常見的有組織病理染色、WesternBlot、PCR等），實驗儀器是否需要預約使用。如果需要外送生物公司檢測，需要提前聯系好商家，以及了解清楚樣本如何獲取，如何運輸。飼養動物及干預動物購買后需要將時間節點提前規劃好，比如，周需要做什么？測量體重？觀察飲食？測量需要的指標？中間有無特殊操作？比如灌胃、測量體重、做CT檢測、取血？……第幾周取材？取材需要哪些組織？預實驗方案就要提前設計清楚以上內容。取材及樣品準備取材需要提前到動物房禁食、稱體重、取出動物、手術器械的消毒、組織固定所需要的試劑和EP管，WesternBlot和PCR所需要的樣本儲存條件。比如凍存管、EP管，是否需要冰塊？是否需要液氮？取材當天需要多少人？是否需要請人幫忙？如果所需要取出的樣本較多，建議大家請人一起幫忙，流水線作業，這樣能節省時間，并且能保證樣品的質量。如果請人，每個人需要負責哪一板塊的工作，比如誰負責麻醉，誰負責取血液，誰負責取，誰負責拍照、誰負責儲存，都需要提前規劃交代清楚。實驗指標檢測如果是需要自己做的檢測，比如常見的WesternBlot、PCR，建議提前可以看看教程（無論是視頻還是貼吧，都要自己多方參考）。有了一定的理論基礎后。面神經受損而致面部表情肌群的運動功能障礙,對患者的心理和日常生活造成很大的影響。湖北乳鼠動物模型飼養

然后再入固定液，但要注意防止組織損傷。要熟悉采集部位。要能準確的按解剖部位采集，如胰腺，一般取胰島較多的胰腺尾部；肺應取有細支氣管及帶有軟骨片的小支氣管部。如果實驗需進行多組織樣本的采集，采集順序應按照：消化，神經系統，皮膚，肌肉等的順序進行。選好組織塊的切面。熟悉某些組織成分安排，然后決定其切面的走向；如一長管狀以橫切面較好。切除不需要的部分。特別是組織周圍的脂肪等，應盡可能掉，否則給固定、脫水、浸蠟、切片等帶來一些不必要的問題。組織樣品的固定（1）固定的方法：①小塊組織固定法：從動物取下的小塊組織，立即置入液態固定劑（這是應用經常的方法）。②注射/灌注固定法：某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內部或需要對整個臟器或整個動物進行固定，這時宜采用注射固定法，將固定液注入血管，經血管分支到達整個組織和全身，從而得到充分的固定。另，空腔組織比如肺，肺內含有空氣，固定液難以滲入，建議先做肺灌注，使得肺充盈滿固定液以后再進行保存，如果空腔中氣體沒有有效排出，后續可能影響固定效果（沒有灌注的肺組織會浮在液體表面不利于固定，切片以后也會看到很多的空泡）。③蒸汽固定法：比較細小而薄的標本。上海高脂高糖動物模型實驗小鼠CLP盲腸穿孔致膿毒血癥模型。

我們知道WB實驗步驟繁瑣，一次實驗歷時也不短，從提蛋白到顯影結束可能要三天，我們就講一下這里面的一些關鍵環節。一、蛋白提取及變性1、提取蛋白很多經驗豐富的WB實驗者都深有體會，蛋白提取是影響結果重要的環節之一。該過程重要的是防降解和保證蛋白濃度不要太低。防降解主要有兩點，一是裂解前注意保持樣品處于低溫環境中，二是裂解時加入足夠的蛋白酶抑制劑。我們習慣先用冰冷的PBS做心臟的體循環灌注，然后冰上取腦，分離各腦區(嗅球，皮層，海馬，中腦，小腦，延髓，丘腦，紋狀體)后置于，用液氮速凍后轉移至-80度冰箱長期保存。接著是保證蛋白濃度，即要加入適量的裂解液，加太少會使蛋白提取不充分，加太多會讓蛋白濃度太低，一般經驗是這樣的，細胞樣品例如一個六孔板的細胞加60微升的裂解液，動物組織的話每毫克組織加10微升裂解液。還要加上超聲破碎處理，具體方案見討論部分。如果沒有超聲破碎儀，那就用1毫升注射器不斷抽吸，冰上反復抽吸1分鐘左右，注意不要產生過多氣泡。(需要灌注取材的視頻可以私聊獲取，由于文件過大，又比較血腥，不宜直接放到文章里。)2、蛋白變性加入上樣緩沖液后100攝氏度煮10分鐘，這里的上樣緩沖液有兩種可選。

導師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄，只要是和實驗相關的，無論是照片，還是文字，必須要及時事無巨細地詳細記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面，然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規劃首先，個人是不贊同每天24小時泡在實驗室的，高效率是關鍵。建議提前一天規劃好第二天需要做的事情，按照代辦事項的格式逐條列出，哪一個時間段需要做什么事情？這樣的好處有兩點，一個是自己提前把時間預約好，可以留出足夠的時間休息和娛樂；另一個是在執行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感，辦事起來往往更高效且不會遺漏?？傊?，預實驗就是迷你版正式實驗，希望小伙伴們在進行預實驗的時候一定要盡可能地準備周全，這樣才能快的推進正式實驗。博來霉素誘導急性肺損傷小鼠模型。

brain：腦組織；liver：肝臟；retina：視網膜，intestine：腸；muscle：肌肉；heart：心臟；kidney：腎臟；spleen：脾；b：圖1中a的統計結果；c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達；d:圖1中c的統計結果。圖2：gm20541基因敲除小鼠的構建路線；圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖3：中長距離pcr鑒定子一代鼠的結果；圖中：a：擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產物為；其中a2,3,6,9,10,b1為陽性；b：擴增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr，擴增產物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。圖4：gm20541基因敲除小鼠的鑒定；a：gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結果；b：實時定量pcr實驗分析gm20541敲除小鼠視網膜中基因敲除效率，證明gm20541在敲除小鼠視網膜中不再表達；sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖5：暗適應視網膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結果；圖中：a-c：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖a波統計。通過博來霉素誘導的肺炎樣癥狀及肺纖維化癥狀模型為研究ALL的有效措施提供理想的動物模型。西藏高脂高糖動物模型手術

因此，外科結扎膽總管并使膽總管完全阻塞已成為引起嚙齒動物梗阻性膽汁淤積性損傷的常用模型。湖北乳鼠動物模型飼養

應根據所檢測指標的要求，需采取不同策略處理。在如今分子生物學當道的現實背景下，動物實驗除了對實驗動物的體征及生理指標進行的監控外，各種分子檢測甚至是組學檢測也開始大行其道，動物實驗結束之后的機制研究成為了實驗的重頭戲。一般來說，動物實驗檢測對象主要包括：（1）體液中各類因子定性及定量檢測由于此類檢測對象多為蛋白及各類小分子物質，因此在取樣過程中應注意防止此類物質降解，在獲取后，應及時置于溫（≤-80℃）進行保存，在后續實驗過程中，也應當注意保存條件的穩定性，避免反復凍融。常用的方法便是酶聯免疫吸附測定（ELISA），除此之外，可利用生化分析儀及不同檢測方法的試劑盒（比色法、比濁法等）方法對各類生化指標及因子進行定性及定量檢測。（2）組織病理、生理變化及免疫組化檢測常用的病理檢測多使用H&E染色對細胞質及細胞核進行染色標記，以觀察細胞變化。除此之外，許多特殊染色也在病理生理變化中得到了應用，如利用Masson染色檢測組織纖維化病變，Nissl染色檢測神經元損傷，β-半乳糖甘酶染色檢測細胞衰老等。此外，還可以通過免疫組化技術對某些特異性標記物進行免疫顯色檢測，達到原位定性或定量檢測的目的。。湖北乳鼠動物模型飼養