所用儀器為bio-rad的化學發光凝膠成像系統。結果見圖1中c和d，可以看出，通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物，對本發明提供的視網膜色素變性疾病模型的構建方法進行說明，gm20541基因敲除的路線如圖2所示，具體操作如下：基因敲除小鼠獲取步驟：1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列loxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子；2利用dna同源重組技術將gm20541基因中的第3個外顯子替換，得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細胞；3利用步驟2得到的胚胎干細胞制備得到含gm20541基因敲除細胞的嵌合體小鼠(圖2)；4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育，在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定：實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結果，擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r，擴增產物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’；sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結果見圖3中a。小鼠膽管結扎誘導炎癥性肝損傷和肝纖維化模型的建立。西藏裸鼠動物模型服務

輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼，二通道正極接左眼。通過針管對雙眼滴生理鹽水，改善金環電極及角膜的接觸效果。保證兩個金環電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號確認無誤后，關閉暗紅光。可以先嘗試記錄一下暗適應光強為·s/m2的erg檢測，確認一下信號的質量：如果雙眼的振幅出現了與預期不同的較大差異，建議再次檢查金環電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應光強為·s/m2的信號。需要注意的是，完成暗適應·s/m2光強檢測后，系統將自動打開背景光。同樣的，需要打開定時器，光適應10-15分鐘，再記錄。6經過光適應后，依次記錄光適應·s/m2以及·s/m2光強下波形，記錄·s/m2光強下閃爍視網膜誘發電位。結果發現在4個月時，與ctrl(對照)小鼠比較，cko(gm20541基因敲除純合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗適應和光適應條件下均明顯降低，表明gm20541敲除后導致視力受損(見圖5和圖6)。實施例4視網膜石蠟切片h&e染色：對4月齡小鼠的視網膜進行石蠟切片、蘇木精-伊紅染色法(h&e染色方法)染色，具體操作如下：1)快速取小鼠眼球組織，并置于固定液中固定24h；2)石蠟包埋，切片，厚度為4μm；3)切片常規用二甲苯脫蠟。寧夏大鼠動物模型培養裸鼠皮下成瘤：前肢近腋后皮下注射細胞懸液； 裸鼠原位瘤：胰腺成瘤；尾靜脈注射成瘤。

其也是可以作為視網膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發明的實施例而已，并不用于限制本發明，對于本領域的技術人員來說，本發明可以有各種更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。sequencelisting四川省人民醫院利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。

轉基因小鼠對黑色素瘤發生的分子途徑的理解有重要意義。此外，轉基因小鼠是可靠且可重現的模型，用來評估受損基因對黑色素瘤生物學的影響。應用：基因工程小鼠模型可用于研究特定基因組改變在黑色素瘤的發生和發展的重要性及藥物的靶向。1Lum－/－基因敲除小鼠Lumican是一種富含亮氨酸的小蛋白聚糖(smallleucine-richproteoglycan，SLRP)，為膠原原纖維形成的關鍵調節劑。黑色素瘤中Lumican表達降低與浸潤相關。方法：有研究者利用BamHI建立的克隆衍生物導入胚胎干細胞，建立Lum－/－轉基因小鼠。該模型可提供與發生和轉移相關機制及可見變的進展，以及確定負責的黑色素瘤進展的基因。2Tyr::N-RasQ61K轉基因小鼠方法：有研究者使用突變的人N-ＲasQ61K和SV40剪接以及聚腺苷酸化序列生成Tyr::N-ＲasQ61K構建體，并注射到卵母細胞中，建立Tyr::N-ＲasQ61K轉基因小鼠。3BrafV600E轉基因小鼠模型有研究者使用LoxP-stop-LoxP(LSL)/Cre重組酶技術從內源性Braf基因中誘導BrafV600E表達，建立BrafV600E轉基因黑色素瘤小鼠模型。總結目前已有三種不同的黑色素瘤小鼠模型，但由于實驗動物與人類基因組、基因調控、細胞類型、結構與組成等方面是有一定差別。骨質疏松癥是以骨量減少及骨組織微觀結構為特征的一種全身性骨骼疾病，伴有骨的脆性增加、易于發生骨折。

痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動物】SPF級SD大鼠，雄性，周齡6~8W，體重：200~250g【方法】1、大鼠麻醉，顱頂脫毛備皮；2、大鼠腦定位儀固定大鼠，顱頂正中切口，長度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫；3、縫線將皮膚左右分開固定，前囟后10mm、矢狀縫左側；4、微量注射器移至開孔處修正骨孔，注射器垂直向顱內插入，緩慢注射無水乙醇15ul，注射完移除注射器，棉球壓迫止血；5、縫合創口后維持25°體溫，等待蘇醒，觀察大鼠狀態。【觀察】術后3天模型大鼠攝食減少、右側肢體跛行、右前肢不負重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯，順時針繞圈前行，2周后癥狀減輕，大鼠于術后4周開始給予動物行為學觀察【檢測】HE檢測對比觀察腦組織是否出現細胞水腫,排列不規則,結構紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質軟化灶和空囊形成,小膠質細胞浸潤,星形膠質細胞肥大、增生等病理表現。曠場測試（OpenFieldTest）：實驗用于評估大小鼠的活動性和探索性行為。動物被放置在一個較大的開放性場地內，然后記錄它們的運動軌跡和停留時間。用來評估動物的活動性、焦慮程度、壓力反應等。水迷宮測試。卵巢切除致骨質疏松大鼠模型。云南大鼠動物模型技術

由于大鼠面神經與人類相似,易于暴露.因此通過大鼠面神經損傷致癱的模型制作方法為研究者提供更多的思路。西藏裸鼠動物模型服務

省心省時一些基因編輯鼠模型表型不易發現，需要結合外科手術造模、物理刺激或藥物誘導才能發現表型。專業的手術模型團隊結合成熟穩定的基因修飾鼠平臺和飼養繁育平臺，賽業生物可為您提供一站式“基因編輯鼠模型制備——種群擴繁——手術造模——表型驗證”服務，讓您省心省時。3.專業的技術支持賽業生物專業的小動物外科手術團隊熟練掌握多種模型的制備，具備建立復雜及復合手術疾病模型的能力，可能夠根據您的需求，制定合理的實驗計劃，同時提供及時的項目匯報與售后服務，讓您省事省心。，確保動物福利與質量標準與國際接軌賽業模式動物中心通過ISO9001:2015和AAALAC雙認證，ISO9001:2015認證確保向廣大學者提供的所有產品和技術服務符合國際標準，AAALAC認證表明了賽業生物尊重動物福利和倫理，重視生物安全的負責態度。適用動物品種：大鼠、小鼠。手術疾病模型團隊首席科學家簡介張榮利博士張榮利博士有二十多年小鼠手術疾病模型制備經驗，畢業后先后在中國中醫科學院、清華大學、北京大學及國際學術機構任職，2011年起在美國CaseWesternReserveUniversity工作，任ResearchScientist并擔任心血管生理學實驗室主任，負責基因工程動物的疾病表型發現與新藥臨床前研究。西藏裸鼠動物模型服務