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江蘇動物模型技術(shù)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-10-04

brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網(wǎng)膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統(tǒng)計(jì)結(jié)果;c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達(dá);d:圖1中c的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果;圖中:a:擴(kuò)增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽性;b:擴(kuò)增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr,擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果;b:實(shí)時(shí)定量pcr實(shí)驗(yàn)分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達(dá);sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結(jié)果;圖中:a-c:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計(jì)。鹽酸阿霉素誘導(dǎo)心衰小鼠模型。江蘇動物模型技術(shù)

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然后5%的nds。含有%triton)封閉通透2h,孵育一抗,4℃過夜。第二天,pbs清洗三次后,孵育相應(yīng)的熒光二抗,然后再用pbs清洗三次,封片,觀察。結(jié)果見圖8,在小鼠4月齡時(shí),通過視網(wǎng)膜冰凍組織切片染色外節(jié)抗體rhodopsin以及內(nèi)節(jié)抗體nak-atpase后發(fā)現(xiàn),相較于野生型小鼠,gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網(wǎng)膜外節(jié)明顯縮短,表現(xiàn)出了明顯退化表征。綜上,可以看出,本發(fā)明實(shí)施例以小鼠為例,通過cre-loxp基因敲除技術(shù),在小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中特異性敲除gm20541基因,小鼠表現(xiàn)出了視力受損,視細(xì)胞外節(jié)變短退化以及視細(xì)胞丟失等視網(wǎng)膜色素變性疾病典型表征。由此充分說明,在視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因,可以使目標(biāo)動物表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性疾病。視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因的動物,可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型。該疾病模型可以用于視網(wǎng)膜色素變性疾病研究等領(lǐng)域中,為該疾病的研究例如發(fā)病過程、機(jī)制以及相關(guān)藥物的篩選提供一種新的模型。雖然本發(fā)明實(shí)施例展示了在小鼠的視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因后的表型,但本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解到,小鼠作為哺乳動物的代表性動物,在其他的哺乳類動物中敲除gm20541基因或其同源基因也應(yīng)當(dāng)具有相似的表型。上海兔動物模型可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發(fā)病率低的缺點(diǎn)。

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脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計(jì)算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據(jù)小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時(shí)損傷腸道。進(jìn)針的動作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準(zhǔn)備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進(jìn)針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉(zhuǎn)針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。【檢測】肝組織有無:1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細(xì)胞浸潤;4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無該項(xiàng)病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動物的各項(xiàng)病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。

中風(fēng)模型)股動脈內(nèi)皮損傷模型頸動脈結(jié)扎或部分結(jié)扎術(shù)深靜脈血栓模型下肢缺血模型門腔靜脈分流術(shù)左、右心血流動力學(xué)測試左心系統(tǒng)測壓右心系統(tǒng)測壓腹部手術(shù)膽管結(jié)扎術(shù)胃大部切除術(shù)小腸部分切除術(shù)急性腎衰模型單側(cè)腎切除術(shù)3/4腎切除術(shù)5/6腎切除術(shù)脾切除術(shù)腎上腺切除術(shù)腎上腺髓質(zhì)摘除術(shù)骨關(guān)節(jié)炎模型脾神經(jīng)切除術(shù)肝臟迷走神經(jīng)切斷術(shù)胃迷走神經(jīng)切斷術(shù)膈下迷走神經(jīng)切斷術(shù)去勢術(shù)輸精管結(jié)扎術(shù)卵巢切除術(shù)單側(cè)或雙側(cè)輸卵管結(jié)扎術(shù)子宮切除術(shù)輸尿管結(jié)扎術(shù)神經(jīng)系統(tǒng)手術(shù)單側(cè)腦內(nèi)定位插管雙側(cè)腦內(nèi)定位插管側(cè)腦室導(dǎo)管側(cè)腦室微量滲透泵導(dǎo)管第3腦室插管腓腸肌神經(jīng)切除術(shù)軟組織手術(shù)甲狀腺切除術(shù)甲狀旁腺切除術(shù)甲狀腺切除術(shù)伴甲狀旁腺再植入術(shù)胸腺切除術(shù)松果體切除術(shù)垂體切除術(shù)傳感器植入手術(shù)血壓遙測左心室壓遙測門靜脈壓遙測血壓與心電圖遙測血壓與腦電圖遙測胸內(nèi)壓遙測胸內(nèi)壓與心電圖遙測心電圖遙測腦電圖遙測肌電遙測心電圖與腦電圖遙測腦電圖與肌電遙測血糖遙測體溫與活動度遙測血管導(dǎo)管手術(shù)頸動脈導(dǎo)管顱內(nèi)給藥頸動脈導(dǎo)管腹主動脈導(dǎo)管股動脈導(dǎo)管股靜脈導(dǎo)管單側(cè)頸靜脈導(dǎo)管雙側(cè)頸靜脈導(dǎo)管門靜脈導(dǎo)管下腔靜脈導(dǎo)管非血管導(dǎo)管手術(shù)膽管導(dǎo)管胃導(dǎo)管十二指腸導(dǎo)管空腸導(dǎo)管回腸導(dǎo)管盲腸導(dǎo)管結(jié)腸導(dǎo)管膀。大鼠、小鼠動物疾病模型技術(shù)。

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疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型動物抗抑郁對腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用(樣品篩選、IC50測定)大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)(大/小鼠,Noduls軟件、視屏分析)大/小鼠小鼠懸尾試驗(yàn)(Noduls軟件、視屏分析)小鼠5-羥色胺增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠利血平誘導(dǎo)眼瞼下垂試驗(yàn)小鼠育亨賓毒性增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預(yù)見性刺激(CUMS)模型大鼠新環(huán)境進(jìn)食抑制實(shí)驗(yàn)大/小鼠小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測定小鼠對新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用(谷氨酸損傷、過氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等)新生大鼠對SH-SY5Y細(xì)胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細(xì)胞抗驚厥育亨賓毒性增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協(xié)同作用小鼠對巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗(yàn)小鼠曠場實(shí)驗(yàn)(大/小鼠,全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大/小鼠大鼠高架十字迷宮法(全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大鼠大鼠穿梭箱法(全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型(雙側(cè)損毀PD模型)大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛。可以簡化實(shí)驗(yàn)操作和樣品收集。上海兔動物模型

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應(yīng)根據(jù)所檢測指標(biāo)的要求,需采取不同策略處理。在如今分子生物學(xué)當(dāng)?shù)赖默F(xiàn)實(shí)背景下,動物實(shí)驗(yàn)除了對實(shí)驗(yàn)動物的體征及生理指標(biāo)進(jìn)行的監(jiān)控外,各種分子檢測甚至是組學(xué)檢測也開始大行其道,動物實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后的機(jī)制研究成為了實(shí)驗(yàn)的重頭戲。一般來說,動物實(shí)驗(yàn)檢測對象主要包括:(1)體液中各類因子定性及定量檢測由于此類檢測對象多為蛋白及各類小分子物質(zhì),因此在取樣過程中應(yīng)注意防止此類物質(zhì)降解,在獲取后,應(yīng)及時(shí)置于溫(≤-80℃)進(jìn)行保存,在后續(xù)實(shí)驗(yàn)過程中,也應(yīng)當(dāng)注意保存條件的穩(wěn)定性,避免反復(fù)凍融。常用的方法便是酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),除此之外,可利用生化分析儀及不同檢測方法的試劑盒(比色法、比濁法等)方法對各類生化指標(biāo)及因子進(jìn)行定性及定量檢測。(2)組織病理、生理變化及免疫組化檢測常用的病理檢測多使用H&E染色對細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核進(jìn)行染色標(biāo)記,以觀察細(xì)胞變化。除此之外,許多特殊染色也在病理生理變化中得到了應(yīng)用,如利用Masson染色檢測組織纖維化病變,Nissl染色檢測神經(jīng)元損傷,β-半乳糖甘酶染色檢測細(xì)胞衰老等。此外,還可以通過免疫組化技術(shù)對某些特異性標(biāo)記物進(jìn)行免疫顯色檢測,達(dá)到原位定性或定量檢測的目的。。江蘇動物模型技術(shù)

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