痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動物】SPF級SD大鼠,雄性,周齡6~8W,體重:200~250g【方法】1、大鼠麻醉,顱頂脫毛備皮;2、大鼠腦定位儀固定大鼠,顱頂正中切口,長度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫;3、縫線將皮膚左右分開固定,前囟后10mm、矢狀縫左側;4、微量注射器移至開孔處修正骨孔,注射器垂直向顱內插入,緩慢注射無水乙醇15ul,注射完移除注射器,棉球壓迫止血;5、縫合創口后維持25°體溫,等待蘇醒,觀察大鼠狀態。【觀察】術后3天模型大鼠攝食減少、右側肢體跛行、右前肢不負重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯,順時針繞圈前行,2周后癥狀減輕,大鼠于術后4周開始給予動物行為學觀察【檢測】HE檢測對比觀察腦組織是否出現細胞水腫,排列不規則,結構紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質軟化灶和空囊形成,小膠質細胞浸潤,星形膠質細胞肥大、增生等病理表現。曠場測試(OpenFieldTest):實驗用于評估大小鼠的活動性和探索性行為。動物被放置在一個較大的開放性場地內,然后記錄它們的運動軌跡和停留時間。用來評估動物的活動性、焦慮程度、壓力反應等。水迷宮測試。IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發性腎小球疾病,約占原發性腎小球疾病的 1/3。西藏外包動物模型實驗室

可在設定的壓差標準內無極調控,以保障系統對海拔(3000m~7000m)的微負壓進行模擬。并且,進排風風管裝有高效空氣過濾器,使進入飼養倉2的氣體潔凈。實施例3在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,所述高原低氧環境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進風系統13連接,所述惰性氣源與進風系統13之間設置有比例式氣閥,還包括設置在飼養倉2內的嵌入式氧測定儀。本實施例的工作原理:惰性氣源可以是惰性氣體儲備罐或者是液態惰性氣體儲備罐。在模擬低氧環境時,外接惰性氣體儲備罐連接進風系統13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接,通過功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來調節比例式氣閥,通過加惰性氣體來來實現降低氧氣濃度。當倉體內的氧氣濃度較高時,手動打開惰性氣體儲備罐與進風系統之間的氣閥,調節惰性氣體進入量,使倉體內氧氣濃度降低,觀察控制面板上的氧濃度顯示,調整氣閥開度大小,達到需求的氧濃度,以此調節實現高原缺氧環境的模擬。本技術方案采用的惰性氣體為對生命體無危害的惰性氣體。實施例4在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統。湖南豚鼠動物模型建立SD大鼠頸動脈損傷(結扎套管)模型。

飼養倉左右箱體上分別設置有小物件傳遞窗和大物件傳遞窗,所述代謝籠還包括設置在代謝籠上的投料斗、飲水瓶和設置在代謝籠下方的聚糞斗、尿液排出口、糞便排出口。進一步地,所述無極調控微負壓裝置包括進風系統、排風系統和霍尼威爾或西門子調控模塊,所述進風系統設置在功能設備集成底座內,所述排風系統設置在飼養倉頂部。進一步地,所述高原低氧環境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進風系統連接,所述惰性氣源與進風系統之間設置有比例式氣閥,還包括設置在飼養倉內的嵌入式氧測定儀。進一步地,所述高原光照環境模擬裝置包括可見暖光系統和照明亮度無極控制系統,所述可見暖光系統設置飼養倉頂部。進一步地,所述高原溫度環境模擬裝置包括降溫系統、升溫系統、溫控系統和溫度采集顯示系統。進一步地,所述高原濕度環境模擬裝置包括加濕系統、除濕系統、濕度控制系統和濕度采集顯示系統。進一步地,所述動物行為學遠程觀察單元包括coms高清圖像采集系統、數字視頻傳輸系統、頻硬件解壓卡、視頻顯示系統。綜上所述,由于采用了上述技術方案,本實用新型的有益效果是:1、本實用新型非全自動控制系統,需要人為觀察并手動調節隔離器內部環境。
首先,預實驗必須要當做正式實驗來對待(態度要放端正,這是必須的)。預實驗的每一步都需要詳細規劃,多方籌謀。不論是實驗動物的選擇,還是檢測試劑的購買,都盡量和正式實驗統一標準。建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后,再去購買實驗動物。因為動物會長胖,長胖后給藥劑量就要增加,不僅多花錢,并且還容易影響實驗效果。筆者曾經提前將實驗動物買回,但因為特殊原因沒能購買到造模藥物,終只能忍痛割愛將動物贈送他人,白白虧了一筆血汗錢(那批老鼠在我這兒白吃白喝長得太胖,沒辦法用作造模)。動物及試劑購買首先需要考慮:實驗動物品種、體重、性別、周齡(通常根據既往文獻報道可以獲得答案)、數量(需要考慮到實驗有一定動物死亡率或者動物本身會打架互毆,因此需要提前購買足夠的動物)。動物購買的途徑、安置的地點,飲食管理(一般實驗室會有動物房,也可以從其他地方購買),動物免疫證明、倫理證明需要提前準備好。實驗相關的試劑和藥物:比如造模藥物和器械,動物干預所需藥物,陽物選擇及購買(有些藥物購買很困難,必須通過特殊程序才能買到)。如果涉及到有創操作,要提前準備好物(建議提前購買),手術器械。需要了解自身實驗平臺能完成哪些技術。可以簡化實驗操作和樣品收集。

技術實現要素:本發明的目的在于提供利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用,采用該構建方法可以得到視網膜色素變性疾病模型,該模型可表現出視網膜色素變性性疾病特征,該模型可用于視網膜色素變性性疾病的研究,可以幫助闡明rp的發病過程及機制,并為該疾病的或預防提供新的靶標。本發明是這樣實現的:方面,本發明實施例提供了一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法,其包括:敲除目標動物視網膜前體細胞中的基因組中的gm20541基因。znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結構域的轉錄因子,對基因調控起重要的作用。znf124蛋白可穿過核孔進入核內,作為轉錄因子調控其他基因的表達。目前針對znf124蛋白功能的研究報道并不多,對其功能也知之甚少,znf124與一種先天性系統發育疾病dandy-walker復合征(dandy-walkercomplex,dwc)相關。此外,znf124被認為參與了前體生長因子(vegf)對人造血細胞凋亡的抑制作用,表明znf124在人體生命活動中承擔有重要功能。發明人的另一研究表明,znf124基因突變與rp有關,對探索rp的致病機制有極大幫助。因此,深入研究znf124對視網膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。心力衰竭(heart failure)簡稱心衰,是指由于心臟的收縮功能和(或)舒張功能發生障礙。北京兔動物模型構建
放血致失血性貧血小鼠模型。西藏外包動物模型實驗室
所用儀器為bio-rad的化學發光凝膠成像系統。結果見圖1中c和d,可以看出,通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物,對本發明提供的視網膜色素變性疾病模型的構建方法進行說明,gm20541基因敲除的路線如圖2所示,具體操作如下:基因敲除小鼠獲取步驟:1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列loxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子;2利用dna同源重組技術將gm20541基因中的第3個外顯子替換,得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細胞;3利用步驟2得到的胚胎干細胞制備得到含gm20541基因敲除細胞的嵌合體小鼠(圖2);4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育,在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定:實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結果,擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’;sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結果見圖3中a。西藏外包動物模型實驗室