擴增產物為。其中a2,3,6,9,10,b1為陽性。擴增3’端長臂使用引物:neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’;gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’結果見圖3中b,擴增產物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。5將步驟4得到的雜合子小鼠動物與轉基因鼠flper鼠交配繁育,得到gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠;6將步驟5得到的gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠相互交配繁育,得到gm20541基因條件性敲除純合子小鼠;7將步驟6得到的gm20541基因條件性敲除純合子動物與轉six3-cre基因動物交配,得到視網膜前體細胞gm20541基因敲除小鼠。轉基因鼠flper鼠購自美國捷克森實驗室(品系名稱:(rosa)26sortm1(flp1)dym/rainj)。six3-cre轉基因小鼠(mgi:3574771)由美國德克薩斯大學安德森中心贈送。six3是一個前腦腹側和視網膜前體細胞的標志性轉錄因子,其特異性驅動cre基因在視網膜前體細胞表達,cre蛋白可以進入細胞核,識別基因組上loxp位點,實現基因敲除。基因敲除小鼠鑒定步驟:對上述視網膜前體細胞敲除gm20541基因的小鼠的基因型鑒定,操作如下:(1)剪小鼠尾梢少許組織樣本,置于干凈的;(2)在離心管中加入100μl裂解液。動物模型的優越性主要表現在以下幾下方面。西藏外包動物模型造模

堿燒傷致角膜損傷大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2020堿燒傷致角膜損傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結膜囊多余液體,將統一規格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜90s后移去,立即用滅菌水沖洗結膜囊及角膜2min。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。西藏模式動物模型建模致使腎小球系膜這以 IgA 為主的免疫復合物沉積,同時使系膜細胞增生,基質增多。

所用儀器為bio-rad的化學發光凝膠成像系統。結果見圖1中c和d,可以看出,通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物,對本發明提供的視網膜色素變性疾病模型的構建方法進行說明,gm20541基因敲除的路線如圖2所示,具體操作如下:基因敲除小鼠獲取步驟:1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列loxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子;2利用dna同源重組技術將gm20541基因中的第3個外顯子替換,得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細胞;3利用步驟2得到的胚胎干細胞制備得到含gm20541基因敲除細胞的嵌合體小鼠(圖2);4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育,在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定:實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結果,擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’;sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結果見圖3中a。
輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼,二通道正極接左眼。通過針管對雙眼滴生理鹽水,改善金環電極及角膜的接觸效果。保證兩個金環電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號確認無誤后,關閉暗紅光??梢韵葒L試記錄一下暗適應光強為·s/m2的erg檢測,確認一下信號的質量:如果雙眼的振幅出現了與預期不同的較大差異,建議再次檢查金環電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應光強為·s/m2的信號。需要注意的是,完成暗適應·s/m2光強檢測后,系統將自動打開背景光。同樣的,需要打開定時器,光適應10-15分鐘,再記錄。6經過光適應后,依次記錄光適應·s/m2以及·s/m2光強下波形,記錄·s/m2光強下閃爍視網膜誘發電位。結果發現在4個月時,與ctrl(對照)小鼠比較,cko(gm20541基因敲除純合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗適應和光適應條件下均明顯降低,表明gm20541敲除后導致視力受損(見圖5和圖6)。實施例4視網膜石蠟切片h&e染色:對4月齡小鼠的視網膜進行石蠟切片、蘇木精-伊紅染色法(h&e染色方法)染色,具體操作如下:1)快速取小鼠眼球組織,并置于固定液中固定24h;2)石蠟包埋,切片,厚度為4μm;3)切片常規用二甲苯脫蠟。小鼠腎纖維化(UUO)模型建立。

然后5%的nds。含有%triton)封閉通透2h,孵育一抗,4℃過夜。第二天,pbs清洗三次后,孵育相應的熒光二抗,然后再用pbs清洗三次,封片,觀察。結果見圖8,在小鼠4月齡時,通過視網膜冰凍組織切片染色外節抗體rhodopsin以及內節抗體nak-atpase后發現,相較于野生型小鼠,gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網膜外節明顯縮短,表現出了明顯退化表征。綜上,可以看出,本發明實施例以小鼠為例,通過cre-loxp基因敲除技術,在小鼠視網膜前體細胞中特異性敲除gm20541基因,小鼠表現出了視力受損,視細胞外節變短退化以及視細胞丟失等視網膜色素變性疾病典型表征。由此充分說明,在視網膜前體細胞敲除gm20541基因,可以使目標動物表現出視網膜色素變性疾病。視網膜前體細胞敲除gm20541基因的動物,可以作為視網膜色素變性疾病模型。該疾病模型可以用于視網膜色素變性疾病研究等領域中,為該疾病的研究例如發病過程、機制以及相關藥物的篩選提供一種新的模型。雖然本發明實施例展示了在小鼠的視網膜前體細胞敲除gm20541基因后的表型,但本領域技術人員容易理解到,小鼠作為哺乳動物的代表性動物,在其他的哺乳類動物中敲除gm20541基因或其同源基因也應當具有相似的表型。LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。西藏腦定位動物模型服務
可提供專業的大鼠小鼠動物疾病模型技術,包含心血管系統神經系統、呼吸系統、生殖、泌尿系統、成瘤系統等。西藏外包動物模型造模
實施例7在實施例6的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,所述動物行為學遠程觀察單元18包括coms高清圖像采集系統、數字視頻傳輸系統、頻硬件解壓卡、視頻顯示系統。本實施例的工作原理:系統內配置coms高清圖像采集系統(支持icp/ip網絡通訊協議)、數字視頻傳輸系統、頻硬件解壓卡(usb或pci接口用戶自選)、視頻顯示系統(用戶自備),保障了實驗過程中實時監控與實驗結束后操作過程的溯源。例如,在飼養倉2上方裝高精密攝像頭,搭載手機app,可360°監控動物的行為,并能實時錄像,圖像采集等,通過監控錄像來實現動物學行為觀察。以上所述為本實用新型的較佳實施例而已,并不用以限制本實用新型,凡在本實用新型的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等,均應包含在本實用新型的保護范圍之內。西藏外包動物模型造模