擴增產物為。其中a2,3,6,9,10,b1為陽性。擴增3’端長臂使用引物：neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’；gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’結果見圖3中b，擴增產物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。5將步驟4得到的雜合子小鼠動物與轉基因鼠flper鼠交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠；6將步驟5得到的gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠相互交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除純合子小鼠；7將步驟6得到的gm20541基因條件性敲除純合子動物與轉six3-cre基因動物交配，得到視網膜前體細胞gm20541基因敲除小鼠。轉基因鼠flper鼠購自美國捷克森實驗室(品系名稱：(rosa)26sortm1(flp1)dym/rainj)。six3-cre轉基因小鼠(mgi：3574771)由美國德克薩斯大學安德森中心贈送。six3是一個前腦腹側和視網膜前體細胞的標志性轉錄因子，其特異性驅動cre基因在視網膜前體細胞表達，cre蛋白可以進入細胞核，識別基因組上loxp位點，實現基因敲除。基因敲除小鼠鑒定步驟：對上述視網膜前體細胞敲除gm20541基因的小鼠的基因型鑒定，操作如下：(1)剪小鼠尾梢少許組織樣本，置于干凈的；(2)在離心管中加入100μl裂解液。卵巢切除致骨質疏松大鼠模型。寧夏裸鼠動物模型飼養

經多級乙醇至水洗：二甲苯(i)5min→二甲苯(ⅱ)5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸餾水洗2min；4)蘇木素染色5分鐘，自來水沖洗；5)鹽酸乙醇分化30秒；6)自來水浸泡15分鐘；7)置伊紅液2分鐘。8)常規脫水，透明，封片：95％乙醇(i)1min→95％乙醇(ⅱ)1min→100％乙醇(i)1min→100％乙醇(ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3：1)1min→二甲苯(i)1min→二甲苯(ⅱ)1min→中性樹脂封固。9)顯微鏡下拍照。結果發現在4個月時，與ctrl(對照)小鼠比較，sixko小鼠的視網膜外核層已經開始變薄，表明感光細胞死亡(圖7)。實施例5視網膜冰凍切片免疫染色：取4月齡的由實施例2得到的gm20541基因敲除純合子小鼠斷頸處死后，快速取眼球，并放入4％的pfa中，冰上固定15min后，在角膜上剪口，然后繼續冰上固定。2h后，pbs緩沖液沖洗3遍，然后將眼球置于30％蔗糖溶液中脫水2h，然后解剖鏡下剪去角膜及晶體，oct包埋并迅速置于-80℃冰箱冷凍。大約10min后，取出oct包埋的眼球，置于冰凍切片機-25℃平衡約30min后即可切片。切片厚度為12μm。切片完成后，選取質量較高的片子于37℃烘箱放置30min，然后免疫組化筆在有視網膜組織的地方畫圈，pbs洗三遍以去除oct。湖南腦定位動物模型實驗室故大腦中動脈阻塞(MCAO)模型被用于局灶性腦缺血的研究。

可在設定的壓差標準內無極調控，以保障系統對海拔(3000m～7000m)的微負壓進行模擬。并且，進排風風管裝有高效空氣過濾器，使進入飼養倉2的氣體潔凈。實施例3在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述高原低氧環境模擬裝置包括惰性氣源，所述惰性氣源與進風系統13連接，所述惰性氣源與進風系統13之間設置有比例式氣閥，還包括設置在飼養倉2內的嵌入式氧測定儀。本實施例的工作原理：惰性氣源可以是惰性氣體儲備罐或者是液態惰性氣體儲備罐。在模擬低氧環境時，外接惰性氣體儲備罐連接進風系統13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接，通過功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來調節比例式氣閥，通過加惰性氣體來來實現降低氧氣濃度。當倉體內的氧氣濃度較高時，手動打開惰性氣體儲備罐與進風系統之間的氣閥，調節惰性氣體進入量，使倉體內氧氣濃度降低，觀察控制面板上的氧濃度顯示，調整氣閥開度大小，達到需求的氧濃度，以此調節實現高原缺氧環境的模擬。本技術方案采用的惰性氣體為對生命體無危害的惰性氣體。實施例4在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統。

一種是用beta巰基乙醇打開蛋白質分子二硫鍵的，另一種是用DTT(二硫蘇糖醇)。兩者的作用是一樣的，但特點不一樣，前者更容易與氧氣反應，穩定性比后者差，如果在常溫下暴露在空中，前者只能維持24小時的活性，后者卻可以維持7天左右。所以該如何選擇?如果是蛋白樣品較少，跑幾次就可以用完的樣品，這時選擇beta巰基乙醇。如果樣品很多，計劃跑上幾十次的，優先選擇DTT,建議變性后分裝保存。二、SDS-PAGE凝膠配制1、配膠前準備首先強調一下，一塊好的膠是跑好蛋白的前提，所以這個環節也不容忽視。玻璃板的選擇，一種是1毫米厚度的，另一種是，這個厚度選擇也是有講究的，如果上樣體積小于10微升，優先選1毫米，否則選。原因是什么?答案在轉膜部分揭曉。還有分離膠的濃度也要選擇適合的。然后玻璃板和梳子要洗干凈，晾干。裝板，注意厚板和薄板的底部要對齊，否則會漏膠。加制膠的各成分前，要觀察液體是否有沉淀，有沉淀的盡量不要用。2、制膠按配方說明依次加入各組分，加完SDS后先簡單手動搖勻幾下，然后迅速加入過硫酸銨和TEMED,搖勻，緊接著就灌膠。然后我習慣用95%的酒精壓膠，我也用過純水，感覺純水壓沒那么好，由于水的密度較大，會把分界處的膠壓得膨大。橄欖油聯合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型。

本發明涉及醫學工程技術領域，具體而言，涉及一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用。背景技術：視網膜色素變性(retinitispigmentosa，rp)是一組視網膜光感受器異常導致的遺傳性致盲眼底病，在全世界的發病率約為1/3000～1/4000，而在中國人群的發病率可達1/3500，由于我國人口眾多，rp患者可達三十萬之眾，給家庭和社會帶來了沉重的負擔。目前針對rp的診斷和面臨許多困難，尚無有效的手段，這主要歸因于其在臨床表型和遺傳上具有高度的異質性，針對其病理機制系統研究不足。典型的rp患者早由于視桿細胞功能缺陷而出現夜盲和視野狹窄，逐步發展為管狀視野，直至失明；眼底檢查可見視網膜色素沉著。在病理學方面，典型的rp主要影響視桿細胞，造成視桿細胞死亡并繼發視錐細胞死亡，主要表現為光感受器受損、變性，視網膜外核層逐漸變薄直至消失，視網膜外網層及其他相關細胞層出現相應病理改變。此外，由于rp在臨床表型和遺傳模式上均具有高度的異質性，導致許多的rp致病機制尚不清楚，這為rp疾病的臨床診斷帶來極大困難，因此針對rp疾病的致病機制研究迫在眉睫。而目前，缺乏相應的rp疾病模型。肺泡上皮細胞及內皮損傷，造成彌漫性肺間質及肺泡水腫，導致的急性低氧性呼吸功能不全。湖北小鼠動物模型

骨質疏松癥是目前世界上發病率、死亡率和醫療保健消耗較大的疾病之一，已成為全世界范圍的嚴重的社會問題。寧夏裸鼠動物模型飼養

曾為國內、外醫藥企業做過多個藥物的臨床前藥理研究，研發產品已成功上市。在中國工作期間參加完成10項課題，在美國參與完成了NIH(NationalInstitutesofHealth)及AHA(AmericanHeartAssociation)的多個基金項目。發表學術論文60余篇，曾獲得省部級一、二等科技獎7項。在學術期刊如Nature,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,JournalofClinicalInvestigation,Circulation,CirculationResearch,Cell,NatureCommunications,NatureMetabolism,ScienceTranslationalMedicine發表多篇論文。手術疾病模型精選案例1.心肌梗死模型（左冠狀動脈結扎術）與缺血再灌注損傷模型2.主動脈弓縮窄3.慢性心力衰竭模型賽業生物可提供的小動物手術疾病模型及相關服務心腦血管系統手術心肌梗死模型（左冠狀動脈結扎術）心臟缺血再灌注損傷模型主動脈弓縮窄術(TAC)升主動脈縮窄術腹主動脈縮窄術（模型）心力衰竭模型肺動脈高壓模型大腦中動脈栓塞。寧夏裸鼠動物模型飼養