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znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子,對基因調(diào)控起重要的作用。znf124蛋白可穿過核孔進(jìn)入核內(nèi),作為轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其他基因的表達(dá)。目前針對znf124蛋白功能的研究報(bào)道并不多,對其功能也知之甚少,znf124與一種先天性系統(tǒng)發(fā)育疾病dandy-walker復(fù)合征(dandy-walkercomplex,dwc)相關(guān)。此外,znf124被認(rèn)為參與了前體生長因子(vegf)對人造血細(xì)胞凋亡的抑制作用,表明znf124在人體生命活動(dòng)中承擔(dān)有重要功能。發(fā)明人的另一研究表明,znf124基因突變與rp有關(guān),對探索rp的致病機(jī)制有極大幫助。因此,深入研究znf124對視網(wǎng)膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。小鼠CLP盲腸穿孔致膿毒血癥模型。裸鼠動(dòng)物模型

brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網(wǎng)膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統(tǒng)計(jì)結(jié)果;c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達(dá);d:圖1中c的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果;圖中:a:擴(kuò)增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽性;b:擴(kuò)增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr,擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果;b:實(shí)時(shí)定量pcr實(shí)驗(yàn)分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達(dá);sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結(jié)果;圖中:a-c:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計(jì)。湖北裸鼠動(dòng)物模型服務(wù)放血致失血性貧血小鼠模型。

糖尿病足大鼠模型【目的】構(gòu)建糖尿病足大鼠模型;【材料】1、材料:STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉;2、試劑配制:1)檸檬酸納緩沖液配制:A液十B液=1:,PH=;A液:檸檬酸mL;B液:朽檬酸三納2)STZ液配制:55mg/kg(避光,現(xiàn)配現(xiàn)用10min內(nèi)注射);3、糖尿病模型構(gòu)建方法:1)大鼠術(shù)前禁食12h;2)按55ug/g注射.連續(xù)3天注射,對照組注射檸檬酸緩沖液,造模組注射STZ液,注射后不禁水、禁食2-4h;3)STZ注射結(jié)束5天后空腹測血糖,血糖值高于12mmol/L選入實(shí)驗(yàn)組;【方法】方法一:細(xì)菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時(shí),后足背側(cè)注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液,造成糖尿病肢端的動(dòng)物模型;2、后續(xù)觀察傷口情況;方法二:皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術(shù)剪做一個(gè)圓形皮膚創(chuàng)口,直徑5mm;2、后續(xù)每日觀察傷口情況,作好記錄。
相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視力提高;(2)施用所述候選藥物后,相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視網(wǎng)膜外核層變厚;(3)施用所述候選藥物后,相較于施用所述候選藥物前,所述視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的視網(wǎng)膜外節(jié)增長。第四方面,本發(fā)明實(shí)施例提供了一種視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的繁育方法,其包括:將由如上所述的方法得到的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型進(jìn)行自交。在由方面所述的構(gòu)建方法得到了視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的基礎(chǔ)上,為了獲得更多的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,本領(lǐng)域技術(shù)人員容易想到直接將上述的構(gòu)建方法得到的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型進(jìn)行自交以繁育或培育出更多數(shù)量的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。附圖說明為了更楚地說明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案,下面將對實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹,應(yīng)當(dāng)理解,以下附圖示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例,因此不應(yīng)被看作是對范圍的限定,對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講,在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下,還可以根據(jù)這些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。圖1:檢測gm20541基因在不同組織中的表達(dá);圖中:a:rt-pcr檢測gm20541基因在不同組織的表達(dá)結(jié)果。LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)在這些組織中,gm20541均有表達(dá),說明該基因可能在體內(nèi)發(fā)揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測gm20541基因在不同組織中的表達(dá)。方法:(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾,充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細(xì)胞后,在冰上裂解20min。(3)4℃,16000g離心10min后,取上清轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管,加入50μl的蛋白上樣液,混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后,分別取20μl,160v電壓進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結(jié)束后,根據(jù)需要,裁剪適當(dāng)大小的硝酸纖維素膜,按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙,并趕去氣泡,轉(zhuǎn)膜槽放入冰水浴中,采用恒流,轉(zhuǎn)膜2h。(6)轉(zhuǎn)膜完畢后,純水沖洗硝酸纖維素膜一遍,晾干并標(biāo)記。然后用8%的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后,加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說明書)稀釋于封閉液的一抗,4℃孵育過夜。(8)回收一抗,1×tbst緩沖液洗膜4次,每次10min,根據(jù)一抗來源,選擇合適二抗,用1×tbst稀釋辣根過氧化氫酶(hrp)標(biāo)記的二抗,室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結(jié)束后,用1×tbst洗膜3次,每次10min,用thermo的elc發(fā)光試劑盒檢測蛋白。好的動(dòng)物模型能夠較好地模擬疾病狀態(tài),為的研究提供可能。湖北哪里有動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)室
因此,外科結(jié)扎膽總管并使膽總管完全阻塞已成為引起嚙齒動(dòng)物梗阻性膽汁淤積性損傷的常用模型。裸鼠動(dòng)物模型
其也是可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發(fā)明的實(shí)施例而已,并不用于限制本發(fā)明,對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說,本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi),所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。sequencelisting四川省人民醫(yī)院利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。裸鼠動(dòng)物模型