但是人為調節更能直接的根據所需模擬出實驗環境,相對于自動控制的環境模擬能有效減少意外情況的發生。2、本系統設置的多個代謝籠可以同時培養多種動物,造模動物多。3、本實用新型的系統能夠很好地模擬高原壓力、溫度、濕度以及低氧環境,還具有動物行為學遠程觀察功能,保障了實驗過程中實時監控與實驗結束后操作過程的溯源。附圖說明為了更清楚地說明本實用新型實施例的技術方案,下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹,應當理解,以下附圖示出了本實用新型的某些實施例,因此不應被看作是對范圍的限定,對于本領域普通技術人員來講,在不付出創造性勞動的前提下,還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。圖1為本實用新型一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統的主視圖;圖2為本實用新型一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統的立體結構示意圖;圖3為代謝籠的立體結構示意圖;圖中標記:1-功能設備集成底座,2-飼養倉,3-代謝籠,4-觀察窗,5-操作窗,6-小物件傳遞窗,7-大物件傳遞窗,8-投料斗,9-飲水瓶,10-聚糞斗,11-尿液排出口,12-糞便排出口,13-進風系統,14-排風系統,15-高原光照環境模擬裝置,16-高原溫度環境模擬裝置。急性肺損傷(acute lung injury,ALI)。云南豚鼠動物模型建模

技術實現要素:本發明的目的在于提供利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用,采用該構建方法可以得到視網膜色素變性疾病模型,該模型可表現出視網膜色素變性性疾病特征,該模型可用于視網膜色素變性性疾病的研究,可以幫助闡明rp的發病過程及機制,并為該疾病的或預防提供新的靶標。本發明是這樣實現的:方面,本發明實施例提供了一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法,其包括:敲除目標動物視網膜前體細胞中的基因組中的gm20541基因。znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結構域的轉錄因子,對基因調控起重要的作用。znf124蛋白可穿過核孔進入核內,作為轉錄因子調控其他基因的表達。目前針對znf124蛋白功能的研究報道并不多,對其功能也知之甚少,znf124與一種先天性系統發育疾病dandy-walker復合征(dandy-walkercomplex,dwc)相關。此外,znf124被認為參與了前體生長因子(vegf)對人造血細胞凋亡的抑制作用,表明znf124在人體生命活動中承擔有重要功能。發明人的另一研究表明,znf124基因突變與rp有關,對探索rp的致病機制有極大幫助。因此,深入研究znf124對視網膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。湖北小鼠動物模型培養大腦中動脈(MCA)為臨床上發生腦缺血損傷常見的部位之一。

痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動物】SPF級SD大鼠,雄性,周齡6~8W,體重:200~250g【方法】1、大鼠麻醉,顱頂脫毛備皮;2、大鼠腦定位儀固定大鼠,顱頂正中切口,長度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫;3、縫線將皮膚左右分開固定,前囟后10mm、矢狀縫左側;4、微量注射器移至開孔處修正骨孔,注射器垂直向顱內插入,緩慢注射無水乙醇15ul,注射完移除注射器,棉球壓迫止血;5、縫合創口后維持25°體溫,等待蘇醒,觀察大鼠狀態。【觀察】術后3天模型大鼠攝食減少、右側肢體跛行、右前肢不負重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯,順時針繞圈前行,2周后癥狀減輕,大鼠于術后4周開始給予動物行為學觀察【檢測】HE檢測對比觀察腦組織是否出現細胞水腫,排列不規則,結構紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質軟化灶和空囊形成,小膠質細胞浸潤,星形膠質細胞肥大、增生等病理表現。曠場測試(OpenFieldTest):實驗用于評估大小鼠的活動性和探索性行為。動物被放置在一個較大的開放性場地內,然后記錄它們的運動軌跡和停留時間。用來評估動物的活動性、焦慮程度、壓力反應等。水迷宮測試。
40mmnaoh,),并在金屬浴100℃加熱1h;(3)取出離心管,冷卻至室溫后,加入100μl的中和液(40mmtris-hcl,),10000g離心2min后,取上清用于小鼠基因型鑒定。(3)pcr擴增:按照如系配置pcr反應體系2×taqmix:10μl尾巴組織裂解液:2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward):1μl(濃度:10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse):1μl(濃度:10mm)ddh2o:6μl。引物序列如下:gm20541-loxp-forward序列:5’-attccccttcaagatagctac-3’;gm20541-loxp-reverse序列:5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’;six3-cre-forward序列:5’-gccgccgggatcactctcg-3’;six3-cre-reverse序列:5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。擴增程序:pcr反應體系配制完后,在pcr儀上于95℃預加熱5分鐘使模板dna充分變性,然后進入擴增循環。在每一個循環中,先于95℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復性溫度58℃,保持30秒,使引物與模板充分退火;在72℃保持30秒,使引物在模板上延伸,合成dna,完成一個循環。重復這樣的循環25次,使擴增的dn段大量累積。,在72℃保持5分鐘,使產物延伸完整,4℃保存。(4)凝膠電泳稱取1g瓊脂糖放于100mltaebuffer中。肺泡上皮細胞及內皮損傷,造成彌漫性肺間質及肺泡水腫,導致的急性低氧性呼吸功能不全。

可用鋨酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或細胞涂片以及某些薄膜組織的固定。(2)固定的目的①保持其原有狀態:使細胞內的蛋白質、脂肪、糖、酶等成分轉變為不溶性物質,迅速防止組織、細胞的死后變化,防止自溶與,防止細胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態結構,使之盡量保持生前的狀態和結構。②以便染色后易于鑒別和觀察:不同組織成分對染料有不同的親和力,以便染色后易于鑒別和觀察。③使組織塊硬化,便于制作薄片(組織塊在脫水、包埋、切片、染色等過程中不易損壞)。(3)固定液固定液種類:一類是單純固定液,即只有一種試劑;另一類是混合固定液,由兩種或兩種以上試劑組成。作為較好的固定液,應有下列特性,首先,有強滲透力,能迅速的滲入組織內部;其次,不使組織過度收縮或膨脹,并能使組織內欲觀察的成分得以凝固為不溶性物質;,能使組織達到一定的硬度并獲得較佳的折光率和對某些染料具有較強的親和力。固定液通常使用10%的甲醛溶液。特殊要求的組織,常需要特殊的固定液,取樣之前應做好準備。如眼球樣本應使用FAS眼球固定液,脂肪組織應使用脂肪組織固定液等。此外,在進行骨組織樣本制備的時候,還應注意提前進行脫鈣處理。通過阿霉素(Adriamycin,ADR)腹腔注射給藥(Adriamycin,ADR)試圖造成小鼠心衰。北京實驗動物模型培養
小鼠腎纖維化(UUO)模型建立。云南豚鼠動物模型建模
疾病神經系統疾病模型動物抗抑郁對腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用(樣品篩選、IC50測定)大鼠強迫游泳試驗(大/小鼠,Noduls軟件、視屏分析)大/小鼠小鼠懸尾試驗(Noduls軟件、視屏分析)小鼠5-羥色胺增強試驗小鼠利血平誘導眼瞼下垂試驗小鼠育亨賓毒性增強試驗小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預見性刺激(CUMS)模型大鼠新環境進食抑制實驗大/小鼠小鼠腦內單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測定小鼠對新生大鼠海馬神經細胞的保護作用(谷氨酸損傷、過氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等)新生大鼠對SH-SY5Y細胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細胞抗驚厥育亨賓毒性增強試驗小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協同作用小鼠對巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗小鼠曠場實驗(大/小鼠,全程攝像監控、軟件處理)大/小鼠大鼠高架十字迷宮法(全程攝像監控、軟件處理)大鼠大鼠穿梭箱法(全程攝像監控、軟件處理)大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型(雙側損毀PD模型)大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛。云南豚鼠動物模型建模