e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖b波統計；scotopicamplitude：暗光測定峰值；flashintensity：閃光強度；a-wave：a波；b-wave：b波。圖6：光適應視網膜電圖(erg)檢測結果；圖中：a-b：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖軌跡圖；c：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖a波統計；e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖b波統計；f：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖統計。sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖7：視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網膜切片免疫組化染色結果；小鼠年齡：4個月；os：outer-segment(外節)；is：inner-segment(內節)；onl：outernuclearlayer(外核層)；inl：innernuclearlayer(內核層)；圖中：a：視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網膜石蠟切片的h&e染色結果，外核層及內核層均變薄；b：對不同部位的gm20541敲除鼠視網膜外核層厚度統計。圖8：視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠ihc染色結果。通過截斷大鼠面部神經致面癱模型的建立。云南外包動物模型造模

四氯化碳誘導急性肝損傷大鼠模型【方法】1、將大鼠隨機分配至2組中，每組5只，正常喂食喂水7d后進行試驗；2、大鼠體重為200g±10g，按組別給予藥物：生理鹽水組每只腹腔注射1ml生理鹽水、模型組每只按5ml/kg背部皮下注射四氯化碳3、各組藥物注射24h后取材進行相關檢測（注：注射前按比例混合四氯化碳：橄欖油=1：）【評定】給予四氯化碳后TP含量下降，ALT和AST含量上升【檢測】生理鹽水組肝索結構清晰，血管內無淤血，血管周圍無炎癥病灶，肝小葉結構清晰；給予四氯化碳后肝索排列紊亂，結構不清，存在大量壞死區域且肝索結構消失，有大小不一的空泡結構，多數血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質，血管周圍有炎癥反應灶，少量紅細胞滲出；西維來司鈉介入后肝索排列不清晰，存在部分壞死區域且肝索結構消失，有大小不一的空泡結構，少數血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質，血管周圍有炎癥反應灶，極少量紅細胞滲出。江蘇兔動物模型技術C57BL/6成年鼠肺部通過呼吸機過量通氣損傷模型的建立；

糖尿病足大鼠模型【目的】構建糖尿病足大鼠模型；【材料】1、材料：STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉；2、試劑配制：1）檸檬酸納緩沖液配制：A液十B液=1:，PH=；A液:檸檬酸mL；B液:朽檬酸三納2）STZ液配制:55mg/kg（避光，現配現用10min內注射)；3、糖尿病模型構建方法：1）大鼠術前禁食12h；2）按55ug/g注射.連續3天注射，對照組注射檸檬酸緩沖液，造模組注射STZ液，注射后不禁水、禁食2-4h；3）STZ注射結束5天后空腹測血糖，血糖值高于12mmol/L選入實驗組；【方法】方法一：細菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時，后足背側注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液，造成糖尿病肢端的動物模型；2、后續觀察傷口情況；方法二：皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術剪做一個圓形皮膚創口，直徑5mm；2、后續每日觀察傷口情況，作好記錄。

所用儀器為bio-rad的化學發光凝膠成像系統。結果見圖1中c和d，可以看出，通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物，對本發明提供的視網膜色素變性疾病模型的構建方法進行說明，gm20541基因敲除的路線如圖2所示，具體操作如下：基因敲除小鼠獲取步驟：1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列loxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子；2利用dna同源重組技術將gm20541基因中的第3個外顯子替換，得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細胞；3利用步驟2得到的胚胎干細胞制備得到含gm20541基因敲除細胞的嵌合體小鼠(圖2)；4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育，在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定：實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結果，擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r，擴增產物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’；sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結果見圖3中a。大鼠面癱模型的建立。

擴增產物為。其中a2,3,6,9,10,b1為陽性。擴增3’端長臂使用引物：neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’；gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’結果見圖3中b，擴增產物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。5將步驟4得到的雜合子小鼠動物與轉基因鼠flper鼠交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠；6將步驟5得到的gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠相互交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除純合子小鼠；7將步驟6得到的gm20541基因條件性敲除純合子動物與轉six3-cre基因動物交配，得到視網膜前體細胞gm20541基因敲除小鼠。轉基因鼠flper鼠購自美國捷克森實驗室(品系名稱：(rosa)26sortm1(flp1)dym/rainj)。six3-cre轉基因小鼠(mgi：3574771)由美國德克薩斯大學安德森中心贈送。six3是一個前腦腹側和視網膜前體細胞的標志性轉錄因子，其特異性驅動cre基因在視網膜前體細胞表達，cre蛋白可以進入細胞核，識別基因組上loxp位點，實現基因敲除。基因敲除小鼠鑒定步驟：對上述視網膜前體細胞敲除gm20541基因的小鼠的基因型鑒定，操作如下：(1)剪小鼠尾梢少許組織樣本，置于干凈的；(2)在離心管中加入100μl裂解液。由于大鼠面神經與人類相似,易于暴露.因此通過大鼠面神經損傷致癱的模型制作方法為研究者提供更多的思路。上海外包動物模型實驗

LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。云南外包動物模型造模

伴vonFreyhairs檢測）熱板法大/小鼠甩尾法大/小鼠熱輻射致痛法大/小鼠壓痛法大/小鼠VonFreyhairs法大/小鼠醋酸扭體法小鼠福爾馬林致痛法大/小鼠佐劑CFA引起的疼痛大/小鼠角叉菜膠致痛模型大/小鼠LPS誘導痛模型大/小鼠脊神經選擇性結扎（L5/L6）大/小鼠坐骨神經分枝選擇性損傷模型（SNI）大/小鼠糖尿病疼痛、切口疼痛，性疼痛模型大/小鼠抗癡呆小鼠獲得性記憶障礙模型（6道小鼠跳臺視屏分析系統）小鼠小鼠記憶鞏固不良模型（6道小鼠跳臺視屏分析系統）小鼠小鼠記憶再現障礙模型（6道小鼠避暗視屏分析系統）小鼠小鼠明暗箱法（4道小鼠明暗箱視屏分析系統）小鼠大鼠獲得性記憶障礙模型（Morris水迷宮視屏分析系統）大鼠小鼠腦內乙酰膽堿酯酶活力測定小鼠D-半乳糖致小鼠癡呆模型小鼠新物體識別實驗大鼠APP/PS1雙轉基因小鼠模型（Morriswatermaze,CognitionWall）轉基因小鼠體外實驗細胞水平。云南外包動物模型造模