本發明實施例提供了由上述的方法所得到的視網膜色素變性疾病模型在視網膜色素變性性疾病研究中的應用。進一步地，在本發明的一些實施方案中，所述研究是以非疾病的為目的。通過本發明的構建方法得到的動物模型其具有典型視網膜色素變性性疾病特征，其具有非常廣闊的應用前景，例如將其用于研究視網膜色素變性性疾病的發病過程、發病機制，為深入了解研究視網膜色素變性性疾病提供基礎。又或者將其用于篩選用于預防或視網膜色素變性性疾病藥物、用于評價藥物的療效或預后等。第三方面，本發明實施例提供了由上述的方法所得到的視網膜色素變性疾病模型在篩選用于預防或視網膜色素變性性疾病藥物中的應用。在本發明方面提供了構建方法的基礎上，本領域技術人員容易想到將由該方法得到的視網膜色素變性疾病模型用于篩選預防或視網膜色素變性性疾病藥物或其他類似領域，這也是屬于本發明的保護范圍。進一步地，在本發明的一些實施方案中，所述應用包括：向所述視網膜色素變性疾病模型施用候選藥物，如果所述視網膜色素變性疾病模型在施用所述候選藥物前后發生如下變化中的至少一種，則指示所述候選藥物可以作為預防或視網膜色素變性性疾病的藥物：(1)施用所述候選藥物后。慢性阻塞性肺疾病是一種具有氣流阻塞特征的慢性和（或）肺氣腫。湖南裸鼠動物模型造模

技術實現要素：本發明的目的在于提供利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用，采用該構建方法可以得到視網膜色素變性疾病模型，該模型可表現出視網膜色素變性性疾病特征，該模型可用于視網膜色素變性性疾病的研究，可以幫助闡明rp的發病過程及機制，并為該疾病的或預防提供新的靶標。本發明是這樣實現的：方面，本發明實施例提供了一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法，其包括：敲除目標動物視網膜前體細胞中的基因組中的gm20541基因。znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結構域的轉錄因子，對基因調控起重要的作用。znf124蛋白可穿過核孔進入核內，作為轉錄因子調控其他基因的表達。目前針對znf124蛋白功能的研究報道并不多，對其功能也知之甚少，znf124與一種先天性系統發育疾病dandy-walker復合征(dandy-walkercomplex，dwc)相關。此外，znf124被認為參與了前體生長因子(vegf)對人造血細胞凋亡的抑制作用，表明znf124在人體生命活動中承擔有重要功能。發明人的另一研究表明，znf124基因突變與rp有關，對探索rp的致病機制有極大幫助。因此，深入研究znf124對視網膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。湖北兔動物模型造模故大腦中動脈阻塞(MCAO)模型被用于局灶性腦缺血的研究。

我們知道WB實驗步驟繁瑣，一次實驗歷時也不短，從提蛋白到顯影結束可能要三天，我們就講一下這里面的一些關鍵環節。一、蛋白提取及變性1、提取蛋白很多經驗豐富的WB實驗者都深有體會，蛋白提取是影響結果重要的環節之一。該過程重要的是防降解和保證蛋白濃度不要太低。防降解主要有兩點，一是裂解前注意保持樣品處于低溫環境中，二是裂解時加入足夠的蛋白酶抑制劑。我們習慣先用冰冷的PBS做心臟的體循環灌注，然后冰上取腦，分離各腦區(嗅球，皮層，海馬，中腦，小腦，延髓，丘腦，紋狀體)后置于，用液氮速凍后轉移至-80度冰箱長期保存。接著是保證蛋白濃度，即要加入適量的裂解液，加太少會使蛋白提取不充分，加太多會讓蛋白濃度太低，一般經驗是這樣的，細胞樣品例如一個六孔板的細胞加60微升的裂解液，動物組織的話每毫克組織加10微升裂解液。還要加上超聲破碎處理，具體方案見討論部分。如果沒有超聲破碎儀，那就用1毫升注射器不斷抽吸，冰上反復抽吸1分鐘左右，注意不要產生過多氣泡。(需要灌注取材的視頻可以私聊獲取，由于文件過大，又比較血腥，不宜直接放到文章里。)2、蛋白變性加入上樣緩沖液后100攝氏度煮10分鐘，這里的上樣緩沖液有兩種可選。

轉基因小鼠對黑色素瘤發生的分子途徑的理解有重要意義。此外，轉基因小鼠是可靠且可重現的模型，用來評估受損基因對黑色素瘤生物學的影響。應用：基因工程小鼠模型可用于研究特定基因組改變在黑色素瘤的發生和發展的重要性及藥物的靶向。1Lum－/－基因敲除小鼠Lumican是一種富含亮氨酸的小蛋白聚糖(smallleucine-richproteoglycan，SLRP)，為膠原原纖維形成的關鍵調節劑。黑色素瘤中Lumican表達降低與浸潤相關。方法：有研究者利用BamHI建立的克隆衍生物導入胚胎干細胞，建立Lum－/－轉基因小鼠。該模型可提供與發生和轉移相關機制及可見變的進展，以及確定負責的黑色素瘤進展的基因。2Tyr::N-RasQ61K轉基因小鼠方法：有研究者使用突變的人N-ＲasQ61K和SV40剪接以及聚腺苷酸化序列生成Tyr::N-ＲasQ61K構建體，并注射到卵母細胞中，建立Tyr::N-ＲasQ61K轉基因小鼠。3BrafV600E轉基因小鼠模型有研究者使用LoxP-stop-LoxP(LSL)/Cre重組酶技術從內源性Braf基因中誘導BrafV600E表達，建立BrafV600E轉基因黑色素瘤小鼠模型。總結目前已有三種不同的黑色素瘤小鼠模型，但由于實驗動物與人類基因組、基因調控、細胞類型、結構與組成等方面是有一定差別。大鼠、小鼠動物疾病模型技術。

糖尿病足大鼠模型【目的】構建糖尿病足大鼠模型；【材料】1、材料：STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉；2、試劑配制：1）檸檬酸納緩沖液配制：A液十B液=1:，PH=；A液:檸檬酸mL；B液:朽檬酸三納2）STZ液配制:55mg/kg（避光，現配現用10min內注射)；3、糖尿病模型構建方法：1）大鼠術前禁食12h；2）按55ug/g注射.連續3天注射，對照組注射檸檬酸緩沖液，造模組注射STZ液，注射后不禁水、禁食2-4h；3）STZ注射結束5天后空腹測血糖，血糖值高于12mmol/L選入實驗組；【方法】方法一：細菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時，后足背側注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液，造成糖尿病肢端的動物模型；2、后續觀察傷口情況；方法二：皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術剪做一個圓形皮膚創口，直徑5mm；2、后續每日觀察傷口情況，作好記錄。惡性黑色素瘤是起源于神經嵴的黑色素細胞惡性。西藏大鼠動物模型手術

采用復合改良法造模,是目前 IgA 腎病中較為可靠、穩定、成功率高,且病理、臨床指標近人類 IgA 腎病的動物模型。湖南裸鼠動物模型造模

SD大鼠腦缺血致腦梗死模型【材料】水合氯醛、線栓直徑（體重250-300g）【方法】1、10％水合氯醛（35mg/kg）腹腔注射麻醉。2、仰臥位固定，頸正中線切口，分離肌肉和筋膜，分離左側頸總動脈（CCA）、頸外動脈（ECA）和頸內動脈（ICA）。3、微動脈夾暫時夾閉頸內動脈（ICA），活扣結扎近心端頸總動脈（CCA）、頸外動脈（ECA）打雙結，在雙結中間剪開小口插入線栓。4、將拴線插入到頸內動脈（ICA），用眼科鑷輕推拴線，以頸外動脈（ECA）和頸內動脈（ICA）分叉處為參考位置。5、栓線插入預刻深度，感到有阻力，說明栓線已到達腦中動脈（MCA）,打結固定栓線。6、血管外的栓線不要留得過長，1h后拔出栓線，縫合傷口，單籠飼養觀察。注：前兩三天老鼠會萎靡，不進食，注意不要，老鼠無死亡即可。湖南裸鼠動物模型造模