技術實現要素:本發明的目的在于提供利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用,采用該構建方法可以得到視網膜色素變性疾病模型,該模型可表現出視網膜色素變性性疾病特征,該模型可用于視網膜色素變性性疾病的研究,可以幫助闡明rp的發病過程及機制,并為該疾病的或預防提供新的靶標。本發明是這樣實現的:方面,本發明實施例提供了一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法,其包括:敲除目標動物視網膜前體細胞中的基因組中的gm20541基因。心力衰竭(heart failure)簡稱心衰,是指由于心臟的收縮功能和(或)舒張功能發生障礙。西藏小鼠動物模型手術

所用儀器為bio-rad的化學發光凝膠成像系統。結果見圖1中c和d,可以看出,通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標動物,對本發明提供的視網膜色素變性疾病模型的構建方法進行說明,gm20541基因敲除的路線如圖2所示,具體操作如下:基因敲除小鼠獲取步驟:1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列loxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子;2利用dna同源重組技術將gm20541基因中的第3個外顯子替換,得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細胞;3利用步驟2得到的胚胎干細胞制備得到含gm20541基因敲除細胞的嵌合體小鼠(圖2);4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育,在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定:實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結果,擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’;sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結果見圖3中a。江蘇基因敲除動物模型構建博來霉素誘導急性肺損傷小鼠模型。

輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼,二通道正極接左眼。通過針管對雙眼滴生理鹽水,改善金環電極及角膜的接觸效果。保證兩個金環電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號確認無誤后,關閉暗紅光。可以先嘗試記錄一下暗適應光強為·s/m2的erg檢測,確認一下信號的質量:如果雙眼的振幅出現了與預期不同的較大差異,建議再次檢查金環電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應光強為·s/m2的信號。需要注意的是,完成暗適應·s/m2光強檢測后,系統將自動打開背景光。同樣的,需要打開定時器,光適應10-15分鐘,再記錄。6經過光適應后,依次記錄光適應·s/m2以及·s/m2光強下波形,記錄·s/m2光強下閃爍視網膜誘發電位。結果發現在4個月時,與ctrl(對照)小鼠比較,cko(gm20541基因敲除純合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗適應和光適應條件下均明顯降低,表明gm20541敲除后導致視力受損(見圖5和圖6)。實施例4視網膜石蠟切片h&e染色:對4月齡小鼠的視網膜進行石蠟切片、蘇木精-伊紅染色法(h&e染色方法)染色,具體操作如下:1)快速取小鼠眼球組織,并置于固定液中固定24h;2)石蠟包埋,切片,厚度為4μm;3)切片常規用二甲苯脫蠟。
可在設定的壓差標準內無極調控,以保障系統對海拔(3000m~7000m)的微負壓進行模擬。并且,進排風風管裝有高效空氣過濾器,使進入飼養倉2的氣體潔凈。實施例3在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,所述高原低氧環境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進風系統13連接,所述惰性氣源與進風系統13之間設置有比例式氣閥,還包括設置在飼養倉2內的嵌入式氧測定儀。本實施例的工作原理:惰性氣源可以是惰性氣體儲備罐或者是液態惰性氣體儲備罐。在模擬低氧環境時,外接惰性氣體儲備罐連接進風系統13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接,通過功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來調節比例式氣閥,通過加惰性氣體來來實現降低氧氣濃度。當倉體內的氧氣濃度較高時,手動打開惰性氣體儲備罐與進風系統之間的氣閥,調節惰性氣體進入量,使倉體內氧氣濃度降低,觀察控制面板上的氧濃度顯示,調整氣閥開度大小,達到需求的氧濃度,以此調節實現高原缺氧環境的模擬。本技術方案采用的惰性氣體為對生命體無危害的惰性氣體。實施例4在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統。LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。

17-高原濕度環境模擬裝置,18-動物行為學遠程觀察單元,19-功能控制面板。具體實施方式為了使本實用新型的目的、技術方案及優點更加清楚明白,以下結合附圖及實施例,對本實用新型進行進一步詳細說明。應當理解,此處所描述的具體實施例用以解釋本實用新型,并不用于限定本實用新型,即所描述的實施例是本實用新型一部分實施例,而不是全部的實施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實用新型實施例的組件可以以各種不同的配置來布置和設計。因此,以下對在附圖中提供的本實用新型的實施例的詳細描述并非旨在限制要求保護的本實用新型的范圍,而是表示本實用新型的選定實施例。基于本實用新型的實施例,本領域技術人員在沒有做出創造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例,都屬于本實用新型保護的范圍。需要說明的是,術語“”和“第二”等之類的關系術語用來將一個實體或者操作與另一個實體或操作區分開來,而不一定要求或者暗示這些實體或操作之間存在任何這種實際的關系或者順序。而且,術語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設備不包括那些要素,而且還包括沒有明確列出的其他要素。合理建立周圍性面癱動物模型對進一步深入研究具有重要意義。湖北皮下成瘤動物模型實驗
面神經受損而致面部表情肌群的運動功能障礙,對患者的心理和日常生活造成很大的影響。西藏小鼠動物模型手術
本實用新型屬于動物實驗設備技術領域,具體涉及一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統。背景技術:高原環境模擬系統可以在非高原地區“制造”出不同海拔高度和氣候條件,模擬各種高原缺氧環境,使實驗動物在一定時間內根據實驗需求達到預期的高原反應癥狀,使實驗動物表現出高原性疾病,為高原疾病研究人員提供高原疾病模型動物,便于研究或預防高原性疾病的藥物。現有的環境模擬系統可以模擬實現高原光照和低氧環境,但模型成功率較低、動物死亡率較高、造模動物種類單一。技術實現要素:本實用新型的目的在于:提供一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,解決現有高原環境模擬系統中存在的模型成功率較低、動物死亡率較高、造模動物種類單一的問題。本實用新型采用的技術方案如下:一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,包括功能設備集成底座和設置在功能設備集成底座上的飼養倉,所述飼養倉具有無極調控微負壓裝置、高原低氧環境模擬裝置、高原光照環境模擬裝置、高原溫度環境模擬裝置、高原濕度環境模擬裝置、動物行為學遠程觀察單元,所述飼養倉內設置有若干代謝籠,飼養倉前后箱體上設置有觀察窗和若干操作窗。西藏小鼠動物模型手術