代謝組學的研究對象大都是相對分子量在1000以內的小分子物質,因此常用的血液樣本在取樣后,應小心操作,防止溶血,盡快分離出血清,分置于溫環境下保存。由于用于病理實驗的動物組織采集相對其他樣品的采集,操作更繁瑣,在處理過程中許多細節容易忽略,造成數據不完美(甚至不能用)。因此接下來將重點介紹組織樣品采集的注意事項及其固定。組織樣品采集注意事項組織應新鮮,操作時間盡可能短,否則細胞發生死后變化、自融及現象。是動物心臟還在跳動時采集,樣本取出后在5分鐘以內置于固定液內,避免長時間暴露在空氣環境中。組織塊盡量小而薄。組織塊的厚度以不超過5mm為宜,較為理想的厚度為2mm左右,主要目的是使固定液迅速而均勻的滲入組織塊內部。勿使組織塊受擠壓。在采集過程中,應盡量選擇較為鋒利的手術器械,如手術刀片等,避免操作過程中擠壓挫傷標本。擠壓過的組織均不可用。固定液的量一般以組織塊大小的20倍為宜,組織能夠在容器內自由移動。盡量保持組織的原有形態。新鮮組織經固定后,或多或少產生收縮現象(如胃腸),為此可將組織展平,以盡可能維持原形。保持組織清潔。組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等,可用生理鹽水沖洗。可以嚴格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性。寧夏外包動物模型造模

動物的選擇目前常用的模式生物有果蠅、酵母、小鼠、斑馬魚等。目前主要是小鼠黑色素瘤模型。造模方法黑色素瘤小鼠模型可分為誘發性模型、移植性模型、轉基因模型。一、誘導性模型應用:誘導的小鼠模型模擬人類受外界因素影響獲得的黑色素瘤,常用于研究預防黑色素瘤形成。1紫外線誘導的小鼠模型通過紫外線照射獲得的黑色素瘤模型被認為是臨床上可靠的模型。方法:有研究者將HGF/SFcDNA表達的小鼠置于日光燈下用不同劑量(kJ/m2UVB、kJ/m2UVA、)進行紫外誘導15min。模型驗證:誘導后的小鼠出現皮膚發紅,偶有淺表皮脫屑,在組織病理學中觀察到小鼠產生的大多數皮膚黑色素瘤中具有真皮成分,病變顯示具有垂直生長期或浸潤性惡性黑色素瘤以及淋巴結轉移,這些病變與人類患者黑色素瘤頁面狀擴散的表皮內病變特征相似。缺點:但野生型或正常型小鼠一般不易發生UV誘導的黑色素瘤,因此UV誘導的黑色素瘤小鼠模型往往需要聯合免疫缺陷小鼠,其操作技術較難、成本較高。2化學誘導化學致物誘導黑色素瘤小鼠模型大多采用DMBA和TBA誘導。DMBA是一種免疫抑制多環芳烴,其致機理是其活性代謝物被CYP450代謝成致物1,2-環氧化物-3,4-二醇DMBA,進而損傷DNA。TPA是通過蛋白激酶C充當啟動子。湖南裸鼠動物模型培養它主要影響身體內的大中動脈,如冠狀動脈、頸動脈、腦動脈和腎動脈等,其發病機制的主要過程。

腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:180~220g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2015腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型15周詢價1、實驗方法:采用主動脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后,仰臥位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中線切開皮膚及肌層,分離出腹主動脈,在腎動脈上方將腹主動脈與鈍頭8號探針一起結扎后,小心抽出針頭。手術造模后大鼠正常飼養3個月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計算心體比(VW/BW),并進行心功能檢測,包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對心肌組織進行病理學檢測.2、檢測標準:模型組大鼠VW/BW明顯增加,LVSP明顯降低,LVEDP明顯升高,±dp/dtmax則**減小,與正常對照組相比具有統計學差異。病理學檢測結果表明心肌出現典型心衰樣病理改變。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。
技術實現要素:本發明的目的在于提供利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用,采用該構建方法可以得到視網膜色素變性疾病模型,該模型可表現出視網膜色素變性性疾病特征,該模型可用于視網膜色素變性性疾病的研究,可以幫助闡明rp的發病過程及機制,并為該疾病的或預防提供新的靶標。本發明是這樣實現的:方面,本發明實施例提供了一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法,其包括:敲除目標動物視網膜前體細胞中的基因組中的gm20541基因。可以簡化實驗操作和樣品收集。

e:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖b波統計;scotopicamplitude:暗光測定峰值;flashintensity:閃光強度;a-wave:a波;b-wave:b波。圖6:光適應視網膜電圖(erg)檢測結果;圖中:a-b:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖軌跡圖;c:20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖軌跡圖;d:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖a波統計;e:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖b波統計;f:20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖統計。sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖7:視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網膜切片免疫組化染色結果;小鼠年齡:4個月;os:outer-segment(外節);is:inner-segment(內節);onl:outernuclearlayer(外核層);inl:innernuclearlayer(內核層);圖中:a:視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網膜石蠟切片的h&e染色結果,外核層及內核層均變薄;b:對不同部位的gm20541敲除鼠視網膜外核層厚度統計。圖8:視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠ihc染色結果。脂多糖(LPS)聯合煙熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。上海小鼠動物模型造模
膽管結扎誘導炎癥性肝損傷和肝纖維化小鼠模型。寧夏外包動物模型造模
然后再入固定液,但要注意防止組織損傷。要熟悉采集部位。要能準確的按解剖部位采集,如胰腺,一般取胰島較多的胰腺尾部;肺應取有細支氣管及帶有軟骨片的小支氣管部。如果實驗需進行多組織樣本的采集,采集順序應按照:消化,神經系統,皮膚,肌肉等的順序進行。選好組織塊的切面。熟悉某些組織成分安排,然后決定其切面的走向;如一長管狀以橫切面較好。切除不需要的部分。特別是組織周圍的脂肪等,應盡可能掉,否則給固定、脫水、浸蠟、切片等帶來一些不必要的問題。組織樣品的固定(1)固定的方法:①小塊組織固定法:從動物取下的小塊組織,立即置入液態固定劑(這是應用經常的方法)。②注射/灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內部或需要對整個臟器或整個動物進行固定,這時宜采用注射固定法,將固定液注入血管,經血管分支到達整個組織和全身,從而得到充分的固定。另,空腔組織比如肺,肺內含有空氣,固定液難以滲入,建議先做肺灌注,使得肺充盈滿固定液以后再進行保存,如果空腔中氣體沒有有效排出,后續可能影響固定效果(沒有灌注的肺組織會浮在液體表面不利于固定,切片以后也會看到很多的空泡)。③蒸汽固定法:比較細小而薄的標本。寧夏外包動物模型造模