經多級乙醇至水洗：二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸餾水洗2min；4)蘇木素染色5分鐘，自來水沖洗；5)鹽酸乙醇分化30秒；6)自來水浸泡15分鐘；7)置伊紅液2分鐘。8)常規脫水，透明，封片：95％乙醇(i)1min→95％乙醇(ⅱ)1min→100％乙醇(i)1min→100％乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3：1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性樹脂封固。9)顯微鏡下拍照。結果發現在4個月時，與ctrl(對照)小鼠比較，sixko小鼠的視網膜外核層已經開始變薄，表明感光細胞死亡(圖7)。實施例5視網膜冰凍切片免疫染色：取4月齡的由實施例2得到的gm20541基因敲除純合子小鼠斷頸處死后，快速取眼球，并放入4％的pfa中，冰上固定15min后，在角膜上剪口，然后繼續冰上固定。2h后，pbs緩沖液沖洗3遍，然后將眼球置于30％蔗糖溶液中脫水2h，然后解剖鏡下剪去角膜及晶體，oct包埋并迅速置于-80℃冰箱冷凍。大約10min后，取出oct包埋的眼球，置于冰凍切片機-25℃平衡約30min后即可切片。切片厚度為12μm。切片完成后，選取質量較高的片子于37℃烘箱放置30min，然后免疫組化筆在有視網膜組織的地方畫圈，pbs洗三遍以去除oct。上面是我們已構建成功的動物模型，我們還可以根據客戶實驗方案構建其它模型，具體要求請咨詢。江蘇C57動物模型技術

可在設定的壓差標準內無極調控，以保障系統對海拔(3000m～7000m)的微負壓進行模擬。并且，進排風風管裝有高效空氣過濾器，使進入飼養倉2的氣體潔凈。實施例3在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述高原低氧環境模擬裝置包括惰性氣源，所述惰性氣源與進風系統13連接，所述惰性氣源與進風系統13之間設置有比例式氣閥，還包括設置在飼養倉2內的嵌入式氧測定儀。本實施例的工作原理：惰性氣源可以是惰性氣體儲備罐或者是液態惰性氣體儲備罐。在模擬低氧環境時，外接惰性氣體儲備罐連接進風系統13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接，通過功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來調節比例式氣閥，通過加惰性氣體來來實現降低氧氣濃度。當倉體內的氧氣濃度較高時，手動打開惰性氣體儲備罐與進風系統之間的氣閥，調節惰性氣體進入量，使倉體內氧氣濃度降低，觀察控制面板上的氧濃度顯示，調整氣閥開度大小，達到需求的氧濃度，以此調節實現高原缺氧環境的模擬。本技術方案采用的惰性氣體為對生命體無危害的惰性氣體。實施例4在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統。上海皮下成瘤動物模型手術好的動物模型能夠較好地模擬疾病狀態，為的研究提供可能。

根據gm20541的cdna序列設計引物：gm20541-cdna-f：5’-tcggtctcatcttcattccc-3；gm20541-cdna-r：5’-ggaaggctctgttccggtat-3；(g)以提取的cdna為模板，進行rt-pcr。擴增后進行電泳。結果見圖4中b，可以看出，通過rt-pcr方法檢測gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網膜中表達量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對照，sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠；gm20541rnalevel是指rna表達水平相對變化，以野生型表達水平為1。實施例3對4月齡的gm20541基因敲除純合子小鼠進行erg視力檢測：1暗適應動物應整夜暗適應，環境應做到沒有光線；2次日麻醉：稱重，腹腔內注射；宜深度麻醉；3動物固定及散瞳：麻醉完成后，在暗紅光照明下將小鼠用膠帶固定在動物試驗平臺的前方：需保證小鼠正"趴"，即相對于閃光刺激器的刺激口，雙眼高度一致，充分暴露，滴加散瞳劑。4電極安裝：將視網膜電圖儀(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)預熱后，在耳夾電極涂上導電膏，夾尾巴，插入放大器“地”接口；雙頭的針電極插入后頸皮(大約在兩耳中間)，同時接兩個通道的“負”接口；金環電極夾在動物實驗平臺的電極支架上，仔細調整其角度。

本發明實施例提供了由上述的方法所得到的視網膜色素變性疾病模型在視網膜色素變性性疾病研究中的應用。進一步地，在本發明的一些實施方案中，所述研究是以非疾病的為目的。通過本發明的構建方法得到的動物模型其具有典型視網膜色素變性性疾病特征，其具有非常廣闊的應用前景，例如將其用于研究視網膜色素變性性疾病的發病過程、發病機制，為深入了解研究視網膜色素變性性疾病提供基礎。又或者將其用于篩選用于預防或視網膜色素變性性疾病藥物、用于評價藥物的療效或預后等。第三方面，本發明實施例提供了由上述的方法所得到的視網膜色素變性疾病模型在篩選用于預防或視網膜色素變性性疾病藥物中的應用。在本發明方面提供了構建方法的基礎上，本領域技術人員容易想到將由該方法得到的視網膜色素變性疾病模型用于篩選預防或視網膜色素變性性疾病藥物或其他類似領域，這也是屬于本發明的保護范圍。進一步地，在本發明的一些實施方案中，所述應用包括：向所述視網膜色素變性疾病模型施用候選藥物，如果所述視網膜色素變性疾病模型在施用所述候選藥物前后發生如下變化中的至少一種，則指示所述候選藥物可以作為預防或視網膜色素變性性疾病的藥物：(1)施用所述候選藥物后。博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分，其毒副作用之一是引起肺纖維化。

痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動物】SPF級SD大鼠，雄性，周齡6~8W，體重：200~250g【方法】1、大鼠麻醉，顱頂脫毛備皮；2、大鼠腦定位儀固定大鼠，顱頂正中切口，長度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫；3、縫線將皮膚左右分開固定，前囟后10mm、矢狀縫左側；4、微量注射器移至開孔處修正骨孔，注射器垂直向顱內插入，緩慢注射無水乙醇15ul，注射完移除注射器，棉球壓迫止血；5、縫合創口后維持25°體溫，等待蘇醒，觀察大鼠狀態。【觀察】術后3天模型大鼠攝食減少、右側肢體跛行、右前肢不負重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯，順時針繞圈前行，2周后癥狀減輕，大鼠于術后4周開始給予動物行為學觀察【檢測】HE檢測對比觀察腦組織是否出現細胞水腫,排列不規則,結構紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質軟化灶和空囊形成,小膠質細胞浸潤,星形膠質細胞肥大、增生等病理表現。曠場測試（OpenFieldTest）：實驗用于評估大小鼠的活動性和探索性行為。動物被放置在一個較大的開放性場地內，然后記錄它們的運動軌跡和停留時間。用來評估動物的活動性、焦慮程度、壓力反應等。水迷宮測試。用血管內線栓阻斷法制備大鼠 MCAO模型。已被腦血管病研究者接受和采用。西藏實驗動物模型構建

膽管結扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型。江蘇C57動物模型技術

常見的有組織病理染色、WesternBlot、PCR等），實驗儀器是否需要預約使用。如果需要外送生物公司檢測，需要提前聯系好商家，以及了解清楚樣本如何獲取，如何運輸。飼養動物及干預動物購買后需要將時間節點提前規劃好，比如，周需要做什么？測量體重？觀察飲食？測量需要的指標？中間有無特殊操作？比如灌胃、測量體重、做CT檢測、取血？……第幾周取材？取材需要哪些組織？預實驗方案就要提前設計清楚以上內容。取材及樣品準備取材需要提前到動物房禁食、稱體重、取出動物、手術器械的消毒、組織固定所需要的試劑和EP管，WesternBlot和PCR所需要的樣本儲存條件。比如凍存管、EP管，是否需要冰塊？是否需要液氮？取材當天需要多少人？是否需要請人幫忙？如果所需要取出的樣本較多，建議大家請人一起幫忙，流水線作業，這樣能節省時間，并且能保證樣品的質量。如果請人，每個人需要負責哪一板塊的工作，比如誰負責麻醉，誰負責取血液，誰負責取，誰負責拍照、誰負責儲存，都需要提前規劃交代清楚。實驗指標檢測如果是需要自己做的檢測，比如常見的WesternBlot、PCR，建議提前可以看看教程（無論是視頻還是貼吧，都要自己多方參考）。有了一定的理論基礎后。江蘇C57動物模型技術