收藏查看我的收藏0有用+1已投票0細胞培養編輯鎖定本詞條由“科普中國”科學百科詞條編寫與應用工作項目審核。細胞培養(cellculture)是指在體外模擬體內環境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養都是一個必不可少的過程,細胞培養本身就是細胞的大規??寺?。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術必不可少的環節,而且細胞培養本身就是細胞的克隆。細胞培養技術是細胞生物學研究方法中重要和常用技術,通過細胞培養既可以獲得大量細胞,又可以借此研究細胞的信號轉導、細胞的合成代謝、細胞的生長增殖等。[1]中文名細胞培養外文名cellculture別名細胞克隆術語細胞培養技術地位生物技術中基礎的技術常用培養基無鈣、鎂、離子溶液目錄1分類2環境及條件?環境因素?營養條件3設施器材4一般過程5具體步驟6注意事項細胞培養分類編輯動物細胞培養高速冷凍離心機在所有的細胞離體培養中,困難的是動物細胞培養。人臍靜脈內皮細胞分離自臍帶靜脈,一般用于生理學和藥理學研究。江蘇組織原代細胞購買

[1]細胞培養營養條件1.培養基細胞培養基包含細胞生長所需的各種營養物質,包括碳水化合物、氨基酸、無機鹽、維生素等。針對不同細胞的營養需求,有多種合成培養基可供選擇,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。2.其他添加成分在各種合成培養基提供基礎營養物質之外,還需根據不同細胞和不同的培養目的添加其他成分,如血清、因子等。血清提供的是細胞外基質、生長因子和轉鐵蛋白等重要物質,常用的是胎牛血清。要根據不同的細胞和不同的研究目的決定添加血清的比例。10%~20%的血清能維持細胞較快的生長增殖速度,稱為生長培養液;為維持細胞緩慢生長或不死,添加2%~5%的血清即可,稱為維持培養液。但血清中也存在有害于細胞生長和繁殖的物質,如補體、免疫球蛋白和一些生長抑制因子;成分不明確,影響對結果的分析;不同動物、不同批次的血清活性差別較大,影響培養效果的穩定性。谷氨酰胺是細胞生長重要的氮源,在細胞生長代謝過程中起重要作用,但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩定容易降解,4℃下放置7天即可分解約50%,故谷氨酰胺需在使用前添加。為防止污染,培養基中還需添加一定量的常用名稱、濃度及敏感性如下表。湖南原代細胞實驗臍帶是哺乳類連接胎兒和胎盤的管狀結構。

一號培養板200頂部設置有梯形卡槽210,梯形卡槽210前側壁固定安裝有固定螺絲220,一號培養板200粘接在底座100的頂部,一號培養板200的頂部開有梯形卡槽210,梯形卡槽210前側壁螺接有固定螺絲220,一號培養板200用于承載培養皿槽400和梯形卡槽210,梯形卡槽210用于配合梯形卡塊310連接二號培養板300,固定螺絲220用于固定二號培養板300;請再次參閱圖1,一號培養板200頂部設置有二號培養板300,二號培養板300底部固定安裝有與梯形卡槽210相配合的梯形卡塊310,二號培養板300底部粘接有梯形卡塊310,二號培養板300通過梯形卡塊310與一號培養板200卡接,二號培養板300用于承載培養皿槽400和梯形卡塊310,梯形卡塊310用于配合梯形卡槽210固定二號培養板300;請再次參閱圖1,一號培養板200和所述二號培養板300表面設置有培養皿槽400,培養皿槽400內腔側壁設置有限位槽410,限位槽410內腔固定安裝有限位彈簧420,限位彈簧420頂部貫穿限位槽410設置有固定桿430,具體的,一號培養板200和所述二號培養板300表面開有培養皿槽400,培養皿槽400內腔側壁開有限位槽410,限位槽410內腔螺接有限位彈簧420,限位彈簧420頂部貫穿限位槽410粘接有固定桿430,培養皿槽400用于承載限位槽410。
原代細胞是指在機體或組織中直接從生物體分離出來的、未經傳代培養的細胞。這種細胞保持著其原始的生物學特性,具有高度的活性和分裂能力。原代細胞在許多生物醫學研究中具有重要地位,包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發等。原代細胞的獲得通常是通過組織剪切、消化或酶解等方式從機體或組織中分離出來。這些細胞脫離了它們在生物體中的環境,但是仍然保持著其基本的生物學特性,包括細胞膜、細胞核、細胞器以及其他重要的生物分子。原代細胞在未經過傳代培養的情況下,保持著其原始的生物學特性,因此,它們常常被用于藥物篩選、毒理學研究等。同時,由于原代細胞具有高度活性和分裂能力,它們也被用于組織工程和再生醫學中,如皮膚移植、骨頭修復和神經再生等。此外,原代細胞模型在疾病研究中也扮演著重要角色。由于原代細胞具有更高的生物真實性,使用它們建立的疾病模型能夠更準確地模擬疾病的發展過程和藥物的作用機制,從而為新藥研發和疾病治、療提供更有效的工具??傊?,原代細胞是一種具有高度活性和分裂能力的細胞,在生物醫學研究中具有重要的作用。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

充分去除組織表面的血漬和其它異物。2、將組織轉入另一無菌的培養皿,切去多余組織如脂肪或壞死組織,用無菌刀將組織切成1mm3小塊。3、用無菌彎頭鑷將組織塊轉入50ml的無菌離心管中,讓組織塊沉淀,吸去多余液體,加入10mlbuffera,充分混勻,300g離心5分鐘,棄上清,如此重復操作3次。4、用10mlbufferb重懸組織塊,將組織塊懸液轉移至25cm2無菌培養瓶中,放置co2培養箱中,37℃培養24小時。5用強力吹打使組織分散,將懸液移入15ml無菌離心管,500g離心5分鐘,棄上清。6、取10mlbufferc懸浮組織塊,置于37℃水浴中30分鐘,每10分鐘搖動一次,讓組織塊沉淀。7、取上清放入50ml離心管中,加入1mlbufferd,終止反應。8、重復步驟6、7兩次。9、將吸出全部上清進行離心,500g離心5分鐘,棄上清。10、取2mlbuffere懸浮細胞,用血球計數板或電子記數儀計數細胞,并檢測細胞活性。11、懸浮細胞用相應的原代細胞培養基稀釋,使每毫升培養基中含有1×106個細胞,接種培養瓶中,大約每平方厘米2×105個細胞。12、每隔2-4天更換一次培養基(以ph變化為標準),觀察細胞生長情況。獲取更多公司信息及技術文章請關注我們的微信公眾號原代細胞。使得體外培養的臍靜脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。上海豚鼠原代細胞
多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長。江蘇組織原代細胞購買
原代細胞培養之分離注意事項1、組織塊培養法1)組織塊接種后,在觀察和移動的過程中,注意不要引起液體的振蕩。要避免經常翻動和振動,否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。2)加入的培養液不宜過多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。3)當細胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞,它們產生的有毒物質會影響原代細胞的生長。4)為促進組織塊盡快粘貼在培養瓶皿上,可以在種植前先將膠原薄層涂在培養瓶底壁上。2、貼壁型原代細胞1)原代培養的分離細胞在初次接觸體外環境時,它們之間會互相影響,在這些細胞之間能產生一些促生長的活性物質,使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低,細胞之間的促生長作用很小,也很難使細胞適應從體內的組織環境到被分散后進入生存環境的變化過程。如果接種的細胞密度過大,會導致營養物質供應不足,代謝廢物積累較快需要經常換液和傳代。2)適當增大原代培養接種的細胞密度,給培養的細胞提供更多的類似于在體內時細胞之間的相互作用,會極大提高原代培養的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環境后進行傳代培養時再以較低的密度接種和培養。3)盡快使接種的細胞貼壁。江蘇組織原代細胞購買