經過長時間、連續的傳代培養后，細胞系隨著代數的增加，細胞的基因型和表型都有可能發生改變。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群，除非細胞經過了遺傳改造。2、倍增和代數有什么區別？倍增是培養物中細胞總數的翻倍，通常是指細胞指數或對數生長期。代數是指細胞群從培養瓶中移出，傳代培養過程的次數，傳代培養的目的，是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。3、接收到的凍存細胞該如何處理？收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快，以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。4、凍存的細胞該如何開始培養？(1)將一管細胞從液氮罐中取出，注意保護手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉，直到管內物體完全融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉入無菌環境。(4)用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。(5)打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負壓，開蓋時可能會有少量溢出，這是正常現象）。(6)用多聚賴氨酸（或參照說明書）包被培養瓶。多數細胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細胞。。多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長。兔原代細胞實驗

下端伸入瓶身并與設于瓶身內的纖維板固定連接，并且在活動圓盤和纖維圓盤之間的連接桿上套裝有彈簧。進一步的，所述活動圓盤的四周設有密封圈。進一步的，所述彈簧處于自然狀態或輕微壓縮狀態時，活動圓盤與阻隔環相接觸。進一步的，所述纖維板采用具有阻隔和透氣特性的柔性網格纖維材料制作。進一步的，所述外接圓柱的直徑為2cm，所述正壓口的直徑為5mm，并可采用肝素帽封閉。進一步的，所述活動圓盤和纖維圓盤的直徑為。進一步的，所述加樣口為直徑，該開口可通過螺紋連接透氣瓶蓋。進一步的，所述瓶身底部的四個角設置有8個直角三角支架。本發明的有益效果如下：本發明可以根據所要爬片的組織塊大小和數量提供25cm2和75cm2兩種不同規格長方體瓶身供爬片，能提高爬片的效率。本發明采用一體式設計，減少了原代細胞提取過程中易發生的污染的可能性，另外一體式設計也減少了新手或不熟練操作流程實驗員的時間成本和器材消耗。本發明巧妙的利用纖維網格板，一方面網格板的材質是柔性的，不易因形變而碎裂，另一方面不僅可以固定組織塊，網格設計還可以讓培養基滲入，可謂一舉兩得，且網格板孔徑大小可以定制，滿足不同受眾的要求。內蒙古原代細胞外包HUVSMC(人臍靜脈血管平滑肌細胞)。

使得初學者或不熟練的實驗人員在用爬片法制備原代細胞時，會造成污染或實驗器材(實驗動物)的浪費，損失人力，物力，財力。這就急需一個出色的一體式原代細胞爬片培養瓶來滿足上述實驗需求。申請人根據多年的提取原代背根神經節膠質細胞和血管平滑肌細胞的經驗,創造性、開拓性的設計了一種一體式原代細胞爬片培養瓶。技術實現要素：本發明的目的為了解決現有培養瓶(皿)進行原代細胞爬片培養存在的許多不便和不足之處，故提出一種操作方便，結構設計合理，有助于爬片法制備原代細胞的培養瓶。為實現上述目的，本發明采用的技術方案：一種一體式原代細胞爬片培養瓶，包括瓶身，所述瓶身的其中一側端部設有爬片瓶頸和加樣口，瓶身的上端部設有外接圓柱，所述外接圓柱的頂端封閉、下端與瓶身連通，并且外接圓柱內設有活動圓盤和纖維圓盤，所述活動圓盤位于纖維圓盤的上方，活動圓盤的四周外壁與外接圓柱的內壁可滑動接觸，并且在外接圓柱內壁上設有用于限制活動圓盤向上活動的阻隔環，同時在外接圓柱位于活動圓盤上方的柱體上設有正壓口，所述纖維圓盤固定設置，并且在纖維圓盤內可活動穿插有連接桿，所述連接桿上端與活動圓盤固定連接。

置于37°培養箱。每15min搖晃一次，消化時間根據組織來定，約1-2h；5.待大部分組織塊消化成透明狀時，用40μm的細胞濾網過濾細胞，收集；6.用培養基重懸，置于培養箱培養。常見問題解答：Q：為什么我取得原代組織，分離的卻不是細胞？A：取材時，我們要熟悉所需組織的類型和部位特征，選擇細胞集中、活力較好的部分。避免結締等正常組織。Q：若是細胞中混成纖維細胞，如何去除？A：成纖維細胞的去除對于細胞培養十分重要。由于成纖維細胞貼壁速度較細胞快，可利用反復貼壁法使二者分離，進而達到成纖維細胞的目的。Q：為什么離心后，沒有細胞分離出來？A：需要考慮消化酶的因素，由于組織較致密，胰酶無法消化，一般選用膠原酶，如膠原酶Ⅳ。若是組織十分致密可以再結合機械法，如研磨或者攪拌加速細胞分散。如下表為二者的區別：膠原酶胰酶來源細菌胰臟消化組織纖維多的硬組織軟組織對細胞影響傷害小長時間有損傷作用力度緩和強注：膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細胞膠原酶，根據分離的組織類型需選擇合適的膠原酶類型。Q：消化時間如何確定？A：具體的消化酶的量和消化時間可根據組織類型和多少進行調整。Q：消化之前為什么用EDTA?A：EDTA是一種非酶消化物。若有原代細胞的培養條件及相關的實驗方案或參考文獻也可提供給我方（保密信息除外）。

windbells636買試劑盒做起來比較方便的，里面各種消化液，緩沖液，培養基都很齊全，不用自己去查資料到處購買，主要還有詳細的操作步驟，省時省力windbells636之前蟲友推薦了一家專門做原代細胞試劑盒的，好像叫CHI，樓主可以參考一下limi的猜想引用回帖:2樓:Originallypostedbywindbells636at2015-02-0909:43:44買試劑盒做起來比較方便的，里面各種消化液，緩沖液，培養基都很齊全，不用自己去查資料到處購買，主要還有詳細的操作步驟，省時省力你用試劑盒做的話純度可以達到多少？昵稱頭疼你需要養什么細胞？用試劑盒養細胞不如直接購買細胞來的方便快捷，而且現在原代細胞培養的試劑盒市面上還不多吧。我之前有聽我們實驗室的說過CHI有培養試劑盒，你可以網上搜下，但不知道效果怎么樣沒用過，不過我還是推介你直接購買細胞哦。windbells636引用回帖:4樓:Originallypostedbylimi的猜想at2015-02-0909:46:37你用試劑盒做的話純度可以達到多少？...純度可以80-90%limi的猜想引用回帖:5樓:Originallypostedby昵稱頭疼at2015-02-0909:50:39你需要養什么細胞？用試劑盒養細胞不如直接購買細胞來的方便快捷，而且現在原代細胞培養的試劑盒市面上還不多吧。人臍動脈內皮細胞，Human Umbilical Artery Endothelial Cells。黑龍江疾病模型原代細胞培養

自我更新能力和多向分化能力是干細胞的兩個基本特征。兔原代細胞實驗

且方便標號對比。為解決上述技術問題，根據本實用新型的一個方面，本實用新型提供了如下技術方案：一種可以分離的細胞培養板，其包括底座、一號培養板、二號培養板、培養皿槽和橫向標尺，所述底座頂部固定安裝有一號培養板，所述一號培養板頂部設置有梯形卡槽，所述一號培養板頂部設置有二號培養板，所述二號培養板底部固定安裝有與梯形卡槽相配合的梯形卡塊。作為本實用新型所述的一種可以分離的細胞培養板的一種方案，其中：所述一號培養板和所述二號培養板表面設置有培養皿槽，所述培養皿槽內腔側壁設置有限位槽，所述限位槽內腔固定安裝有限位彈簧，所述限位彈簧頂部貫穿限位槽設置有固定桿。作為本實用新型所述的一種可以分離的細胞培養板的一種方案，其中：所述一號培養板和二號培養板的前表面左側設置有縱向標尺，所述一號培養板和二號培養板的前表面左側設置有橫向標尺，所述一號培養板和所述二號培養板的頂部設置有防護蓋。作為本實用新型所述的一種可以分離的細胞培養板的一種方案，其中：所述梯形卡槽的前表面固定安裝有固定螺絲，所述梯形卡塊上設置有相配合的螺孔，所述梯形卡槽內腔底部設置有滑槽，梯形卡塊底部設置有與滑槽相配合的滑塊。兔原代細胞實驗