橄欖油聯合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱：橄欖油聯合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：5周5、實驗動物體重：150g-180g6、實驗動物環境：SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2016橄欖油聯合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型20周詢價1、實驗方法：橄欖油聯合酒精誘導。按，背頸部皮下注射50％CCl4的橄欖油溶液，**注射量加倍（6mL/kg體重），2次/周，皮下注射共13周；造模前4周為10%酒精溶液喂養代替飲水，4周后改為30%酒精溶液灌胃（30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重，3次/周）。繼續正常飼養1個月。實驗結束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死，取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準：門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加，差異有統計學意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明：1、如有特殊要求，請另詢價。2、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動實驗。裸鼠皮下成瘤：前肢近腋后皮下注射細胞懸液； 裸鼠原位瘤：胰腺成瘤；尾靜脈注射成瘤。湖南高脂高糖動物模型構建

所述高原光照環境模擬裝置15包括可見暖光系統和照明亮度無極控制系統，所述可見暖光系統設置飼養倉2頂部。本實施例的工作原理:本系統集成了可見暖光系統(可模擬高原紅外線和紫外線)與照明亮度無極控制系統，需要燈光時，可通過燈光系統開啟紫外燈以及照明燈，并可根據所需實現亮度調節，通過日光燈加紫外線燈來實現高原高紫外線光照環境。實施例5在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述高原溫度環境模擬裝置16包括降溫系統、升溫系統、溫控系統和溫度采集顯示系統。本實施例的工作原理：本系統配置降溫系統、升溫系統、溫控系統與溫度采集顯示系統使系統內溫度可無極調控，以保障海拔(3000m～7000m)高原溫度環境進行模擬，溫度調節通過冷暖風機來實現，就是和空調一樣的原理。實施例6在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述高原濕度環境模擬裝置17包括加濕系統、除濕系統、濕度控制系統和濕度采集顯示系統。本實施例的工作原理：本系統配置加濕系統、除濕系統、濕度控制系統與濕度采集顯示系統使系統內濕度可無極調控，以保障海拔(3000m～7000m)高原濕度環境進行模擬。湖北大鼠動物模型實驗缺血性腦血管病(ICVD)是威脅人類健康與生存的主要疾病之一。

IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型，并觀察模型的生化及病理指標特點。【材料】1、酸化水：鹽酸調滅菌水；2、蓖麻油+CCl4：5:1配制；3、LPS：；4、血清白蛋白BSA：800mg/kg用量，滅菌水配制；【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次，配制160mg/ml，灌胃100ul/只，持續8周；2、同時皮下注射蓖麻油和CCl4（5:1），1次/周，持續8周；3、分別于第6、8周以（）尾靜脈注射LPS，1次/周；4、每兩周取24h尿液一次觀察尿蛋白及紅細胞；5、每日觀察精神、飲食、大小便，第9周處死，取血和腎、肝做相應檢查；6、取尿液后2000r/min離心10min，取上清用全自動生化儀檢測尿蛋白肌酐比值，鏡下觀察尿沉渣中有無紅細胞。

所用儀器為bio-rad的化學發光凝膠成像系統。結果見圖1中c和d，可以看出，通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物，對本發明提供的視網膜色素變性疾病模型的構建方法進行說明，gm20541基因敲除的路線如圖2所示，具體操作如下：基因敲除小鼠獲取步驟：1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列loxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子；2利用dna同源重組技術將gm20541基因中的第3個外顯子替換，得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細胞；3利用步驟2得到的胚胎干細胞制備得到含gm20541基因敲除細胞的嵌合體小鼠(圖2)；4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育，在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定：實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結果，擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r，擴增產物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’；sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結果見圖3中a。急性肺損傷(acute lung injury，ALI)。

但是人為調節更能直接的根據所需模擬出實驗環境，相對于自動控制的環境模擬能有效減少意外情況的發生。2、本系統設置的多個代謝籠可以同時培養多種動物，造模動物多。3、本實用新型的系統能夠很好地模擬高原壓力、溫度、濕度以及低氧環境，還具有動物行為學遠程觀察功能，保障了實驗過程中實時監控與實驗結束后操作過程的溯源。附圖說明為了更清楚地說明本實用新型實施例的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，應當理解，以下附圖示出了本實用新型的某些實施例，因此不應被看作是對范圍的限定，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。圖1為本實用新型一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統的主視圖；圖2為本實用新型一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統的立體結構示意圖；圖3為代謝籠的立體結構示意圖；圖中標記：1-功能設備集成底座，2-飼養倉，3-代謝籠，4-觀察窗，5-操作窗，6-小物件傳遞窗，7-大物件傳遞窗，8-投料斗，9-飲水瓶，10-聚糞斗，11-尿液排出口，12-糞便排出口，13-進風系統，14-排風系統，15-高原光照環境模擬裝置，16-高原溫度環境模擬裝置。通過建立腦缺血-再灌注動物模型，模擬人類ICVD的病理過程。湖北皮下成瘤動物模型服務

IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發性腎小球疾病,約占原發性腎小球疾病的 1/3。湖南高脂高糖動物模型構建

一種是用beta巰基乙醇打開蛋白質分子二硫鍵的，另一種是用DTT(二硫蘇糖醇)。兩者的作用是一樣的，但特點不一樣，前者更容易與氧氣反應，穩定性比后者差，如果在常溫下暴露在空中，前者只能維持24小時的活性，后者卻可以維持7天左右。所以該如何選擇?如果是蛋白樣品較少，跑幾次就可以用完的樣品，這時選擇beta巰基乙醇。如果樣品很多，計劃跑上幾十次的，優先選擇DTT,建議變性后分裝保存。二、SDS-PAGE凝膠配制1、配膠前準備首先強調一下，一塊好的膠是跑好蛋白的前提，所以這個環節也不容忽視。玻璃板的選擇，一種是1毫米厚度的，另一種是，這個厚度選擇也是有講究的，如果上樣體積小于10微升，優先選1毫米，否則選。原因是什么?答案在轉膜部分揭曉。還有分離膠的濃度也要選擇適合的。然后玻璃板和梳子要洗干凈，晾干。裝板，注意厚板和薄板的底部要對齊，否則會漏膠。加制膠的各成分前，要觀察液體是否有沉淀，有沉淀的盡量不要用。2、制膠按配方說明依次加入各組分，加完SDS后先簡單手動搖勻幾下，然后迅速加入過硫酸銨和TEMED,搖勻，緊接著就灌膠。然后我習慣用95%的酒精壓膠，我也用過純水，感覺純水壓沒那么好，由于水的密度較大，會把分界處的膠壓得膨大。湖南高脂高糖動物模型構建