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湖南小鼠動物模型培養

來源: 發布時間:2025-08-31

或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下,由語句“包括一個……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設備中還存在另外的相同要素。以下結合實施例對本實用新型的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例1本實用新型提供一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,包括功能設備集成底座1和設置在功能設備集成底座1上的飼養倉2,所述飼養倉2具有無極調控微負壓裝置、高原低氧環境模擬裝置、高原光照環境模擬裝置15、高原溫度環境模擬裝置16、高原濕度環境模擬裝置17、動物行為學遠程觀察單元18,所述飼養倉2內設置有若干代謝籠3,飼養倉2前后箱體上設置有觀察窗4和若干操作窗5,飼養倉2左右箱體上分別設置有小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,所述代謝籠3還包括設置在代謝籠3上的投料斗8、飲水瓶9和設置在代謝籠3下方的聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12。本實施例的工作原理:本裝置的各個功能均通過設置在飼養倉2上的功能控制面板19控制,本裝置外形采用304不銹鋼,具有良好的氣密性。實驗動物送入飼養倉2內部后,關閉小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,通過功能控制面板19實現飼養倉2內部環境模擬。博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分,其毒副作用之一是引起肺纖維化。湖南小鼠動物模型培養

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輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼,二通道正極接左眼。通過針管對雙眼滴生理鹽水,改善金環電極及角膜的接觸效果。保證兩個金環電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號確認無誤后,關閉暗紅光。可以先嘗試記錄一下暗適應光強為·s/m2的erg檢測,確認一下信號的質量:如果雙眼的振幅出現了與預期不同的較大差異,建議再次檢查金環電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應光強為·s/m2的信號。需要注意的是,完成暗適應·s/m2光強檢測后,系統將自動打開背景光。同樣的,需要打開定時器,光適應10-15分鐘,再記錄。6經過光適應后,依次記錄光適應·s/m2以及·s/m2光強下波形,記錄·s/m2光強下閃爍視網膜誘發電位。結果發現在4個月時,與ctrl(對照)小鼠比較,cko(gm20541基因敲除純合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗適應和光適應條件下均明顯降低,表明gm20541敲除后導致視力受損(見圖5和圖6)。實施例4視網膜石蠟切片h&e染色:對4月齡小鼠的視網膜進行石蠟切片、蘇木精-伊紅染色法(h&e染色方法)染色,具體操作如下:1)快速取小鼠眼球組織,并置于固定液中固定24h;2)石蠟包埋,切片,厚度為4μm;3)切片常規用二甲苯脫蠟。上海動物模型建模大腦中動脈(MCA)為臨床上發生腦缺血損傷常見的部位之一。

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結果發現在這些組織中,gm20541均有表達,說明該基因可能在體內發揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測gm20541基因在不同組織中的表達。方法:(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾,充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細胞后,在冰上裂解20min。(3)4℃,16000g離心10min后,取上清轉移至另一干凈離心管,加入50μl的蛋白上樣液,混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后,分別取20μl,160v電壓進行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結束后,根據需要,裁剪適當大小的硝酸纖維素膜,按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙,并趕去氣泡,轉膜槽放入冰水浴中,采用恒流,轉膜2h。(6)轉膜完畢后,純水沖洗硝酸纖維素膜一遍,晾干并標記。然后用8%的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后,加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說明書)稀釋于封閉液的一抗,4℃孵育過夜。(8)回收一抗,1×tbst緩沖液洗膜4次,每次10min,根據一抗來源,選擇合適二抗,用1×tbst稀釋辣根過氧化氫酶(hrp)標記的二抗,室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結束后,用1×tbst洗膜3次,每次10min,用thermo的elc發光試劑盒檢測蛋白。

曾為國內、外醫藥企業做過多個藥物的臨床前藥理研究,研發產品已成功上市。在中國工作期間參加完成10項課題,在美國參與完成了NIH(NationalInstitutesofHealth)及AHA(AmericanHeartAssociation)的多個基金項目。發表學術論文60余篇,曾獲得省部級一、二等科技獎7項。在學術期刊如Nature,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,JournalofClinicalInvestigation,Circulation,CirculationResearch,Cell,NatureCommunications,NatureMetabolism,ScienceTranslationalMedicine發表多篇論文。手術疾病模型精選案例1.心肌梗死模型(左冠狀動脈結扎術)與缺血再灌注損傷模型2.主動脈弓縮窄3.慢性心力衰竭模型賽業生物可提供的小動物手術疾病模型及相關服務心腦血管系統手術心肌梗死模型(左冠狀動脈結扎術)心臟缺血再灌注損傷模型主動脈弓縮窄術(TAC)升主動脈縮窄術腹主動脈縮窄術(模型)心力衰竭模型肺動脈高壓模型大腦中動脈栓塞。人類疾病的動物模型是指各種醫學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現的動物。

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微波爐中融化后制成1%的瓊脂糖膠。取10μlpcr產物于加樣孔中,120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結果,wt表示野生型對照,條帶大小為223bp;het表示雜合子,有兩個條帶223bp和358bp;sixko表示純合子,條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3-cre鑒定結果。six3-cre大小為200bp。根據圖4中a的結果,顯示所采用的鑒定方法可對新生小鼠的基因型進行有效鑒定。其中,gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子),并進行相關表型的驗證。(5)rt-pcr實驗分析six3-cre敲除小鼠視網膜中基因敲除效率驗證,方法如下:(a)分別分離野生型和突變型小鼠視網膜組織,置于,加入1mltrizol提取液,室溫20分鐘;(b)加入200μl氯仿,充分混勻,室溫靜置10分鐘;(c)將樣品置于4度離心機,10000轉離心15分鐘;(d)小心吸取上清液,加入等體積異丙醇,充分混勻,10000轉離心沉淀rna;(e)75%乙醇清洗析出的總rna,離心再次沉淀,然后晾干加入depc水溶解;(f)提取的總rna用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。肺泡上皮細胞及內皮損傷,造成彌漫性肺間質及肺泡水腫,導致的急性低氧性呼吸功能不全。湖北實驗動物模型飼養

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但是目前對znf124的研究還處于初期階段,其小鼠同源基因為gm20541(predictedgene20541,mgi:5142006),該基因位于小鼠17號染色體3,全長2750kb,其cdna全長1406bp,包含3個外顯子,其cdna序列如seqid所示,如下:gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttactggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcactgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaagacatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtgataaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaaactctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaatacataaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgcatgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatgtagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactcacagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcgtcttctagaacataaaaggacacatactggagagaaaccctatgaatgtaaccaatgtggtaaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatagtctccaaatacata。湖南小鼠動物模型培養

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