所述高原光照環(huán)境模擬裝置15包括可見暖光系統(tǒng)和照明亮度無極控制系統(tǒng)，所述可見暖光系統(tǒng)設(shè)置飼養(yǎng)倉2頂部。本實(shí)施例的工作原理:本系統(tǒng)集成了可見暖光系統(tǒng)(可模擬高原紅外線和紫外線)與照明亮度無極控制系統(tǒng)，需要燈光時(shí)，可通過燈光系統(tǒng)開啟紫外燈以及照明燈，并可根據(jù)所需實(shí)現(xiàn)亮度調(diào)節(jié)，通過日光燈加紫外線燈來實(shí)現(xiàn)高原高紫外線光照環(huán)境。實(shí)施例5在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)，所述高原溫度環(huán)境模擬裝置16包括降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)和溫度采集顯示系統(tǒng)。本實(shí)施例的工作原理：本系統(tǒng)配置降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)與溫度采集顯示系統(tǒng)使系統(tǒng)內(nèi)溫度可無極調(diào)控，以保障海拔(3000m～7000m)高原溫度環(huán)境進(jìn)行模擬，溫度調(diào)節(jié)通過冷暖風(fēng)機(jī)來實(shí)現(xiàn)，就是和空調(diào)一樣的原理。實(shí)施例6在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)，所述高原濕度環(huán)境模擬裝置17包括加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)和濕度采集顯示系統(tǒng)。本實(shí)施例的工作原理：本系統(tǒng)配置加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)與濕度采集顯示系統(tǒng)使系統(tǒng)內(nèi)濕度可無極調(diào)控，以保障海拔(3000m～7000m)高原濕度環(huán)境進(jìn)行模擬。小鼠腎纖維化（UUO）模型建立。西藏C57動(dòng)物模型服務(wù)

指明方向。盡管現(xiàn)在基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組等組學(xué)已經(jīng)取得了非凡的突破，但人類對于組學(xué)的整體性和復(fù)雜性認(rèn)識(shí)還是很初級(jí)，也就比開始高明那么一點(diǎn)點(diǎn)，對橫亙在組學(xué)和個(gè)體之間的裂隙毫無辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一：由于目前還不存在什么生物根本性原理，很多研究還是得靠盲人摸象式的實(shí)驗(yàn)、觀察和歸納。當(dāng)年山中伸彌找到誘導(dǎo)分化細(xì)胞核重編程（也就是IPSc技術(shù)）的四個(gè)基因，可不是用理論算出來的，是大海撈針般地從成百上千個(gè)轉(zhuǎn)錄因子基因組合中篩選出來的。盡管以前的研究能有所幫助，但本質(zhì)還是差別不大，這也是為什么分子生物學(xué)科研常常被類比成民工搬磚。明白了這個(gè)背景，你大概就能理解小鼠的意義。既然我們對復(fù)雜系統(tǒng)的架構(gòu)原理毫無辦法，那我們不妨就建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)模型，自上而下地研究問題。誠然，動(dòng)物模型和人類差別巨大，小鼠、大鼠、兔、猴身上做的好好的實(shí)驗(yàn)，放在人身上就不靈了（有時(shí)候，即使是針對某一個(gè)人群成功的實(shí)驗(yàn)，換一個(gè)人群就不靈了，人類內(nèi)部的多樣性都不容小覷）。但是，同在哺乳動(dòng)物大家庭，大家的系統(tǒng)架構(gòu)應(yīng)該是差不多的，差別只在細(xì)節(jié)，問題已經(jīng)從大海撈針變成了池塘撈針。為什么藥物會(huì)失效呢？如果是靶點(diǎn)有差異。江蘇哪里有動(dòng)物模型心力衰竭(heart failure)簡稱心衰,是指由于心臟的收縮功能和(或)舒張功能發(fā)生障礙。

40mmnaoh，)，并在金屬浴100℃加熱1h；(3)取出離心管，冷卻至室溫后，加入100μl的中和液(40mmtris-hcl，)，10000g離心2min后，取上清用于小鼠基因型鑒定。(3)pcr擴(kuò)增：按照如系配置pcr反應(yīng)體系2×taqmix：10μl尾巴組織裂解液：2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward)：1μl(濃度：10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse)：1μl(濃度：10mm)ddh2o：6μl。引物序列如下：gm20541-loxp-forward序列：5’-attccccttcaagatagctac-3’；gm20541-loxp-reverse序列：5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’；six3-cre-forward序列：5’-gccgccgggatcactctcg-3’；six3-cre-reverse序列：5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。擴(kuò)增程序：pcr反應(yīng)體系配制完后，在pcr儀上于95℃預(yù)加熱5分鐘使模板dna充分變性，然后進(jìn)入擴(kuò)增循環(huán)。在每一個(gè)循環(huán)中，先于95℃保持30秒鐘使模板變性，然后將溫度降到復(fù)性溫度58℃，保持30秒，使引物與模板充分退火；在72℃保持30秒，使引物在模板上延伸，合成dna，完成一個(gè)循環(huán)。重復(fù)這樣的循環(huán)25次，使擴(kuò)增的dn段大量累積。，在72℃保持5分鐘，使產(chǎn)物延伸完整，4℃保存。(4)凝膠電泳稱取1g瓊脂糖放于100mltaebuffer中。

擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中a2,3,6,9,10,b1為陽性。擴(kuò)增3’端長臂使用引物：neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’；gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’結(jié)果見圖3中b，擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。5將步驟4得到的雜合子小鼠動(dòng)物與轉(zhuǎn)基因鼠flper鼠交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠；6將步驟5得到的gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠相互交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除純合子小鼠；7將步驟6得到的gm20541基因條件性敲除純合子動(dòng)物與轉(zhuǎn)six3-cre基因動(dòng)物交配，得到視網(wǎng)膜前體細(xì)胞gm20541基因敲除小鼠。轉(zhuǎn)基因鼠flper鼠購自美國捷克森實(shí)驗(yàn)室(品系名稱：(rosa)26sortm1(flp1)dym/rainj)。six3-cre轉(zhuǎn)基因小鼠(mgi：3574771)由美國德克薩斯大學(xué)安德森中心贈(zèng)送。six3是一個(gè)前腦腹側(cè)和視網(wǎng)膜前體細(xì)胞的標(biāo)志性轉(zhuǎn)錄因子，其特異性驅(qū)動(dòng)cre基因在視網(wǎng)膜前體細(xì)胞表達(dá)，cre蛋白可以進(jìn)入細(xì)胞核，識(shí)別基因組上loxp位點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)基因敲除。基因敲除小鼠鑒定步驟：對上述視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因的小鼠的基因型鑒定，操作如下：(1)剪小鼠尾梢少許組織樣本，置于干凈的；(2)在離心管中加入100μl裂解液。通過截?cái)啻笫竺娌可窠?jīng)致面癱模型的建立。

準(zhǔn)備碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分鐘，然后轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)膜液中平衡3分鐘后備用。2、轉(zhuǎn)膜組裝轉(zhuǎn)膜三明治夾，這一步很關(guān)鍵，重要的是膠和膜之間不能有氣泡且膜與膠要保證貼合緊密(否則會(huì)翻車)，可以加多點(diǎn)轉(zhuǎn)膜液泡著。組裝好后加滿轉(zhuǎn)膜液，設(shè)置電源參數(shù)，我習(xí)慣恒流轉(zhuǎn)膜，200-280毫安，1-2小時(shí)，根據(jù)分子量定，如50KD的分子用60分鐘就夠了。如果一個(gè)電源帶兩個(gè)轉(zhuǎn)膜大槽即四塊膠，我就會(huì)用恒壓70-110V。這個(gè)過程重要的是做好降溫。這里簡單說一下蛋白分子量與玻璃板厚度，分離膠的濃度，轉(zhuǎn)膜電源參數(shù)的選擇問題。如果是能用1毫米的玻璃板就不用，因?yàn)檗D(zhuǎn)膜是在電場的作用下蛋白分子從膠上遷移到膜上，1毫米膠的蛋白遷移距離要比。選擇更薄的膠蛋白轉(zhuǎn)膜時(shí)間可以減少，從而減少發(fā)熱，以免膠變形，條帶也會(huì)更好看。然后是分離膠的濃度，如果是150—200KD的分子選10%以下的的分離膠，200—300KD的選8%的,300KD以上的選6%的，小于30KD的200mA30分鐘，30-100KD的按分子量的數(shù)值算，如70KD，250mA70分鐘;100-150KD的250mA100分鐘;150—300KD的分子轉(zhuǎn)膜條件用280毫安(以上均是對于，)，120分鐘足矣，前提是膠的濃度相適應(yīng)。五、封閉孵一抗1、封閉轉(zhuǎn)膜結(jié)束后。好的動(dòng)物模型能夠較好地模擬疾病狀態(tài)，為的研究提供可能。西藏大鼠動(dòng)物模型培養(yǎng)

IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發(fā)性腎小球疾病,約占原發(fā)性腎小球疾病的 1/3。西藏C57動(dòng)物模型服務(wù)

表明在gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外節(jié)變短退化。sixko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型小鼠；dapi(4,6-diamidino-2-phenylindole)：細(xì)胞核染料4,6-二脒基-2-苯基吲哚；rhodopsin：視紫紅質(zhì)抗體；merge：兩種顏色重疊。具體實(shí)施方式為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。實(shí)施例11采用rt-pcr方法檢測gm20541基因在不同組織的表達(dá)情況。方法：分別提取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾的總rna，然后用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。根據(jù)gm20541的cdna序列設(shè)計(jì)引物：gm20541-cdna-f：5’-tcggtctcatcttcattccc-3；gm20541-cdna-r：5’-ggaaggctctgttccggtat-3。以提取的cdna為模板，進(jìn)行rt-pcr。擴(kuò)增后進(jìn)行電泳，結(jié)果見圖1。結(jié)果見圖1中a和b，可以看出，通過rt-pcr方法檢測gm20541基因在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾中的表達(dá)。西藏C57動(dòng)物模型服務(wù)