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來源: 發布時間:2025-09-12

e:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖b波統計;scotopicamplitude:暗光測定峰值;flashintensity:閃光強度;a-wave:a波;b-wave:b波。圖6:光適應視網膜電圖(erg)檢測結果;圖中:a-b:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖軌跡圖;c:20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖軌跡圖;d:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖a波統計;e:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網膜電圖b波統計;f:20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網膜電圖統計。sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖7:視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網膜切片免疫組化染色結果;小鼠年齡:4個月;os:outer-segment(外節);is:inner-segment(內節);onl:outernuclearlayer(外核層);inl:innernuclearlayer(內核層);圖中:a:視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網膜石蠟切片的h&e染色結果,外核層及內核層均變薄;b:對不同部位的gm20541敲除鼠視網膜外核層厚度統計。圖8:視網膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠ihc染色結果。小鼠卵巢早衰POF模型。湖南皮下成瘤動物模型服務

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基因/蛋白質表達定性或定量檢測在進行分子檢測的過程中,保持核酸和蛋白質的完整性至關重要,因此在取樣過程中,應盡量避免核酸及蛋白質的降解。如不注意采樣過程,將會導致樣本中的核酸及蛋白質的無差別降解,嚴重影響后續分子檢測結果。在條件允許的情況下,組織樣本在離體后應立刻裝入凍存管內,并立即放入液氮中進行冷凍。在RNA提取樣本的保存過程中,可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進行RNA酶的抑制。針對蛋白質提取樣本的保存,我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進行短期處理。聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction,PCR)及免疫印跡(Westernblotting,WB),這兩種實驗手段是分子生物學檢測中不可或缺的一部分,也是發表論文至關重要的分子檢測數據。PCR主要用來對基因在基因組層面或轉錄層面的變化進行定性或定量檢測,而WB則主要用來對某一蛋白質的表達進行定量檢測。(4)轉錄組學、蛋白質組學及代謝組學檢測隨著檢測水平及相關產業的不斷發展,各類組學檢測的價格降低,實驗設計中也常常運用組學檢測來提升實驗設計的檔次。在我們進行轉錄組學及蛋白質組學的檢測過程中,同樣是要首先確保目標RNA或蛋白質的片段完整性。江蘇兔動物模型建模慢性阻塞性肺疾病是一種具有氣流阻塞特征的慢性和(或)肺氣腫。

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17-高原濕度環境模擬裝置,18-動物行為學遠程觀察單元,19-功能控制面板。具體實施方式為了使本實用新型的目的、技術方案及優點更加清楚明白,以下結合附圖及實施例,對本實用新型進行進一步詳細說明。應當理解,此處所描述的具體實施例用以解釋本實用新型,并不用于限定本實用新型,即所描述的實施例是本實用新型一部分實施例,而不是全部的實施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實用新型實施例的組件可以以各種不同的配置來布置和設計。因此,以下對在附圖中提供的本實用新型的實施例的詳細描述并非旨在限制要求保護的本實用新型的范圍,而是表示本實用新型的選定實施例。基于本實用新型的實施例,本領域技術人員在沒有做出創造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例,都屬于本實用新型保護的范圍。需要說明的是,術語“”和“第二”等之類的關系術語用來將一個實體或者操作與另一個實體或操作區分開來,而不一定要求或者暗示這些實體或操作之間存在任何這種實際的關系或者順序。而且,術語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設備不包括那些要素,而且還包括沒有明確列出的其他要素。

所述外顯子序列為第3外顯子序列。進一步地,在本發明的一些實施方案中,利用cre-loxp基因敲除技術敲除gm20541基因上的第3外顯子序列。上述敲除策略是采用cre-loxp敲除技術敲除gm20541基因。但在其他的實施例中,實現基因敲除的技術手段有很多,例如crispr/cas9技術、人工核酸酶介導的鋅指核酸酶技術(zinc-fingernucleases,zfn)、轉錄因子樣效應物核酸酶技術(transceriptionactivator-likeeffectornucleases,talen)等。因此,在其他的實施例中采用crispr/cas9技術或其他的技術手段敲除gm20541基因,也是屬于本發明的保護范圍。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述目標動物為哺乳動物。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述哺乳動物選自小鼠、大鼠、狗、豬、猴以及猿中的任意一種。需要說明是,本發明所述的目標動物并不限于上述的動物,其他類型的哺乳動物也是可行,無論選用何種動物,只要是具有gm20541基因或其同源基因的動物,均可作為本發明所述構建方法中的目標動物,在其前體細胞中敲除gm20541基因,使其表現出視網膜色素變性性疾病特征,作為視網膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發明的保護范圍。第二方面。LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。

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本發明實施例提供了由上述的方法所得到的視網膜色素變性疾病模型在視網膜色素變性性疾病研究中的應用。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述研究是以非疾病的為目的。通過本發明的構建方法得到的動物模型其具有典型視網膜色素變性性疾病特征,其具有非常廣闊的應用前景,例如將其用于研究視網膜色素變性性疾病的發病過程、發病機制,為深入了解研究視網膜色素變性性疾病提供基礎。又或者將其用于篩選用于預防或視網膜色素變性性疾病藥物、用于評價藥物的療效或預后等。第三方面,本發明實施例提供了由上述的方法所得到的視網膜色素變性疾病模型在篩選用于預防或視網膜色素變性性疾病藥物中的應用。在本發明方面提供了構建方法的基礎上,本領域技術人員容易想到將由該方法得到的視網膜色素變性疾病模型用于篩選預防或視網膜色素變性性疾病藥物或其他類似領域,這也是屬于本發明的保護范圍。進一步地,在本發明的一些實施方案中,所述應用包括:向所述視網膜色素變性疾病模型施用候選藥物,如果所述視網膜色素變性疾病模型在施用所述候選藥物前后發生如下變化中的至少一種,則指示所述候選藥物可以作為預防或視網膜色素變性性疾病的藥物:(1)施用所述候選藥物后。心力衰竭(heart failure)簡稱心衰,是指由于心臟的收縮功能和(或)舒張功能發生障礙。云南外包動物模型建模

通過截斷大鼠面部神經致面癱模型的建立。湖南皮下成瘤動物模型服務

表明在gm20541敲除鼠視網膜外節變短退化。sixko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型小鼠;dapi(4,6-diamidino-2-phenylindole):細胞核染料4,6-二脒基-2-苯基吲哚;rhodopsin:視紫紅質抗體;merge:兩種顏色重疊。具體實施方式為使本發明實施例的目的、技術方案和優點更加清楚,下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者,按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者,均為可以通過市售購買獲得的常規產品。以下結合實施例對本發明的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例11采用rt-pcr方法檢測gm20541基因在不同組織的表達情況。方法:分別提取小鼠腦、肝臟、視網膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾的總rna,然后用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。根據gm20541的cdna序列設計引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3;gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3。以提取的cdna為模板,進行rt-pcr。擴增后進行電泳,結果見圖1。結果見圖1中a和b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541基因在小鼠腦、肝臟、視網膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾中的表達。湖南皮下成瘤動物模型服務

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