伴vonFreyhairs檢測）熱板法大/小鼠甩尾法大/小鼠熱輻射致痛法大/小鼠壓痛法大/小鼠VonFreyhairs法大/小鼠醋酸扭體法小鼠福爾馬林致痛法大/小鼠佐劑CFA引起的疼痛大/小鼠角叉菜膠致痛模型大/小鼠LPS誘導(dǎo)痛模型大/小鼠脊神經(jīng)選擇性結(jié)扎（L5/L6）大/小鼠坐骨神經(jīng)分枝選擇性損傷模型（SNI）大/小鼠糖尿病疼痛、切口疼痛，性疼痛模型大/小鼠抗癡呆小鼠獲得性記憶障礙模型（6道小鼠跳臺視屏分析系統(tǒng)）小鼠小鼠記憶鞏固不良模型（6道小鼠跳臺視屏分析系統(tǒng)）小鼠小鼠記憶再現(xiàn)障礙模型（6道小鼠避暗視屏分析系統(tǒng)）小鼠小鼠明暗箱法（4道小鼠明暗箱視屏分析系統(tǒng)）小鼠大鼠獲得性記憶障礙模型（Morris水迷宮視屏分析系統(tǒng)）大鼠小鼠腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶活力測定小鼠D-半乳糖致小鼠癡呆模型小鼠新物體識別實驗大鼠APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠模型（Morriswatermaze,CognitionWall）轉(zhuǎn)基因小鼠體外實驗細胞水平。小鼠膽管結(jié)扎誘導(dǎo)炎癥性肝損傷和肝纖維化模型的建立。北京皮下成瘤動物模型造模

痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動物】SPF級SD大鼠，雄性，周齡6~8W，體重：200~250g【方法】1、大鼠麻醉，顱頂脫毛備皮；2、大鼠腦定位儀固定大鼠，顱頂正中切口，長度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫；3、縫線將皮膚左右分開固定，前囟后10mm、矢狀縫左側(cè)；4、微量注射器移至開孔處修正骨孔，注射器垂直向顱內(nèi)插入，緩慢注射無水乙醇15ul，注射完移除注射器，棉球壓迫止血；5、縫合創(chuàng)口后維持25°體溫，等待蘇醒，觀察大鼠狀態(tài)?！居^察】術(shù)后3天模型大鼠攝食減少、右側(cè)肢體跛行、右前肢不負重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯，順時針繞圈前行，2周后癥狀減輕，大鼠于術(shù)后4周開始給予動物行為學(xué)觀察【檢測】HE檢測對比觀察腦組織是否出現(xiàn)細胞水腫,排列不規(guī)則,結(jié)構(gòu)紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質(zhì)軟化灶和空囊形成,小膠質(zhì)細胞浸潤,星形膠質(zhì)細胞肥大、增生等病理表現(xiàn)。曠場測試（OpenFieldTest）：實驗用于評估大小鼠的活動性和探索性行為。動物被放置在一個較大的開放性場地內(nèi)，然后記錄它們的運動軌跡和停留時間。用來評估動物的活動性、焦慮程度、壓力反應(yīng)等。水迷宮測試。西藏裸鼠動物模型大腦中動脈(MCA)為臨床上發(fā)生腦缺血損傷常見的部位之一。

微波爐中融化后制成1％的瓊脂糖膠。取10μlpcr產(chǎn)物于加樣孔中，120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統(tǒng)成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結(jié)果，wt表示野生型對照，條帶大小為223bp；het表示雜合子，有兩個條帶223bp和358bp；sixko表示純合子，條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3－cre鑒定結(jié)果。six3－cre大小為200bp。根據(jù)圖4中a的結(jié)果，顯示所采用的鑒定方法可對新生小鼠的基因型進行有效鑒定。其中，gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子)，并進行相關(guān)表型的驗證。(5)rt-pcr實驗分析six3-cre敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率驗證，方法如下：(a)分別分離野生型和突變型小鼠視網(wǎng)膜組織，置于，加入1mltrizol提取液，室溫20分鐘；(b)加入200μl氯仿，充分混勻，室溫靜置10分鐘；(c)將樣品置于4度離心機，10000轉(zhuǎn)離心15分鐘；(d)小心吸取上清液，加入等體積異丙醇，充分混勻，10000轉(zhuǎn)離心沉淀rna；(e)75％乙醇清洗析出的總rna，離心再次沉淀，然后晾干加入depc水溶解；(f)提取的總rna用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。

準(zhǔn)備碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分鐘，然后轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)膜液中平衡3分鐘后備用。2、轉(zhuǎn)膜組裝轉(zhuǎn)膜三明治夾，這一步很關(guān)鍵，重要的是膠和膜之間不能有氣泡且膜與膠要保證貼合緊密(否則會翻車)，可以加多點轉(zhuǎn)膜液泡著。組裝好后加滿轉(zhuǎn)膜液，設(shè)置電源參數(shù)，我習(xí)慣恒流轉(zhuǎn)膜，200-280毫安，1-2小時，根據(jù)分子量定，如50KD的分子用60分鐘就夠了。如果一個電源帶兩個轉(zhuǎn)膜大槽即四塊膠，我就會用恒壓70-110V。這個過程重要的是做好降溫。這里簡單說一下蛋白分子量與玻璃板厚度，分離膠的濃度，轉(zhuǎn)膜電源參數(shù)的選擇問題。如果是能用1毫米的玻璃板就不用，因為轉(zhuǎn)膜是在電場的作用下蛋白分子從膠上遷移到膜上，1毫米膠的蛋白遷移距離要比。選擇更薄的膠蛋白轉(zhuǎn)膜時間可以減少，從而減少發(fā)熱，以免膠變形，條帶也會更好看。然后是分離膠的濃度，如果是150—200KD的分子選10%以下的的分離膠，200—300KD的選8%的,300KD以上的選6%的，小于30KD的200mA30分鐘，30-100KD的按分子量的數(shù)值算，如70KD，250mA70分鐘;100-150KD的250mA100分鐘;150—300KD的分子轉(zhuǎn)膜條件用280毫安(以上均是對于，)，120分鐘足矣，前提是膠的濃度相適應(yīng)。五、封閉孵一抗1、封閉轉(zhuǎn)膜結(jié)束后。臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復(fù)制出來。

缺點：該移植模型的原發(fā)出現(xiàn)與轉(zhuǎn)移發(fā)生之間時間間隔短，不利于藥物藥效研究;且細胞為鼠源，與人類有一定的差異。2異種移植模型異種移植模型是將人類的細胞或組織移植入免疫缺陷型實驗動物體內(nèi)。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠，例如無胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般來說，免疫缺陷程度越高，成瘤性越好。的相關(guān)研究中，人源細胞系異種移植(cell-line-derivedxenograft，CDX)模型和患者組織異種移植(patient-derivedxenograft，PDX)模型已得到廣泛應(yīng)用。CDX模型方法：將5×106的人A375黑色素瘤細胞皮下注射NOD/SCID小鼠腹側(cè)的雙側(cè)，成功構(gòu)建黑色素瘤CDX模型。PDX模型方法：有研究者將93個新鮮的患者組織切成2×2×2mm3碎片的大小，皮下接種6周大的NOD/SCID雌性小鼠，建立PDX模型。優(yōu)點：保留了病人的組織學(xué)和遺傳學(xué)特征，可模擬潰瘍狀態(tài)對人類黑色素瘤預(yù)后的影響。缺點：此模型移植后的潛伏期長，連續(xù)傳代后鼠基質(zhì)被人類基質(zhì)替代，移植率可變，免疫系統(tǒng)受損，有移植物抗宿主病的可能性以及某些免疫細胞功能的缺乏。三、轉(zhuǎn)基因小鼠模型可以通過異位表達基因，引入特定的致突變或滅活抑制基因來對小鼠進行轉(zhuǎn)基因黑色素瘤模型的構(gòu)建。致使腎小球系膜這以 IgA 為主的免疫復(fù)合物沉積,同時使系膜細胞增生,基質(zhì)增多。江蘇乳鼠動物模型技術(shù)

IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發(fā)性腎小球疾病,約占原發(fā)性腎小球疾病的 1/3。北京皮下成瘤動物模型造模

疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型動物抗抑郁對腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用（樣品篩選、IC50測定）大鼠強迫游泳試驗（大/小鼠，Noduls軟件、視屏分析）大/小鼠小鼠懸尾試驗（Noduls軟件、視屏分析）小鼠5-羥色胺增強試驗小鼠利血平誘導(dǎo)眼瞼下垂試驗小鼠育亨賓毒性增強試驗小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預(yù)見性刺激（CUMS）模型大鼠新環(huán)境進食抑制實驗大/小鼠小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測定小鼠對新生大鼠海馬神經(jīng)細胞的保護作用（谷氨酸損傷、過氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等）新生大鼠對SH-SY5Y細胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細胞抗驚厥育亨賓毒性增強試驗小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協(xié)同作用小鼠對巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗小鼠曠場實驗（大/小鼠，全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大/小鼠大鼠高架十字迷宮法（全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大鼠大鼠穿梭箱法（全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型（雙側(cè)損毀PD模型）大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛。北京皮下成瘤動物模型造模