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外包動物模型構(gòu)建

來源: 發(fā)布時間:2025-10-29

或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下,由語句“包括一個……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。以下結(jié)合實施例對本實用新型的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。實施例1本實用新型提供一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),包括功能設(shè)備集成底座1和設(shè)置在功能設(shè)備集成底座1上的飼養(yǎng)倉2,所述飼養(yǎng)倉2具有無極調(diào)控微負(fù)壓裝置、高原低氧環(huán)境模擬裝置、高原光照環(huán)境模擬裝置15、高原溫度環(huán)境模擬裝置16、高原濕度環(huán)境模擬裝置17、動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18,所述飼養(yǎng)倉2內(nèi)設(shè)置有若干代謝籠3,飼養(yǎng)倉2前后箱體上設(shè)置有觀察窗4和若干操作窗5,飼養(yǎng)倉2左右箱體上分別設(shè)置有小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,所述代謝籠3還包括設(shè)置在代謝籠3上的投料斗8、飲水瓶9和設(shè)置在代謝籠3下方的聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12。本實施例的工作原理:本裝置的各個功能均通過設(shè)置在飼養(yǎng)倉2上的功能控制面板19控制,本裝置外形采用304不銹鋼,具有良好的氣密性。實驗動物送入飼養(yǎng)倉2內(nèi)部后,關(guān)閉小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,通過功能控制面板19實現(xiàn)飼養(yǎng)倉2內(nèi)部環(huán)境模擬。通過建立腦缺血-再灌注動物模型,模擬人類ICVD的病理過程。外包動物模型構(gòu)建

外包動物模型構(gòu)建,動物模型

皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型一、服務(wù)信息1、動物模型名稱:皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級二、服務(wù)項目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價錢DH2025皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據(jù)體重腹部備皮,然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時,取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深I(lǐng)I°燙傷。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學(xué)觀察:致傷3s大鼠表皮層次尚清楚,細(xì)胞明顯腫脹、變性,層次結(jié)構(gòu)尚清楚,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)不清;致傷10s大鼠表皮細(xì)胞部分脫落,結(jié)構(gòu)不清,明顯變性、壞死,部分細(xì)胞已溶解。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。上海小鼠動物模型造模C57BL/6成年鼠肺部通過呼吸機過量通氣損傷模型的建立;

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結(jié)果發(fā)現(xiàn)在這些組織中,gm20541均有表達(dá),說明該基因可能在體內(nèi)發(fā)揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測gm20541基因在不同組織中的表達(dá)。方法:(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾,充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細(xì)胞后,在冰上裂解20min。(3)4℃,16000g離心10min后,取上清轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管,加入50μl的蛋白上樣液,混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后,分別取20μl,160v電壓進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結(jié)束后,根據(jù)需要,裁剪適當(dāng)大小的硝酸纖維素膜,按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙,并趕去氣泡,轉(zhuǎn)膜槽放入冰水浴中,采用恒流,轉(zhuǎn)膜2h。(6)轉(zhuǎn)膜完畢后,純水沖洗硝酸纖維素膜一遍,晾干并標(biāo)記。然后用8%的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后,加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說明書)稀釋于封閉液的一抗,4℃孵育過夜。(8)回收一抗,1×tbst緩沖液洗膜4次,每次10min,根據(jù)一抗來源,選擇合適二抗,用1×tbst稀釋辣根過氧化氫酶(hrp)標(biāo)記的二抗,室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結(jié)束后,用1×tbst洗膜3次,每次10min,用thermo的elc發(fā)光試劑盒檢測蛋白。

基因/蛋白質(zhì)表達(dá)定性或定量檢測在進(jìn)行分子檢測的過程中,保持核酸和蛋白質(zhì)的完整性至關(guān)重要,因此在取樣過程中,應(yīng)盡量避免核酸及蛋白質(zhì)的降解。如不注意采樣過程,將會導(dǎo)致樣本中的核酸及蛋白質(zhì)的無差別降解,嚴(yán)重影響后續(xù)分子檢測結(jié)果。在條件允許的情況下,組織樣本在離體后應(yīng)立刻裝入凍存管內(nèi),并立即放入液氮中進(jìn)行冷凍。在RNA提取樣本的保存過程中,可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進(jìn)行RNA酶的抑制。針對蛋白質(zhì)提取樣本的保存,我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進(jìn)行短期處理。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)及免疫印跡(Westernblotting,WB),這兩種實驗手段是分子生物學(xué)檢測中不可或缺的一部分,也是發(fā)表論文至關(guān)重要的分子檢測數(shù)據(jù)。PCR主要用來對基因在基因組層面或轉(zhuǎn)錄層面的變化進(jìn)行定性或定量檢測,而WB則主要用來對某一蛋白質(zhì)的表達(dá)進(jìn)行定量檢測。(4)轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)及代謝組學(xué)檢測隨著檢測水平及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展,各類組學(xué)檢測的價格降低,實驗設(shè)計中也常常運用組學(xué)檢測來提升實驗設(shè)計的檔次。在我們進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)及蛋白質(zhì)組學(xué)的檢測過程中,同樣是要首先確保目標(biāo)RNA或蛋白質(zhì)的片段完整性。橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型。

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飼養(yǎng)倉左右箱體上分別設(shè)置有小物件傳遞窗和大物件傳遞窗,所述代謝籠還包括設(shè)置在代謝籠上的投料斗、飲水瓶和設(shè)置在代謝籠下方的聚糞斗、尿液排出口、糞便排出口。進(jìn)一步地,所述無極調(diào)控微負(fù)壓裝置包括進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)、排風(fēng)系統(tǒng)和霍尼威爾或西門子調(diào)控模塊,所述進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置在功能設(shè)備集成底座內(nèi),所述排風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置在飼養(yǎng)倉頂部。進(jìn)一步地,所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)連接,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)之間設(shè)置有比例式氣閥,還包括設(shè)置在飼養(yǎng)倉內(nèi)的嵌入式氧測定儀。進(jìn)一步地,所述高原光照環(huán)境模擬裝置包括可見暖光系統(tǒng)和照明亮度無極控制系統(tǒng),所述可見暖光系統(tǒng)設(shè)置飼養(yǎng)倉頂部。進(jìn)一步地,所述高原溫度環(huán)境模擬裝置包括降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)和溫度采集顯示系統(tǒng)。進(jìn)一步地,所述高原濕度環(huán)境模擬裝置包括加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)和濕度采集顯示系統(tǒng)。進(jìn)一步地,所述動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元包括coms高清圖像采集系統(tǒng)、數(shù)字視頻傳輸系統(tǒng)、頻硬件解壓卡、視頻顯示系統(tǒng)。綜上所述,由于采用了上述技術(shù)方案,本實用新型的有益效果是:1、本實用新型非全自動控制系統(tǒng),需要人為觀察并手動調(diào)節(jié)隔離器內(nèi)部環(huán)境。合理建立周圍性面癱動物模型對進(jìn)一步深入研究具有重要意義。湖北基因敲除動物模型構(gòu)建

通過截斷大鼠面部神經(jīng)致面癱模型的建立。外包動物模型構(gòu)建

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)工程技術(shù)領(lǐng)域,具體而言,涉及一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用。背景技術(shù):視網(wǎng)膜色素變性(retinitispigmentosa,rp)是一組視網(wǎng)膜光感受器異常導(dǎo)致的遺傳性致盲眼底病,在全世界的發(fā)病率約為1/3000~1/4000,而在中國人群的發(fā)病率可達(dá)1/3500,由于我國人口眾多,rp患者可達(dá)三十萬之眾,給家庭和社會帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。目前針對rp的診斷和面臨許多困難,尚無有效的手段,這主要歸因于其在臨床表型和遺傳上具有高度的異質(zhì)性,針對其病理機制系統(tǒng)研究不足。典型的rp患者早由于視桿細(xì)胞功能缺陷而出現(xiàn)夜盲和視野狹窄,逐步發(fā)展為管狀視野,直至失明;眼底檢查可見視網(wǎng)膜色素沉著。在病理學(xué)方面,典型的rp主要影響視桿細(xì)胞,造成視桿細(xì)胞死亡并繼發(fā)視錐細(xì)胞死亡,主要表現(xiàn)為光感受器受損、變性,視網(wǎng)膜外核層逐漸變薄直至消失,視網(wǎng)膜外網(wǎng)層及其他相關(guān)細(xì)胞層出現(xiàn)相應(yīng)病理改變。此外,由于rp在臨床表型和遺傳模式上均具有高度的異質(zhì)性,導(dǎo)致許多的rp致病機制尚不清楚,這為rp疾病的臨床診斷帶來極大困難,因此針對rp疾病的致病機制研究迫在眉睫。而目前,缺乏相應(yīng)的rp疾病模型。外包動物模型構(gòu)建

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