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來源: 發布時間:2025-09-13

結果發現在這些組織中,gm20541均有表達,說明該基因可能在體內發揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測gm20541基因在不同組織中的表達。方法:(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾,充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細胞后,在冰上裂解20min。(3)4℃,16000g離心10min后,取上清轉移至另一干凈離心管,加入50μl的蛋白上樣液,混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后,分別取20μl,160v電壓進行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結束后,根據需要,裁剪適當大小的硝酸纖維素膜,按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙,并趕去氣泡,轉膜槽放入冰水浴中,采用恒流,轉膜2h。(6)轉膜完畢后,純水沖洗硝酸纖維素膜一遍,晾干并標記。然后用8%的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后,加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說明書)稀釋于封閉液的一抗,4℃孵育過夜。(8)回收一抗,1×tbst緩沖液洗膜4次,每次10min,根據一抗來源,選擇合適二抗,用1×tbst稀釋辣根過氧化氫酶(hrp)標記的二抗,室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結束后,用1×tbst洗膜3次,每次10min,用thermo的elc發光試劑盒檢測蛋白。用血管內線栓阻斷法制備大鼠 MCAO模型。已被腦血管病研究者接受和采用。寧夏哪里有動物模型飼養

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本發明實施例提供了由上述的方法所得到的視網膜色素變性疾病模型在視網膜色素變性性疾病研究中的應用。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述研究是以非疾病的為目的。通過本發明的構建方法得到的動物模型其具有典型視網膜色素變性性疾病特征,其具有非常廣闊的應用前景,例如將其用于研究視網膜色素變性性疾病的發病過程、發病機制,為深入了解研究視網膜色素變性性疾病提供基礎。又或者將其用于篩選用于預防或視網膜色素變性性疾病藥物、用于評價藥物的療效或預后等。第三方面,本發明實施例提供了由上述的方法所得到的視網膜色素變性疾病模型在篩選用于預防或視網膜色素變性性疾病藥物中的應用。在本發明方面提供了構建方法的基礎上,本領域技術人員容易想到將由該方法得到的視網膜色素變性疾病模型用于篩選預防或視網膜色素變性性疾病藥物或其他類似領域,這也是屬于本發明的保護范圍。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述應用包括:向所述視網膜色素變性疾病模型施用候選藥物,如果所述視網膜色素變性疾病模型在施用所述候選藥物前后發生如下變化中的至少一種,則指示所述候選藥物可以作為預防或視網膜色素變性性疾病的藥物:(1)施用所述候選藥物后。西藏模式動物模型構建上面是我們已構建成功的動物模型,我們還可以根據客戶實驗方案構建其它模型,具體要求請咨詢。

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特發性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立【方法】1、BALB/c小鼠麻醉,6-8周齡,體重20~25g,仰臥固定于實驗臺上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管;2、將1mL注射器經兩氣管軟骨環間隙朝向心端刺入氣管,回抽無阻力;3、注入博萊霉素(約4~5mg/kg)再向氣管內注入~3次,使藥物在肺部分布均勻;4、以大鼠身體長軸為中心,正反快速旋轉鼠板1~2分鐘。縫合皮膚,局部聚維酮碘消毒(或用青霉素消毒)防止,室溫保持在24~25℃,待動物自然清醒后置籠內常規飼養。肺纖維化模型發展時間:2周可見肺系數(肺重/體重×100%)、羥脯氨酸含量明顯升高。顯微鏡下可見炎癥細胞浸潤,以淋巴細胞、單核吞噬細胞為主,并有肺泡壁增厚、成纖維細胞增生等Ⅱ級肺泡炎表現。4周可見肺間質內有大量散在綠染的膠原纖維,肺泡結構破壞,見有許多纖維細胞等Ⅲ級肺間質纖維化病變。大鼠模型病理組織學與病理生理學改變與人類肺間質纖維化相似。其病變早期表現為滲出性肺泡炎,炎癥細胞在病變處聚集增多。晚期為肺間質纖維化,間質細胞增生,基質膠原聚集取代正常的肺組織結構。【檢測】組織病理切片HE染色。

放血致失血性貧血小鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2014放血致失血性貧血小鼠模型3個工作日詢價1、實驗方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血,,并測外周血紅細胞總數(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢檢測外周血RBC總數及Hb含量。2、檢測標準:模型組小鼠放血后24小時的外周血RBC總數及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對照組比較具**性差異(P<),表明成功構建了失血性貧血動物模型造模。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。可以嚴格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性。

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進而使一些生長因子受體磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周齡雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮膚。在DMBA涂抹一周后,每周兩次將TPA(40nmol)施用到相同部位。模型驗證:幾周后,小鼠背部皮膚上出現色素沉著斑點。組織學研究表明,小鼠真皮組織中色素細胞積累,某些色素細胞表現出嵌套的形態學模式。缺點:化學誘導黑素瘤小鼠模型缺乏與人類疾病的臨床相關性。另外,此類模型可用于研究陽光對黑色素細胞痔轉化為侵襲性的黑色素瘤的過程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系統功能,因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前應用多的模型。應用:移植接種的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位發展、轉移的一些特點,多用于抗和轉移藥物評估。1同種移植模型同種移植模型是將小鼠黑素瘤細胞接種到具有相同遺傳背景的小鼠中獲得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型,其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。優點:同種移植模型具有免疫能力,可通過黑色素細胞與免疫細胞之間固有的相互作用來研究黑色素瘤與微環境的關系。合理建立周圍性面癱動物模型對進一步深入研究具有重要意義。北京模式動物模型造模

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視網膜外網層及其他相關細胞層出現相應病理改變。因此,視網膜前體細胞中的gm20541基因被敲除的動物可以作為視網膜色素變性疾病模型,用于視網膜色素變性性疾病研究等領域中,為該疾病的研究例如發病過程、機制以及相關藥物的篩選提供一種新的模型。進一步地,在本發明的一些實施方案中,敲除gm20541基因序列是指敲除gm20541基因的外顯子序列。敲除gm20541基因序列可以是敲除gm20541基因全長序列,也可以是敲除gm20541基因部分序列例如部分外顯子序列,無論敲除那種類型(部分或全長)的序列,只要是能夠在前體細胞中沉默gm20541基因的表達,使動物表現出視網膜色素變性性疾病相應特征即落入本發明的保護范圍。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述外顯子序列選自第1外顯子、第2外顯子、第3外顯子中的任意一個或多個外顯子序列。在本發明公開的內容基礎上,即在本發明揭示了gm20541基因與視網膜色素變性疾病的相關關系的前提下,本領域技術人員容易想到敲除gm20541基因的任意一個或多個外顯子序列,以使gm20541基因的功能受損,進而得到類似的視網膜色素變性疾病模型,此類方法,也是屬于本發明的保護范圍。進一步地,在本發明的一些實施方案中。寧夏哪里有動物模型飼養

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