換1~2次新液。（4）材料固定完畢后。動物疾病模型作為研究工具，在探索疾病發展和檢查的過程中發揮了巨大的作用。山西病理科研技術服務實驗室

瘤細胞的增殖活性，從而更好地評估腫、瘤的惡性程度和預后.江蘇小鼠科研技術服務實驗

采用opti-MEM和Lipo3000分別轉染含有目的基因的pMSCV-eGFP、VSV、GAG質粒及對照載體，每皿加入脂質體-質粒轉染混懸液按購買脂質體相關說明書操作定量。繼續培養24h。2)24小時后，將培養基更換為新鮮的DMEM完全培養基，放進細胞培養箱繼續培養48~72h。3)48~72h后收集上層培養液，并過μm濾膜，采用ELISA法對所獲得的慢載體進行滴度測定。如不及時使用可以凍存于-80℃。3、慢轉染1)轉染前1天將細胞接種6孔培養板，時細胞的融合率約為50%，前需換液，加入1mLDMEM完全培養基。2)冰浴融化后加入相應體積的液及聚凝胺（Polybrene），混勻后放入37℃孵箱中繼續培養3)4h后補充1mL培養基，14h后換液（24h內換液即可）。4)72h后用倒置顯微鏡觀察熒光，監測效率，出現較多熒光時將等量的轉染細胞和未轉染細胞分別加入等濃度Puromycin（Puromycin或其他篩選濃度需要事先摸索）。5)待未轉染細胞全部死亡并且可觀察到滿意熒光量時，降低Puromycin濃度培養。也可以挑去單克隆細胞株進行進一步培養，以得到滿意的穩定表達目的基因的細胞株。6)使用qRT-PCR和Westernblot的方法檢測目的基因的表達量和蛋白水平是否顯著提高。7)由此可得三組細胞株：a.正常細胞株；b.空載載體的細胞株。江蘇小鼠科研技術服務實驗